几个蓝莓品种离体叶片再生及遗传转化体系的优化

发布时间：2023-04-20 05:44

　　蓝莓(Vaccinium spp.)是一种极具经济价值和保健价值的果实,随着市场多样化需求的增加,通过生物技术育种,提升蓝莓果实产量和品质迫在眉睫。利用生物技术进行的根癌农杆菌介导的植物遗传转化已经在多种果树中成功应用,但在蓝莓中仍然存在品种转化效率低下、转化困难等问题。本研究以高丛蓝莓品种‘北陆’(Northland)、‘圣蓝’(Millennia)、‘喜来’(Sierra)、‘莱格西’(Legacy)、‘蓝源’(Bluesouth)为材料,通过不同激素组合和浓度试验,优化蓝莓叶片不定芽再生体系及建立蓝莓叶片愈伤组织再生体系;通过分析根癌农杆菌侵染浓度和时间、共培养天数、抑菌剂浓度等因子的影响效果,以期对蓝莓遗传转化体系进行优化,为后续蓝莓基因功能的研究和育种工作提供技术支撑。主要研究结果如下:(1)优化了4个蓝莓品种‘北陆’、‘圣蓝’、‘喜来’、‘莱格西’叶片再生不定芽体系,筛选出4个品种诱导不定芽培养基以WPM+4.0 mg/L ZT+30 g/L蔗糖+6.5 g/L琼脂粉为佳。其中,‘北陆’叶片不定芽诱导率为60%,‘圣蓝’叶片不定芽诱导率为81.67%,‘喜来’叶片不定芽诱导...

【文章页数】：62 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
1 引言
    1.1 研究背景
    1.2 木本植物组织培养研究进展
    1.3 蓝莓组织培养研究进展
        1.3.1 植物生长调节剂种类及浓度
        1.3.2 外植体类型
        1.3.3 基因型
    1.4 木本植物遗传转化研究进展
        1.4.1 影响农杆菌介导木本植物遗传转化效率的因素
        1.4.2 根癌农杆菌介导蓝莓遗传转化的研究进展
    1.5 研究的目的与意义
    1.6 技术路线图
2 材料与方法
    2.1 材料
        2.1.1 植物材料
        2.1.2 主要试剂及常用培养基配制
    2.2 主要实验仪器
    2.3 实验方法
        2.3.1 蓝莓叶片再生不定芽试验
        2.3.2 蓝莓愈伤组织再生体系的建立
        2.3.3 蓝莓遗传转化体系的优化
3 结果分析
    3.1 叶片再生不定芽优化试验
        3.1.1 不同培养基配方对不同蓝莓品种叶片再生不定芽的效果
    3.2 蓝莓愈伤组织再生体系的建立
        3.2.1 不同造伤方式对叶片生成愈伤组织的效果
        3.2.2 不同光照处理对蓝莓叶片生成愈伤组织的效果
        3.2.3 不同培养基配方对蓝莓叶片愈伤组织诱导的效果
        3.2.4 不同继代方式对愈伤组织生长的作用
        3.2.5 不同培养基配方对蓝莓叶片愈伤组织继代的效果
    3.3 蓝莓遗传转化体系的优化
        3.3.1 各蓝莓品种叶片卡那霉素选择压浓度筛选试验
        3.3.2 根癌农杆菌侵染时间试验
        3.3.3 共培养时间筛选试验
        3.3.4 根癌农杆菌侵染浓度试验
        3.3.5 不同浓度抑菌剂对农杆菌的抑制试验
        3.3.6 蓝莓Km抗性芽获得
4 讨论
    4.1 不同因素对蓝莓叶片再生的影响
    4.2 不同因素对诱导蓝莓叶片愈伤组织的影响
    4.3 不同因素对蓝莓叶片遗传转化效率的影响
    4.4 对蓝莓遗传转化体系的展望
5 结论
    5.1 蓝莓叶片再生不定芽试验优化结果
    5.2 蓝莓愈伤组织再生试验结果
    5.3 蓝莓遗传转化体系优化结果
附录A 缩写表
参考文献
个人简介
导师简介
致谢



本文编号：3795005