番木瓜番茄红素环化酶基因的转录调控分析

发布时间：2024-02-24 02:10

　　番茄红素是一种类胡萝卜素,其在减缓衰老、抵抗氧化等方面起着重要的作用。番木瓜果肉中番茄红素含量和比例决定了果肉的外观品质、营养价值,最终会影响其经济效益。因此,研究番木瓜番茄红素的代谢具有重要的理论和实践意义。番茄红素环化酶是类胡萝卜素合成通路的关键酶。在番木瓜中,番茄红素环化酶其中的两种同工异构酶分别为CpCYC-B和CpLCY-B。据研究表明,CpCYC-B和CpLCY-B都是组织特异性表达基因,其中CpCYC-B是有色体特异性表达基因,主要在果肉中表达,因此它能影响果肉中类胡萝卜素的含量和组分比例并造成果肉的颜色差异;而CpLCY-B主要在番木瓜的叶片和果皮中高表达。本研究以CpCYC-B和CpLCY-B为研究对象,克隆和鉴定启动子序列、分析关键顺式元件,并对不同区段启动子活性进行分析。通过对不同发育阶段的番木瓜果肉进行转录组分析,筛选与CpCYC-B和CpLCY-B启动子互作的转录因子,并通过酵母单杂交、酵母双杂交和双荧光素酶系统验证候选转录因子对番茄红素环化酶基因的转录调控功能。主要研究结果如下:1.CpCYC-B和CpLCY-B启动子的克隆和活性分析。从番木瓜中克隆了CpC...

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图1-1木瓜果实中的类胡萝卜素生物合成途径采用RachelL（2006）和Nisar等人（2015）

4木瓜果实中的类胡萝卜素生物合成途径采用RachelL（2006）和Nisar等人（2015八氢番茄红素合成酶；PDS，八氢番茄红素去饱和酶；CRTISO，胡萝卜素异构，叶绿体特异性番茄红素β-环化酶；LCY-E，番茄红素ε-环化酶；CYC-B，有异性番茄红素β-环化酶....

图2-1启动子缺失载体构建示意图

番木瓜番茄红素环化酶基因的转录调控分析段同源重组到PGWB633载体中。启动子表达载体示意图见图2-1。CpCYC-B和CpLCY-B启动子内部缺失载体构建：采用全基因合成的方法，合成已经将目的元件缺失的双链启动子DNA，并同样用gateway方法连接到PGWB....

图2-2CpCYC-B启动子顺式元件分布图

图2-2CpCYC-B启动子顺式元件分布图Figure2-2ThoseelementsweredistributedinCpCYC-B-1.5kbpromoter2.2CpCYC-B和CpLCY-B启动子活性分析当含不同启动子载体的转基因拟南芥植株生....

图2-3转基因拟南芥T1代植株系的CpCYC-B和CpLCY-B启动子1.5kb-0.5kb的表达分析

图2-3转基因拟南芥T1代植株系的CpCYC-B和CpLCY-B启动子1.5kb-0.5kb的表达分析（A）CpCYC-B的不同片段启动子驱使的的GUSRT-qPCR表达水平。（B）CpLCY-B的不同片段启动子驱使的GUSRT-qPCR表达水....

本文编号：3908351