骆驼蓬碱酰胺衍生物对荔枝霜疫霉菌的作用与机理研究

发布时间：2022-02-22 14:45

　　骆驼蓬Peganum harmala L.是一种多年生草本植物,其次生代谢物骆驼蓬碱是β-咔啉类化合物,在药理学研究中显示出抗焦虑、镇静、抗疟疾、抗肿瘤、抗氧化、消炎、抗病毒、抗真菌和驱虫等广泛的作用效果。荔枝霜疫霉菌Peronophythora litchii Chen为荔枝Litchii chinensis Sonn.主要的植物病原真菌之一,对荔枝果实的产量和品质影响非常严重,每年都需要花大量的人力和物力进行防控。而且我国荔枝产区使用的杀菌剂有部分已经产生抗药性。酰胺类杀菌剂在防治卵菌纲中占有重要的地位,近期报道的新的酰胺类杀菌剂品种中,有不少对卵菌纲具有非常好的防治效果。以植物的次生代谢产物作为先导化合物开发新药剂,是世界农药研究的一个新热点。本文首次测定了29种骆驼蓬碱酰胺衍生物对六种植物病原真菌的抑制活性,进而选择其中活性最强的化合物深入研究其对荔枝霜疫霉的活性、形态结构、生理生化过程及线粒体功能的影响,探究其作用机理,结果如下:利用生长速率法,以六种植物病原真菌作为目标菌,筛选骆驼蓬碱酰胺衍生物的抑菌活性。结果表明,在100μg/mL浓度下,这些骆驼蓬酰胺碱衍生物对测定的六... 

【文章来源】：华南农业大学广东省

【文章页数】：74 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
1 前言
    1.1 骆驼蓬碱及其研究进展
    1.2 酰胺类杀菌剂
    1.3 荔枝霜疫霉病
    1.4 卵菌病害化学防治的研究进展
    1.5 选题意义及研究思路
        1.5.1 选题意义
        1.5.2 研究思路
2 材料与方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 供试病原真菌
        2.1.2 供试植物材料
        2.1.3 供试骆驼蓬酰胺碱衍生物及其配制
        2.1.4 供试培养基
        2.1.5 主要仪器设备
        2.1.6 主要试剂（包括试剂盒）
    2.2 实验方法
        2.2.1 骆驼蓬酰胺碱衍生物活性筛选
        2.2.2 骆驼蓬酰胺碱衍生物对荔枝霜疫霉的作用效果
            2.2.2.1 离体叶片法
            2.2.2.2 毒力方程测定
        2.2.3 化合物F4处理对荔枝霜疫霉菌生长发育与形态的影响
            2.2.3.1 产孢量测定
            2.2.3.2 孢子囊芽管萌发法
            2.2.3.3 菌丝生长形态观察
            2.2.3.4 孢子囊萌发芽管形态观察
            2.2.3.5 扫描电镜
            2.2.3.6 透射电镜
        2.2.4 化合物F4处理对荔枝霜疫霉菌生理生化的影响
            2.2.4.1 胞外环境p H的变化
            2.2.4.2 可溶性蛋白含量的变化
            2.2.4.3 胞外还原性糖含量的变化
            2.2.4.4 胞外水解酶（纤维素酶）活性的变化
            2.2.4.5 丙二醛(MDA)含量的变化
            2.2.4.6 NADH氧化酶（NOX）活性的变化
        2.2.5 化合物F4处理对荔枝霜疫霉菌细胞线粒体功能的影响
            2.2.5.1 线粒体缓冲液的制备
            2.2.5.2 线粒体提取与处理
            2.2.5.3 线粒体膜通透性转运孔（MPTP）开放度测定
            2.2.5.4 线粒体跨膜电位（Δ?m）测定
            2.2.5.5 线粒体呼吸链复合物活性测定
        2.2.6 数据处理
3 结果与分析
    3.1 骆驼蓬酰胺碱衍生物活性筛选
    3.2 骆驼蓬酰胺碱衍生物对荔枝霜疫霉菌的抑菌活性
        3.2.1 离体叶片法
        3.2.2 毒力方程
    3.3 化合物F4对荔枝霜疫霉菌生长发育与形态的影响
        3.3.1 化合物F4对荔枝霜疫霉菌产孢量的影响
        3.3.2 化合物F4对荔枝霜疫霉菌孢子囊萌发与芽管伸长的的影响
        3.3.3 菌丝形态变化观察
        3.3.4 孢子囊萌发芽管变化观察
        3.3.5 扫描电镜（SEM）观察
        3.3.6 透射电镜（TEM）观察
    3.4 化合物F4对荔枝霜疫霉菌生理生化的影响
        3.4.1 胞外环境p H的影响
        3.4.2 可溶性蛋白含量的影响
        3.4.3 胞外还原性糖含量的影响
        3.4.4 胞外水解酶（纤维素酶）活性的影响
        3.4.5 丙二醛（MDA）含量的影响
        3.4.6 NADH氧化酶（NOX）活性的影响
    3.5 化合物F4对荔枝霜疫霉菌线粒体功能的影响
        3.5.1 线粒体膜通透性转运孔（MPTP）开放度的影响
        3.5.2 线粒体跨膜电位（Δ?m）的影响
        3.5.3 线粒体呼吸链复合物活性的影响
4 讨论与结论
    4.1 讨论
        4.1.1 骆驼蓬碱酰胺衍生物的抑菌活性
        4.1.2 化合物F4处理对荔枝霜疫霉菌生长发育与形态的抑制作用
        4.1.3 化合物F4处理对荔枝霜疫霉菌生理生化的抑制作用
        4.1.4 化合物F4处理对荔枝霜疫霉菌细胞线粒体的抑制作用
    4.2 结论
    4.3 本研究的创新点
    4.4 有待进一步的研究内容
致谢
参考文献
附录A 攻读硕士学位期间发表的论文及奖励情况


【参考文献】：
期刊论文
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[2]我国荔枝产区杀菌剂的使用现状及建议[J]. 彭埃天,凌金锋,习平根,宋晓兵,冼继东,姜子德.  中国热带农业. 2011(05)
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[5]酰胺类除草剂制剂的研发和进展[J]. 华乃震.  现代农药. 2011(01)
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[9]从世界粮食的需求及世界农业发展看农药的重要性[J]. 张一宾.  世界农药. 2009(01)
[10]我国植物源农药的研究及问题分析[J]. 丛大鹏.  农药研究与应用. 2009(01)

博士论文
[1]苦参内生真菌抑菌物质纯化鉴定及作用机制研究[D]. 何璐.沈阳农业大学 2011

硕士论文
[1]丁吡吗啉对辣椒疫霉菌细胞壁作用机理研究[D]. 叶玉涛.中国农业科学院 2013
[2]β-咔啉类生物碱的合成及其生物活性[D]. 杨冰.西北农林科技大学 2011
[3]丁吡吗啉对辣椒疫霉菌的作用方式及作用机理探讨[D]. 秦维彩.安徽农业大学 2010
[4]Cr（Ⅵ）对大鼠离体肝细胞线粒体呼吸功能的影响[D]. 邓媛媛.中南大学 2010



本文编号：3639661