西瓜枯萎病拮抗菌分离纯化鉴定及生物防治

发布时间：2022-07-11 18:22

　　随着西瓜产业不断的发展,西瓜种植面积的不断扩大,由西瓜连作引起的西瓜枯萎病病害日益加重,严重制约了西瓜生产和瓜农收入。西瓜枯萎病作为西瓜生产过程中最为严重的土传病害之一,越来越受大家的关注。因此,研究西瓜枯萎病的防治对西瓜生产具有重大意义。传统的防治方法虽然在不同程度上起到较好的防治效果,但由于其在实际操作中的复杂性以及其对环境的影响,高效环保、简单易行的生物防治备受关注。利用有益微生物或者拮抗微生物控制西瓜枯萎病病原菌,减少病害的发生,是一种很有应用价值的生防措施。本文目的在于筛选出高效抑制西瓜尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum f. sp. niveum）的拮抗菌,探讨其与有机肥结合制成的生物有机肥对西瓜枯萎病的防治效果。主要研究结果如下：本试验通过系列稀释法、平板对峙法,从多年大棚种植辣椒的健康植株的根际土中分离筛选出3株有明显拮抗作用的拮抗放线菌F22、F23、F32,通过形态特征、生理生化特征以及分子生物学特征鉴定,初步鉴定为拮抗放线菌F32和F23为链霉菌属（Streptomyces sp.）,拮抗放线菌F22为中间气单胞菌Aeromonas media。在抗... 

【文章页数】：78 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
第一章 前言
    1.1 研究背景
    1.2 西瓜连作障碍机理研究进展
        1.2.1 西瓜连作障碍概述
        1.2.2 西瓜枯萎病及其发病规律
    1.3 西瓜枯萎病的防治进展
        1.3.1 农业防治
        1.3.2 化学防治
        1.3.3 物理防治
        1.3.4 抗性育种防治
        1.3.5 嫁接防治
        1.3.6 生物防治
            1.3.6.1 生防细菌
            1.3.6.2 生防放线菌
            1.3.6.3 生防真菌与非致病性镰刀菌
            1.3.6.4 微生物有机肥
    1.4 研究西瓜枯萎病的目的与意义
    1.5 技术路线图
第二章 西瓜枯萎病拮抗菌的分离筛选与鉴定
    2.1 材料与方法
        2.1.1 材料
            2.1.1.1 供试病原菌
            2.1.1.2 供试土样
            2.1.1.3 培养基与试剂
        2.1.2 试验方法
            2.1.2.1 土壤的采集与制备
            2.1.2.2 拮抗菌株的分离纯化
            2.1.2.3 拮抗菌株的初筛选
            2.1.2.4 拮抗菌菌株的复筛选
            2.1.2.5 拮抗菌株形态学特征鉴定
            2.1.2.6 生理生化鉴定
            2.1.2.7 分子生物学鉴定
    2.2 结果与分析
        2.2.1 拮抗菌的分离与筛选
        2.2.2 拮抗菌的表型鉴定
        2.2.3 拮抗菌株的生理生化鉴定
        2.2.4 拮抗菌株16S rDNA基因序列鉴定结果
    2.3 讨论
第三章 拮抗链霉菌F32的生物学特征和拮抗性能研究
    3.1 材料与方法
        3.1.1 材料
            3.1.1.1 供试菌株
            3.1.1.2 培养基
        3.1.2 方法
            3.1.2.1 抑菌谱试验
            3.1.2.2 温度对菌株F32生长的影响
            3.1.2.3 pH值对菌株F32生长的影响
            3.1.2.4 培养基对菌株F32生长的影响
            3.1.2.5 温度对菌株F32拮抗作用的影响
            3.1.2.6 pH值对菌株F32拮抗作用的影响
            3.1.2.7 培养时间对菌株F32拮抗作用的影响
            3.1.2.8 培养基对菌株F32拮抗作用的影响
            3.1.2.9 菌液浓度对菌株F32拮抗作用的影响
    3.2 结果与分析
        3.2.1 拮抗菌株F32的抗菌谱
        3.2.2 拮抗菌株F32生长温度
        3.2.3 拮抗菌株F32生长最适pH值
        3.2.4 拮抗菌株F32生长最适培养基
        3.2.5 菌株F32拮抗活性最适温度
        3.2.6 菌株F32拮抗活性最适pH值
        3.2.7 菌株F32拮抗活性最适培养时间
        3.2.8 菌株F32拮抗活性最适培养基
        3.2.9 菌液浓度对菌株F32拮抗活性的影响
    3.3 讨论
第四章 拮抗链霉菌F32对西瓜枯萎病的生物防治
    4.1 材料与方法
        4.1.1 材料
            4.1.1.1 供试菌株
            4.1.1.2 培养基
            4.1.1.3 供试品种
            4.1.1.4 供试土壤
            4.1.1.5 供试肥料
        4.1.2 方法
            4.1.2.1 孢子悬液制备
            4.1.2.2 西瓜育苗
            4.1.2.3 不同拮抗菌对西瓜尖孢镰刀菌的影响
            4.1.2.4 生物有机肥对西瓜尖孢镰刀菌的影响
            4.1.2.5 病情调查与计算
            4.1.2.6 西瓜植株株高的测定
            4.1.2.7 相关抗性酶活测定
    4.2 结果与分析
        4.2.1 不同拮抗菌对FON的影响
        4.2.2 菌株F32生物有机肥对西瓜枯萎病的防治效果
        4.2.3 菌株F32混合菌剂生物有机肥对西瓜枯萎病的防治效果
        4.2.4 生物有机肥对西瓜株高的影响
        4.2.5 生物有机肥对西瓜叶片细胞脂质过氧化物丙二醛(MDA)的影响
        4.2.6 生物有机肥对西瓜过氧化氢酶(CAT)的影响
        4.2.7 生物有机肥对西瓜超氧化物歧化酶(SOD)的影响
        4.2.8 生物有机肥对西瓜过氧化物酶(POD)的影响
    4.3 讨论
第五章 结论与展望
    5.1 结论
    5.2 创新点
    5.3 存在的问题和不足
    5.4 展望
参考文献
致谢
个人简介
研究生期间成果



本文编号：3658652