水杨酸诱导下(木奈)抗性相关基因的分离与表达研究

发布时间：2022-10-22 17:25

　　喷施水杨酸可以诱导植物抗逆性相关基因的大量表达,提高植物对逆境胁迫如生物胁迫（如病虫害等）和非生物胁迫（如气象灾害、土壤胁迫等）的抵抗能力,具有绿色、环保、高效的优点,可成为植物病虫害防治和提高逆境适应能力的新途径,分离水杨酸诱导表达的抗病和抗逆性相关基因,对于植物抗逆性的遗传改良和提高植物对逆境胁迫的适应性具有重要的理论意义和实践价值。（木奈）（Prunus salicina Lindli. var cordata J.Y.Zhang et al.）属蔷薇科（Rosaceae）李属（Prunus）,是原产福建的名、特、优的核果类果树之一,具有重要的经济价值。本研究以一年生（木奈）嫁接苗为材料,用不同浓度的水杨酸喷施叶片,在处理后的不同间取样,提取总RNA；采用稀释池PCR法,筛选（木奈）叶片富含全长均一化cDNA文库,获得与水杨酸诱导抗逆性相关的NPR1和WRKY同源基因的全长cDNA,采用荧光定量PCR技术,检测这些基因在不同水杨酸浓度和处理时间上表达量的差异,找出抗逆性基因高表达的最佳水杨酸处理条件；用最佳浓度水杨酸喷施（木奈）苗叶片,取喷施后30.0 h和0.0 h的叶片为材料... 

【文章页数】：103 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
缩略词
摘要
Abstract
第一章 引言
    1 研究背景与意义
    2 文献综述
        2.1 (木奈)抗性的分子生物学研究进展
        2.2 水杨酸在植物体内的生物合成
        2.3 调控水杨酸信号转导途径的转录因子
        2.4 水杨酸信号与植物天然免疫系统
        2.5 外源水杨酸与植物抗非生物胁迫
            2.5.1 水杨酸与植物抗旱性
            2.5.2 水杨酸与植物抗寒性
            2.5.3 水杨酸与植物抗盐性及渗透胁迫
    3 研究内容
    4 研究的技术路线
第二章 (木奈)NPR1和WRKY同源基因全长cDNA的分离与表达分析
    1 材料与方法
        1.1 试验材料
        1.2 试验方法
            1.2.1 取样
            1.2.2 (木奈)NPR1和WRKY同源基因全长cDNA的筛选
            1.2.3 (木奈)NPR1和WRKY同源基因全长cDNA的生物信息学分析
            1.2.4 (木奈)NPR1和WRKY同源基因表达量的检测
    2 结果与分析
        2.1 (木奈)NPR1同源基因的分离与生物信息学分析
        2.2 (木奈)NPR1同源基因的表达分析
        2.3 (木奈)WRKY同源基因的分离与生物信息学分析
        2.4 (木奈)WRKY同源基因的表达分析
    3 讨论
        3.1 外源水杨酸处理的最适浓度和最佳响应时间
        3.2 NPR1是水杨酸信号转导途径中的主要调控因子
            3.2.1 (木奈)NPR1同源基因结构特点与功能预测
            3.2.2 (木奈)NPR1同源基因在水杨酸诱导下的表达模式
        3.3 WRKY转录因子参与水杨酸信号转导途径
            3.3.1 (木奈)WRKY转录因子的结构与分类
            3.3.2 (木奈)WRKY在外源水杨酸诱导下的表达模式
第三章 水杨酸诱导下抗逆性相关差异基因的分离
    1 材料与方法
        1.1 实验材料
        1.2 试验方法
            1.2.1 DSN介导-抑制差减杂交cDNA文库的构建
            1.2.2 DSN介导-抑制差减杂交cDNA文库的筛选
            1.2.3 差减文库阳性克隆的测序与分析
            1.2.4 差异基因荧光定量表达分析
    2 结果与分析
        2.1 (木奈)叶片总RNA的质量与ds cDNA合成
        2.2 不同DSN浓度处理对差异ds cDNA扩增的影响
        2.3 DSN介导-抑制差减cDNA文库的质量评价
        2.4 阳性克隆的测序与生物信息学分析
        2.5 差异基因荧光定量表达分析
    3 讨论
小结
附录
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]黄瓜几丁质酶基因克隆及与白粉病抗性关系的初步研究[J]. 罗晶晶,张仁英,齐晓花,徐强,陈学好.  分子植物育种. 2015(07)
[2]福建产业发展现状及前景[J]. 姜翠翠,孙文鹏,叶新福,方智振,周丹蓉,潘少霖.  东南园艺. 2015(02)
[3]几丁质酶及基因参与水杨酸诱导香蕉枯萎病抗性[J]. 侯晓婉,徐碧玉,胡伟,颜彦,金志强.  广东农业科学. 2015(07)
[4]花生中UDP-葡萄糖基转移酶基因的克隆及在非生物胁迫下的表达研究[J]. 陈娜,胡东青,潘丽娟,迟晓元,陈明娜,王通,王冕,杨珍,禹山林.  中国油料作物学报. 2014(03)
[5]植物GRAS家族转录因子的研究现状[J]. 李桂英,田玉富,杨成君.  安徽农业科学. 2014(14)
[6]富士苹果MdWRKY40b基因克隆及其对白粉病的抗性分析[J]. 罗昌国,袁启凤,裴晓红,吴亚维,郑伟,章镇.  西北植物学报. 2013(12)
[7]苹果NBS-LRR1基因的鉴定与表达分析[J]. 宋霄,柏素花,戴洪义.  园艺学报. 2013(07)
[8]水杨酸对梨SOD、PPO同工酶和NPR1表达的影响[J]. 高丽娟,张玉星.  园艺学报. 2013(01)
[9]香蕉NPR1基因的克隆及植物表达载体构建[J]. 陆英,张欣,漆艳香,蒲金基,谢艺贤.  热带作物学报. 2010(09)
[10]WRKY转录因子功能研究进展[J]. 张娟.  西北植物学报. 2009(10)

博士论文
[1]湖北海棠抗病相关基因的克隆及其功能分析[D]. 张计育.南京农业大学 2011

硕士论文
[1]水稻OsmtATPS1基因的克隆及功能初步分析[D]. 张毛毛.西北农林科技大学 2015
[2]（木奈）芽叶蜡质形成关键酶基因的分离与表达研究[D]. 赵利.福建农林大学 2014
[3]夜来香生物钟及花香基因的克隆[D]. 吕恃衡.福建农林大学 2013
[4]中国水仙MYB转录因子基因的克隆与表达分析[D]. 杨晔.福建农林大学 2013
[5]辣椒内参基因的筛选及NBS-LRR类抗病基因同源序列的鉴定[D]. 赵敬.南京农业大学 2012
[6]夜来香均一化全长cDNA文库的构建与花香相关基因的遗传转化[D]. 郑鸿昌.福建农林大学 2012
[7]小麦UDP-葡萄糖基转移酶基因Ta-UGT3的表达载体构建和转化小麦研究[D]. 裴海岩.南京农业大学 2011



本文编号：3696533