南瓜（C. moschata Duch.）再生技术优化与遗传转化体系建立

发布时间：2023-05-31 23:11

　　南瓜属植物是我国广泛种植的重要作物之一,它具有良好的营养与观赏价值,抗逆性强且可作为砧木应用于瓜类植物的嫁接。目前南瓜属作物的产量和质量受病害等因素影响较为严重,通过基因工程的技术手段创造新品种是解决其病害等问题的有效方法,也是实现品种改良的重要途径,但以往对于中国南瓜离体再生及遗传转化的研究相对较少。本研究以中国南瓜为试验材料,其近下胚轴的1/2子叶为外植体,探究其离体培养过程中植物激素、硝酸银浓度及配比对其不定芽诱导过程的影响,以建立中国南瓜植株高效再生体系;以此体系为基础,探究农杆菌介导的中国南瓜遗传转化,并以拟南芥CYCD3;1为目的基因构建GFP融合过表达载体,探究预培养时间、侵染时间、共培养时间对中国南瓜遗传转化过程中抗性芽产生的影响。试验的主要研究结果如下:(1)不同植物激素浓度及配比对中国南瓜不定芽诱导过程有显著影响。在中国南瓜的离体培养过程中,以其子叶为外植体,进行了35组不同激素浓度的不定芽诱导研究。试验结果表明,中国南瓜再生受培养基中激素浓度的影响,适宜浓度6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)能有效促进不定芽形成;单独使用脱落酸(ABA)诱发中国南瓜子叶发黄,但与6-BA...

【文章页数】：45 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
英文缩略表
第一章 引言
    1.1 中国南瓜离体培养及主要影响因素
        1.1.1 植物离体再生途径
        1.1.2 中国南瓜离体再生途径
        1.1.3 影响中国南瓜再生的内部因素
        1.1.4 影响中国南瓜再生的外部因素
    1.2 农杆菌介导的中国南瓜遗传转化
        1.2.1 农杆菌介导的中国南瓜遗传转化方法
        1.2.2 影响中国南瓜遗传转化的主要因素
        1.2.3 转基因植物的标记基因
    1.3 研究内容与方法
        1.3.1 主要研究内容
        1.3.2 拟解决的关键问题
        1.3.3 技术路线
第二章 中国南瓜再生体系的优化
    2.1 材料与方法
        2.1.1 试验材料
        2.1.2 试验设计
        2.1.3 统计指标
        2.1.4 数据分析和统计
    2.2 结果与分析
        2.2.1 6-BA对中国南瓜不定芽诱导的影响
        2.2.2 ABA对中国南瓜不定芽诱导的影响
        2.2.3 6-BA与 ABA组合对中国南瓜不定芽诱导的影响
        2.2.4 中国南瓜植株再生体系的优化
    2.3 讨论
    2.4 结论
第三章 农杆菌介导的中国南瓜遗传转化
    3.1 材料与方法
        3.1.1 试验材料
        3.1.2 目的基因CYCD3；1
        3.1.3 融合表达载体及农杆菌菌株
        3.1.4 试验设计
        3.1.5 统计指标
        3.1.6 数据分析和统计
    3.2 结果与分析
        3.2.1 酶切琼脂糖凝胶电泳检测结果分析
        3.2.2 目的基因CYCD3；1 的检测结果分析
        3.2.3 预培养时间对中国南瓜遗传转化的影响
        3.2.4 侵染时间对中国南瓜遗传转化的影响
        3.2.5 共培养时间对中国南瓜遗传转化的影响
        3.2.6 中国南瓜遗传转化体系的初步建立
    3.3 讨论
    3.4 结论
第四章 全文结论
参考文献
附录
致谢
作者简历



本文编号：3826191