miR6027在番茄果实中的表达分析及STTM沉默载体的转化

发布时间：2023-02-13 19:19

　　为探究Sl-miR6027在果实成熟过程中的功能,本研究利用生物信息学方法,分析了Sl-miR6027在番茄果实发育过程中的表达模式,同时对Sl-miR6027启动子中存在的顺式作用元件和Sl-miR6027的靶基因进行预测;依据Sl-miR6027成熟序列,设计STTM寡核苷酸序列,构建pCambia-STTM6027沉默载体;采用农杆菌介导法转化番茄,通过PCR筛选阳性转化植株并进行初步的表型分析。结果表明:Sl-miR6027在绿熟期表达量最高;Sl-miR6027启动子中存在20个光应答元件和一些非生物胁迫应答元件;Solyc09g098130为Sl-miR6027潜在的靶基因,二者在果实成熟不同时期表达量呈负相关,且其表达水平受到光照的调节;依据Sl-miR6027成熟序列成功构建出pCambia-STTM6027沉默载体;pCambia-STTM6027转基因番茄表型分析表明Sl-miR6027参与调节红熟期番茄果实颜色。上述结果初步表明Sl-miR6027参与调节番茄果实成熟过程。

【文章页数】：8 页

【文章目录】：
1 结果与分析
    1.1 Sl-miR6027在果实不同发育时期的动态表达模式分析
    1.2 Sl-miR6027启动子中存在果实成熟过程相关的顺式作用元件
    1.3 Solyc09g098130被预测为Sl-miR6027潜在的靶基因
    1.4 靶基因Solyc09g098130的表达受光照调节
    1.5 构建了pCambia1300-STTM6027植物沉默表达载体
    1.6 农杆菌介导转化番茄并获得阳性植株
    1.7 沉默Sl-miR6027的表达影响了成熟期番茄果实的颜色
2 讨论
3 材料与方法
    3.1 试验材料
    3.2 miRNA表达分析
    3.3 启动子分析
    3.4 靶基因预测
    3.5 靶基因的光调控表达模式
    3.6 构建SMMT-6027沉默载体
    3.7 农杆菌介导番茄转化及检测
    3.8 定量PCR
作者贡献



本文编号：3742157