‘雪梅’低温响应MYB转录因子的克

发布时间：2024-02-22 00:51

　　植物的整个生长发育过程都面临着各种各样的环境变化,为了应对不同的逆境胁迫,植物进化出一套高效的防御机制,形成了高度敏感的逆境感知体系以及高效的应答机制,而转录因子在植物对非生物胁迫的应答响应中起着重要的作用。作为植物转录因子中最大的家族之一,MYB转录因子几乎参与了植物所有的生命活动,包括初生和次生代谢、细胞周期和细胞分化及生物和非生物胁迫响应。梅花是重要的园林观赏植物,但较弱的低温抗性限制其在北方的露地栽培。本文以’雪梅’为主要试验材料,利用qRT-PCR技术检测PmMYBs转录因子家族在低温胁迫下的表达模式,克隆了 12个PmMYBs转录因子,并构建其超量表达载体。通过异源转化拟南芥,鉴定了其在非生物胁迫下的抗性。主要结果如下:1、’雪梅’ 27个R2R3-MYB基因中有17个基因在低温处理12h内迅速响应低温。5个’雪梅’1R-MYB基因中,Pm000420在低温处理初期(3h)表达明显受到抑制,其他4个基因对低温处理不敏感;比较不同品种间PmMYBs的表达发现,PmMYBs基因在3个品种间的表达模式较为一致,但抗寒性强的’小玉蝶’和’丰后’的MYB基因的表达丰度明显低于抗寒能力...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１植物低温调控网络（引自刘辉等２０１４）??Ｆｉｇ．?１?Ｄｉａｇｒａｍ?ｏｆ?ｃｏｌｄ－ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅ?ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌ?ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ?ｎｅｔｗｏｒｋ?ｉｎ?ｐｌａｎｔ??

而受ＭＹＢ１５、ＭＹＢＳ３、ＺＡＴ１２、ＰＩＦ４／７、ＷＲＫＹ３４及ＥＩＮ３等转录因子的负调控。??除依赖ＣＢＦ的低温调控途径外，还存在一些转录因子，如ＪＥＲＦ３、ＷＲＫＹ１９／７６、??ＮＡＣ１／２及ＳＡＰ１／８等通过不依赖于ＣＢＦ的途径调控植物低温应答（图１）。?????￣￣....

图２利用ＱＲＴ－ＰＣＲ分析低温胁迫下的表达量变化??注：数据以为内参进行标准化定量，以未低温处理样本为参照，以平均值±标准误表??示（ｍｅａｎ?土?ＳＥ）（ｎ?＝?３）

个基因（Ｐｗ如５３３２、尸ｗ似３０２０、Ｐｗ犯３７Ｓ６?和??在低温处理的６小时内迅速响应低温胁迫，并在３ｈ－１２ｈ内达到表达高峰，但??ＰｍＷ心７２出现上调表达与表达谱结果相反（图２Ａ）；?６个基因（Ｐｗ即Ｗ９９、Ｐｗ０２＊／３％、??户》２犯６３３彳、ＰｗＯ２０ｉ（Ｗ、Ｐｗ０....

图3不同梅花品种I}YH转录因子在低温胁迫下的表达

Ｆｉｇ．?３?Ｔｈｅ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｐａｔｔｅｒｎ?ｏｆ?ＰｍＭＹＢｓ?ｉｎ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｃｕｌｔｉｖａｒｓ?ｏｆ?Ｐ．?ｍｕｍｅ?ｕｎｄｅｒ?ｃｏｌｄ?ｓｔｒｅｓｓ??１８??

图５?３５Ｓ：：?质粒的酶切检测??注？？?Ｍ，?ＤＮＡ?分子量标准

为进一步分析这些乃基因的生物学功能，我们分别构建了这些基因的超??量表达载体。将测序正确的序列经双酶切连接到超量表达载体ｐＣＡＭＢＩＡ２３００ｓ上，??进行ＰＣＲ检测，抽提质粒经过双酶切验证（图５），证明各基因己经插入目的载体??中。其重组质粒分别命名为３５Ｓ：：?糾７９９、３５....

本文编号：3906145