解淀粉芽孢杆菌BP30对梨采后灰霉病病害的生物防治研究

发布时间：2023-03-27 18:56

　　解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)是一种与枯草芽孢杆菌亲缘性很高的革兰氏阳性菌,具有运动性,在生长过程中能产生一系列的抑菌代谢物并能生成芽孢。解淀粉芽孢杆菌具有来源广、抗菌谱广、安全且发酵周期短等优点,在微生物拮抗剂防治果蔬采后病害方面受到越来越多的关注。本研究通过平板对峙实验,筛选获得一株对梨釆后病原真菌灰葡萄孢具有较高拮抗性的解淀粉芽孢杆菌,研究了其对梨釆后灰霉病害的生防效果,并对其生防的机理进行了研究。主要研究结果如下:(1)通过平板对峙实验,筛选获得一株对梨釆后病原真菌灰葡萄孢具有良好拮抗作用的芽孢杆菌,通过形态观察、生理生化检测及16S rRNA序列分析,确定其为解淀粉芽孢杆菌,将其命名为:解淀粉芽孢杆菌BP30。(2)BP30能够有效控制灰霉病,当在25℃储存7天时,对照组梨果的病变率为100%,解淀粉芽孢杆菌处理的梨从低浓度组(1×106CFU/m L)至高浓度组(1×108CFU/mL)病变率逐渐降低,说明解淀粉芽孢杆菌细胞悬浮液的浓度对其防治梨灰霉病的功效有很大影响,浓度越高,病变率越低,病变直径越小。并且,在0℃储存30天的经解淀...

【文章页数】：51 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
1 前言
    1.1 梨采后病害的发生和防治
        1.1.1 我国梨产业现状
        1.1.2 梨采后病害
        1.1.3 梨采后病害防治主要措施
    1.2 拮抗菌作为生防菌的拮抗机制
        1.2.1 直接作用：分泌抗生素
        1.2.2 营养与空间竞争
        1.2.3 重寄生机制
        1.2.4 诱导水果产生抗性
            1.2.4.1 诱导产生防御酶
            1.2.4.2 诱导产生结构抗性
            1.2.4.3 调节活性氧代谢
            1.2.4.4 诱导产生植物保卫素（PA）
    1.3 解淀粉芽孢杆菌的研究
        1.3.1 来源
        1.3.2 抑菌活性物质
            1.3.2.1 抑菌蛋白
            1.3.2.2 脂肽类物质
            1.3.2.3 聚酮化合物
        1.3.3 应用
            1.3.3.1 环境保护
            1.3.3.2 保鲜防腐
            1.3.3.3 生产
    1.4 研究目的及意义
2 材料与方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 供试菌株
        2.1.2 供试水果
        2.1.3 培养基
        2.1.4 主要仪器设备
    2.2 拮抗菌株的筛选
        2.2.1 灰葡萄孢孢子悬浮液的制备
        2.2.2 对灰葡萄孢有拮抗作用的菌株筛选
    2.3 拮抗菌株的鉴定
        2.3.1 菌体形态、培养特征观察与生理生化指标测定
        2.3.2 菌株 16S rRNA基因序列同源性分析
    2.4 拮抗菌株对梨灰霉病病害的防治
        2.4.1 拮抗菌株控制梨灰霉病的效果
        2.4.2 拮抗菌株处理后对梨果的质量参数影响
            2.4.2.1 质量损失
            2.4.2.2 维生素C含量
            2.4.2.3 滴定酸度
            2.4.2.4 水果坚硬度
            2.4.2.5 总可溶物含量
    2.5 对灰葡萄孢拮抗机理研究
        2.5.1 拮抗菌株四种不同处理液对灰葡萄孢的抑制效果
        2.5.2 拮抗菌株在梨伤口处的数量研究
        2.5.3 拮抗菌株对灰葡萄孢孢子萌发的影响
        2.5.4 生物膜形成能力
        2.5.5 对梨果实的诱导抗病性防御机制的研究
            2.5.5.1 类黄酮测定
            2.5.5.2 过氧化物酶活性测定
            2.5.5.3 多酚氧化酶活性测定
            2.5.5.4 苯丙氨酸解氨酶测定
3 结果与分析
    3.1 对灰葡萄孢有拮抗作用的菌株筛选结果
    3.2 拮抗菌株的鉴定
        3.2.1 菌体形态、培养特征观察与生理生化指标测定
        3.2.2 菌株 16S rRNA基因序列同源性分析
    3.3 菌株BP30对梨灰霉病病害的防治效果
        3.3.1 解淀粉芽孢杆菌BP30控制梨灰霉病的效果
        3.3.2 解淀粉芽孢杆菌BP30处理后对梨果的质量参数影响
    3.4 解淀粉芽孢杆菌对灰葡萄孢拮抗机理研究
        3.4.1 解淀粉芽孢杆菌BP30四种不同处理液对灰葡萄孢的抑制效果
        3.4.2 解淀粉芽孢杆菌BP30在梨伤口处的数量变化
        3.4.3 解淀粉芽孢杆菌BP30对灰葡萄孢孢子萌发影响的结果
        3.4.4 生物膜形成能力的影响
        3.4.5 对梨果实的诱导抗病性防御机制的研究
            3.4.5.1 类黄酮含量测定结果
            3.4.5.2 过氧化物酶活性测定结果
            3.4.5.3 多酚氧化酶活性测定结果
            3.4.5.4 苯丙氨酸解氨酶测定结果
4 讨论
5 结论
参考文献
致谢
攻读学位期间发表论文情况



本文编号：3772676