葡萄风信子花色合成途径中关键基因及启动子克隆与分析

发布时间：2023-10-16 20:01

　　葡萄风信子是风信子科葡萄风信子属春季球根花卉,以明亮的蓝色著称,具有很重要的美观、生态与科研价值,是研究单子叶植物着色机理的理想模式植物。本研究以蓝色花的葡萄风信子亚美尼亚(Muscari‘Armeniacum’)和白色花的葡萄风信子白丽人(Muscari‘White beauty’)为研究材料,结合转录组测序结果及本团队已发表论文,成功克隆到葡萄风信子两个品种中查尔酮合成酶(CHS)、查尔酮异构酶(CHI)、黄烷酮一经化酶(F3H)、类黄酮3’5’-羟化酶(F3’5’H)、二氢黄酮醇还原酶(DFR)、花青素合成酶(ANS/LDOX)、黄酮醇合酶(FLS)七种蛋白的基因序列及启动子序列,对各基因及启动子序列进行蓝白品种中的对比分析,确定差异显著性基因。主要结果如下:1.以葡萄风信子亚美尼亚和白丽人叶片为材料,对花青素通路调控基因CHS、CHI、F3H、F3’5’H、DFR、FLS、ANS的DNA和启动子序列进行克隆,克隆到上述7个基因的保守域完整的DNA序列和启动子序列。2.对各个基因及蛋白序列在蓝白两品种中对比分析发现,CHS基因差异性最大(相似性最小),CHS的DNA相似性为88....

【文章页数】：49 页

【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
第一章 文献综述
    1.1 葡萄风信子概述
    1.2 花青素的研究进展
        1.2.1 花青素结构与种类
        1.2.2 花青素物理性质
        1.2.3 花青素生物合成途径
    1.3 花色合成途径中的关键功能基因研究进展
        1.3.1 查耳酮合酶(CHS)
        1.3.2 查尔酮异构酶(CHI)
        1.3.3 黄烷酮一羟化酶(F3H)
        1.3.4 类黄酮 3' 5'-羟化酶( F3'5'H)和类黄酮 3'-羟化酶( F3'H)
        1.3.5 二氢黄酮醇还原酶( DFR )
        1.3.6 花青素合成酶( ANS/LDOX)
        1.3.7 黄酮醇合酶(FLS)
    1.4 启动子研究进展
    1.5 花色合成途径中转录因子研究进展
    1.6 研究基础
    1.7 本研究目的意义及技术路线
第二章 材料与方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 植物材料
        2.1.2 菌株及质粒
    2.2 酶及化学试剂
    2.3 实验仪器
    2.4 引物
    2.5 方法
        2.5.1 RNA的提取及检测
        2.5.2 DNA的提取及检测
        2.5.3 First-Strand cDNA合成
        2.5.4 引物设计
        2.5.5 cDNA、DNA及启动子序列扩增程序及体系
        2.5.6 PCR扩增产物回收与连接
        2.5.7 大肠杆菌的转化
        2.5.8 菌液PCR鉴定
        2.5.9 质粒提取
        2.5.10 生物学在线分析
        2.5.11 MaANS基因的表达模式分析
第三章 结果与分析
    3.1 葡萄风信子花色合成途径中关键功能基因克隆及生物信息学分析
        3.1.1 关键功能基因克隆
        3.1.2 关键功能基因及蛋白生物信息学分析
    3.2 葡萄风信子花色合成途径中关键功能基因启动子克隆及生物信息学分析
        3.2.1 关键功能基因启动子克隆
        3.2.2 关键功能基因启动子生物信息学分析
第四章 讨论与结论
参考文献
致谢
作者简介



本文编号：3854557