低夜温下黄瓜雌性分化相关代谢与蛋白质变化的初步分析

发布时间：2023-06-01 02:19

　　黄瓜(Cucumis sativus L.)是葫芦科一年生草本植物,也是性别表达研究的模式植物。由于其性别表现直接与产量和品质有关,所以研究黄瓜的性别分化不论在理论上还是实际应用上都具有重要意义。黄瓜的性别表达除受遗传因素的控制外,也受环境因素和激素的影响。课题组先期研究结果表明,黄瓜‘C09-123’为温敏型雌性材料,其性别分化受夜间温度影响较为明显,12oC的低温条件有利于‘C09-123’雌花形成。为探究低夜温影响雌雄同株异花黄瓜雌性分化的原因。本研究继续选用‘C09-123’为试材,设置3个不同夜间处理温度26/18oC,26/12oC,26/24oC,对其代谢和蛋白差异进行分析,以期初步探明低夜温诱导黄瓜雌性分化的作用机制,为黄瓜分子育种奠定基础。结果表明:(1)黄瓜温敏型‘C09-123’在低夜温12oC处理中雌花分化率显著提高,黄瓜第一雌花节位也显著降低(P<0.05),而高夜温24oC处理下在20节内无雌花分化。(2)通过对不同温度处理二叶一心茎尖内源激素和内源糖的测定分析结果表明:内源乙烯、葡萄糖和蔗糖含量均表现出随处理夜温的升高而降低的趋势。相关性分析进一步表...

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【学位级别】：硕士

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摘要
英文摘要
1 前言
    1.1 研究的目的与意义
    1.2 国内外研究进展
        1.2.1 黄瓜性别决定的遗传基础
        1.2.2 黄瓜性别分化的生理生化基础及环境的影响
        1.2.3 黄瓜性别决定的转录组学研究
        1.2.4 蛋白质组学研究进展
    1.3 存在的问题与展望
    1.4 研究内容
        1.4.1 主要研究内容
        1.4.2 技术路线
2 材料与方法
    2.1 试验材料
    2.2 黄瓜培育及温度处理条件
    2.3 黄瓜样品制备
    2.4 代谢相关指标的测定
        2.4.1 糖类物质的测定
        2.4.2 植物激素和氨基酸的测定
        2.4.3 相关酶的测定
    2.5 蛋白质组差异分析
        2.5.1 蛋白质样品的提取
        2.5.2 蛋白质浓度的测定
        2.5.3 2-DE双向凝胶电泳
        2.5.4 凝胶染色
        2.5.5 凝胶扫描与图像分析
        2.5.6 质谱分析
    2.6 蛋白差异点转录水平验证
        2.6.1 RNA的提取
        2.6.2 cDNA第一链的合成
        2.6.3 荧光定量PCR
    2.7 数据分析软件
3 结果与分析
    3.1 不同夜温下黄瓜‘C09-123’性别分化相关代谢指标分析
        3.1.1 不同夜温对黄瓜雌性分化的影响
        3.1.2 不同夜温处理下黄瓜茎尖中内源激素和内源糖含量的变化
        3.1.3 不同夜温黄瓜内源激素、内源糖与雌花分化的相关性
        3.1.4 不同夜温处理下黄瓜茎尖中氨基酸含量的变化
        3.1.5 不同夜温处理下黄瓜茎尖糖酵解关键酶的变化
    3.2 蛋白质组差异分析
        3.2.1 蛋白质浓度标准曲线
        3.2.2 不同夜温黄瓜差异蛋白双向电泳分析
        3.2.3 质谱结果分析
        3.2.4 转录水平分析验证
4 讨论
    4.1 不同夜温对黄瓜雌性分化的影响
    4.2 不同夜温下生理代谢指标的变化与黄瓜雌性分化的关系
        4.2.1 植物激素
        4.2.2 内源糖
        4.2.3 氨基酸
    4.3 不同夜温下差异蛋白质与黄瓜雌性分化的关系
        4.3.1 甘油醛3磷酸脱氢酶
        4.3.2 天冬氨酸转氨酶
        4.3.3 光合体系I亚组VII酶
        4.3.4 未知蛋白
        4.3.5 其他差异蛋白质
    4.4 生理代谢与蛋白质组结合的分析
    4.5 研究的创新点及不足
5 结论
致谢
参考文献
附录
攻读硕士学位期间发表的学术论文



本文编号：3826457