微丝骨架在小麦抗番茄白粉病中的作用及相关基因表达研究

发布时间：2023-04-25 01:08

　　番茄白粉病近年来在北方设施和露地番茄上发生危害严重,且有蔓延之势。目前番茄抗白粉病品种缺乏,而选用抗病品种是防治番茄白粉病的理想途径,抗白粉病机制的研究则是番茄抗病育种的基础和前提。非寄主抗性是植物识别并抵御潜在病原菌侵染的最普遍抗病机制,细胞骨架在植物非寄主抗性中发挥重要作用。本研究观察了番茄白粉菌在非寄主小麦上的侵染和主要抗病性反应;微丝骨架解聚对番茄白粉菌与小麦非寄主互作中主要抗病性反应的影响;以及微丝骨架解聚因子ADF4和病程相关蛋白基因PR1,PR2和PR3在非寄主互作中的表达特征。研究结果为进一步加深对非寄主抗性机制的了解提供依据。主要结果如下:1.番茄白粉菌在非寄主小麦上的侵染研究:组织学染色结果表明,番茄白粉菌在非寄主小麦上可以正常萌发。在12 h萌发率为77.5%,24 h萌发率达到85%以上;孢子萌发产生芽管;后形成裂瓣状附着胞,裂瓣数目1⁵个;之后在附着胞下端观察到乳突的形成,乳突产生随时间推移呈上升趋势,到96 h时达到最高,为39.11%。2.番茄白粉菌与小麦非寄主互作中的主要抗病性反应研究:DAB和台盼蓝染色结果发现,在小麦与番茄白粉菌...

【文章页数】：44 页

【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
第一章 文献综述
    1.1 番茄白粉病发生危害
        1.1.1 番茄白粉病发生危害概况
        1.1.2 番茄白粉病危害症状
    1.2 植物的非寄主抗病性概述
        1.2.1 植物的非寄主抗病性类型
    1.3 植物非寄主主要防卫反应
        1.3.1 H₂O₂积累
        1.3.2 乳突形成
        1.3.3 植物过敏性坏死
        1.3.4 病程相关蛋白
    1.4 细胞骨架在植物抗病反应中的作用
        1.4.1 微丝骨架的动态变化
        1.4.2 细胞骨架与抗病反应的关系
        1.4.3 细胞骨架参与非寄主抗性
    1.5 本研究的目的及意义
第二章 材料和方法
    2.1 试验材料、试剂及仪器
        2.1.1 供试材料及培育
        2.1.2 供试病原菌及繁殖
        2.1.3 供试试剂及仪器
    2.2 试验方法
        2.2.1 药物配制及注射浓度
        2.2.2 药物注射方法与接菌方法
        2.2.3 接种及样品采集
        2.2.4 H₂O₂染色观察
        2.2.5 乳突观察
        2.2.6 HR染色观察
        2.2.7 小麦叶片总RNA的提取
        2.2.8 RNA浓度、纯度及完整性检测
        2.2.9 cDNA第一链的合成及检测
        2.2.10 设计引物与检测
        2.2.11 退火温度的优化
        2.2.12 微丝骨架解聚因子ADF4以及病程相关蛋白基因PR1、PR2和PR3在小麦抗番茄白粉病中表达特征变化
第三章 结果与分析
    3.1 番茄白粉菌在非寄主小麦上的侵染
        3.1.1 孢子萌发及附着胞形成情况
        3.1.2 乳突的形成情况
    3.2 番茄白粉菌与小麦非寄主互作中的主要抗病性反应研究
        3.2.1 番茄白粉菌与小麦非寄主互作中H₂O₂的积累情况
        3.2.2 番茄白粉菌与小麦非寄主互作中过敏性坏死发生情况
    3.3 微丝解聚对番茄白粉菌与小麦非寄主互作中主要抗病性反应的影响
        3.3.1 微丝解聚对番茄白粉菌侵染小麦叶片过程中H₂O₂积累的影响
        3.3.2 微丝解聚在番茄白粉菌侵染小麦叶片过程中过敏性坏死的产生情况
    3.4 微丝骨架解聚因子ADF4和病程相关蛋白基因PR1、PR2和PR3在非寄主互作中的表达情况
        3.4.1 总RNA完整性、纯度和浓度的检测
        3.4.2 第一链cDNA的合成和检测
        3.4.3 引物验证及退火温度的优化
        3.4.4 微丝骨架解聚因子ADF4在番茄白粉菌与小麦非寄主互作中表达变化情况
        3.4.5 病程相关蛋白基因PR1、PR2和PR3在番茄白粉菌与小麦非寄主互作中表达变化情况
第四章 讨论
第五章 结论
参考文献
致谢
作者简介



本文编号：3800399