不同细胞质的金针菇菌丝差异蛋白分析

发布时间：2022-08-09 13:07

　　以黄色金针菇（Flammulina filiformis）单核菌株Y33和白色金针菇单核菌株W8为供试菌株,采用双向核迁移技术,获得一对具有相同细胞核、不同细胞质的双核菌株Y8-33和W8-33（简称异质双核菌株）。采用菌落形态观察、显微镜检查与分子标记对这两个双核菌株进行验证分析,并以菌株W8-33菌丝样品为对照,采用双向凝胶电泳技术对金针菇异质双核菌株菌丝的蛋白质组进行分析。结果表明:异质双核菌株Y8-33和W8-33菌丝均具有锁状联合结构,在菌落形态上呈现明显差异,但ISSR分子标记的PCR扩增产物具有很高的相似性。在Y8-33菌丝样品中共鉴定出17个差异蛋白,包括8个上调蛋白、9个下调蛋白;其中,14-3-3蛋白、微管蛋白、谷胱甘肽-S-转移酶、果糖二磷酸醛缩酶、ARF/SAR蛋白家族以及热激蛋白HSP90、HSP70和HSS1差异蛋白可能在由于受体细胞不同所导致的不同细胞质环境下,对金针菇的生长生理起到重要的调控作用。 

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 供试菌株
    1.2 主要试剂与仪器
    1.3 异质双核菌株的获取
    1.4 单核菌株和异质双核菌株的菌落形态观察与镜检
    1.5 异质双核菌株的分子验证
    1.6 菌丝液体培养与收集
    1.7 蛋白质的提取
    1.8 蛋白质浓度的测定
    1.9 蛋白质组双向电泳图谱分析
    1.10 基质辅助激光解吸电离质谱分析与数据库检索
2 结果与分析
    2.1 单核菌株和异质双核菌株的菌落形态观察与显微镜镜检结果
    2.2 异质双核菌株的ISSR鉴定
    2.3 金针菇异质双核菌株的菌丝蛋白质双向电泳图谱分析结果
    2.4 差异蛋白的鉴定与分类
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
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[3]双向核迁移在香菇遗传和育种中的应用研究[J]. 刘靖宇,刘新锐,邓优锦,刘芳,谢宝贵.  菌物学报. 2011(05)
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硕士论文
[1]超表达高粱果糖-1，6-二磷酸醛缩酶基因（SbFBA）拟南芥对干旱胁迫的响应[D]. 刘军霞.西北农林科技大学 2015



本文编号：3672613