白菜裂叶基因BrcLL1的克隆与功能初步分析

发布时间：2024-03-22 02:24

　　白菜(Brassica rapa ssp.chinensis)原产中国,是一种重要的叶菜类蔬菜。叶形多样性在很大程度上是由叶缘形状变化形成的,其中叶片裂刻性状是一种很重要的经济或者标记性状,研究其基因调控机制对丰富叶形育种和改良商品性都具有一定的应用及理论意义。在课题组前期研究基础上,本实验对控制该性状的基因进行了精细的区间定位,筛选出控制裂叶的候选基因,命名为BrcLL1(B.rapa.ssp.chinensis lobed-leaf 1),对其进行了克隆和时空表达分析,并通过转基因对其进行了初步功能验证。主要获得了以下研究结果:1.候选基因BrcLL1分析尽管前期研究将BrcLL1基因定位在Bra9511和Bra9512标记之间,但在该区间内没有预测到编码基因。本研究利用F2大群体中的隐形个体,对近邻2个标记3KBra9510和Bra9510-4H重新验证,结果发现候选基因与这2个标记共分离,标记3KBra9510和Bra9510-4H分别来源于其中一个编码基因Bra009510的启动子和基因内部,进一步转录组测序结果表明,该基因在裂叶中的表达明显下调,因此Bra009510可能为...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图2-1多态性标记的群体分析

p3.0软件计算标记和裂叶基因之间的遗传距离并作图。析子标记的鉴定中，本实验室将候选基因定位于标记Bra9511和Bra951测到编码基因。在此基础上，本研究扩大分离群体中的个377株隐形个体，检测已开发的分子标记（3KBra9510和2-1），3KBra9510....

图2-2分离群体中BrcLL1基因的遗传图谱和物理图谱

其缩小到标记Bra009511和Bra009512之间，物理距离5.7kb，但是该区间并没有注基因（富春元2014）。本研究通过重新定位，标记3KBr9510和Bra9510-4H对群体的隐性纯合单株基因型鉴定结果与表型结果完全吻合，说明已成功图位克隆到候选....

图3-1BrcLL1基因gDNA扩增结果

组数据与大白菜基因组数据库中同源基因Bra009510信息，叶和裂叶材料BrcLL1基因（图3-1），结果显示从3个裂叶1800bp和1600bp的扩增条带，3个圆叶材料仅能扩增出的片段。该条带回收后，与pGEM-TEasyVector载体连接....

图-M：DNA5000markerladder；1-2、3-4、5-6、7-8、9-10、11-12分别为引物在14xs33H、14xs31H、1-20H、14xs39B、14xs32B、1-2B模板上BcLL1基因的gDNA扩增结果

组数据与大白菜基因组数据库中同源基因Bra009510信息，叶和裂叶材料BrcLL1基因（图3-1），结果显示从3个裂叶1800bp和1600bp的扩增条带，3个圆叶材料仅能扩增出的片段。该条带回收后，与pGEM-TEasyVector载体连接....

本文编号：3934490