黄秋葵ζ-胡萝卜素脱氢酶基因（HeZDS）的克隆与表达分析

发布时间：2022-07-16 17:27

　　胡萝卜素脱氢酶（ζ-carotene desaturase, ZDS）是类胡萝卜素合成的重要限速酶,其催化ζ-胡萝卜素生成番茄红素。本研究根据黄秋葵（Hibiscus esculentus）转录组测序获得的序列数据,设计引物克隆得到1条2 189 bp的ZDS基因cDNA全长,其具有1 686 bp的ORF;编码561个氨基酸,理论分子量为61.79kD,等电点（pI）为6.807;编码的蛋白与亚洲棉（Gossypium arboreum）、陆地棉（G. hirsutum）、黄麻（Corchorus capsularis）、榴莲（Durio zibethinus）、可可（Theobroma cacao）等蛋白的同源性均超过90%,显示其高度的保守性,将基因命名为HeZDS,GenBank登录号为:MG372371。qRT-PCR定量分析表明,黄秋葵根、茎、叶、花和果实等器官中都有检测到HeZDS基因;叶发育过程中以成熟叶中表达量最高,果实发育中以花后2 d高表达。HeZDS基因的表达与类胡萝卜素含量存在密切的相关性。本研究为HeZDS的功能和类胡萝卜素调控机制研究提供了资料基础。 

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 实验材料
    1.2 仪器和试剂
    1.3 转录组测序
    1.4 HeZDS基因的生物信息学分析
    1.5 HeZDS基因的实时荧光定量分析
    1.6 类胡萝卜素提取和测定
2 结果与分析
    2.1 HeZDS基因克隆与验证
    2.2 HeZDS基因序列的生物信息分析
    2.3 HeZDS基因的表达分析
        2.3.1 黄秋葵不同品种不同组织中HeZDS基因表达
        2.3.2 黄秋葵叶片发育过程中HeZDS基因的表达
        2.3.3 黄秋葵果实发育过程中HeZDS基因的表达
    2.4 类胡萝卜素积累量分析
        2.4.1 黄秋葵不同组织类胡萝卜素积累量分析
        2.4.2 黄秋葵叶片不同发育阶段类胡萝卜素积累量分析
        2.4.3 黄秋葵果实不同发育阶段类胡萝卜素积累量分析
    2.5 HeZDS基因表达与类胡萝卜素积累量的相关性分析
3 讨论
4 结论


【参考文献】：
期刊论文
[1]黄秋葵八氢番茄红素合成酶PSY基因的克隆与分析[J]. 李永平,陈敏氡,朱海生,温庆放,刘建汀,林思锻.  中国细胞生物学学报. 2019(10)
[2]黄秋葵八氢番茄红素脱氢酶基因的克隆与分析[J]. 李永平,王彬,陈敏氡,刘建汀,朱海生,温庆放.  西北植物学报. 2019(07)
[3]桃果实ζ-胡萝卜素脱氢酶基因克隆及表达分析[J]. 梁敏华,杨震峰,苏新国,宋春波.  南方农业学报. 2018(05)
[4]鹤望兰ζ–胡萝卜素脱氢酶基因SrZDS的克隆及表达分析[J]. 樊荣辉,黄敏玲,钟淮钦,林兵.  园艺学报. 2016(05)
[5]黄瓜ζ-胡萝卜素脱氢酶基因克隆及表达分析[J]. 王柬人,李锡香,王海平,邱杨,宋江萍,张晓辉,沈镝.  分子植物育种. 2012(05)
[6]草莓ζ-胡萝卜素脱氢酶基因ZDS的克隆及特征分析[J]. 李永平,朱海生,温庆放,花秀凤,林珲.  热带亚热带植物学报. 2010(06)
[7]14个黄秋葵品系叶黄素和β-胡萝卜素产量比较试验[J]. 刘东祥,叶花兰,刘国道.  中国农学通报. 2006(06)
[8]通过转基因提高β-胡萝卜素生物合成量[J]. 季静,山村三郎,西原昌宏,王罡,小岩弘之,朱长甫.  中国生物化学与分子生物学报. 2004(04)



本文编号：3662946