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胡萝卜CONSTANS-like基因的克隆及功能研究

发布时间:2024-05-09 03:17
  栽培胡萝卜(Daucus carota L.)是具有重要营养价值和经济价值的两年生蔬菜作物。胡萝卜虽是绿体春化型,但长日照可促进其提早开花。CONSTANS(CO)是光周期调控开花途径的关键因子。CO蛋白的累积能激活下游开花整合因子FLOWERING LOCUS T(FT)和SUPPRESSOR OF OVEREXPRESSION OF CONSTANS 1(SOC1)的表达,从而促进开花。基于前期转录组和基因组分析,在胡萝卜中共获得了24个与拟南芥光周期途径同源的基因,包括DcGI、DcCOLs、DcFTL等。本研究以先期抽薹敏感的松滋野生(Ws)和耐抽薹的橘色栽培种Amsterdam(Af)为试验材料,对DcCOLs及其上下游相关基因DcGI、DcFTL和DcSOC1s的功能进行了分析。1.克隆获得DcGI、DcCOL2、DcCOL4、DcCOL5a、DcCOL5b、DcCOL13、DcCOL15、DcFTL、DcSOC1-1和DcSOC1-2共10个基因,其开放阅读框(ORF)分别为3498bp、1182bp、1170bp、1041bp、1101bp、1146bp、1182bp、...

【文章页数】:63 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

图2.1胡萝卜DcGI、DcCOLs、DcFTL和DcSOC1s基因的RT-PCRFig.2.1RT-PCRamplificationofDcGI,DcCOLs,DcFTLandDcSOC1sincarrot

图2.1胡萝卜DcGI、DcCOLs、DcFTL和DcSOC1s基因的RT-PCRFig.2.1RT-PCRamplificationofDcGI,DcCOLs,DcFTLandDcSOC1sincarrot

与分析GI、DcCOLs、DcFTL和DcSOC1s基因的克隆与分析萝卜转录组和基因组测序获得的目标基因cDNA或DNA序列,设计正反向引物整ORF区序列。以cDNA为模板进行PCR扩增,1%琼脂糖凝胶电泳检测扩增产小与预期基本一致(图2.1)。最后,....


图3.2DcGI、DcCOLs、DcFTL、DcSOC1s与DcFLCs的昼夜节律分析

图3.2DcGI、DcCOLs、DcFTL、DcSOC1s与DcFLCs的昼夜节律分析

25图3.2DcGI、DcCOLs、DcFTL、DcSOC1s与DcFLCs的昼夜节律分析Fig.3.2ThecircadianrhythmofDcGI,DcCOLs,DcFTL,DcSOC1sandDcFLCsSD:表示8h光照/16h....


图3.4Ws和Af在春、秋季的先期抽薹率

图3.4Ws和Af在春、秋季的先期抽薹率

2014年春季,5月28日短日照处理结束后,在自然光照长度(约15h光照)下,Ws的先期抽薹率迅速增加,6月20日(自然光长处理23d)时,抽薹率高达80.33%。随后抽薹率变化缓慢,到7月29日,达最高抽薹率93.44%(图3.4)。秋季....


图4.2过表达载体的PCR扩增及双酶切Fig.4.2PCRidentificationofrecombinedover-expressionvector

图4.2过表达载体的PCR扩增及双酶切Fig.4.2PCRidentificationofrecombinedover-expressionvector

图4.1DcCOL2-Ws、DcCOL5a-Ws、DcCOL5a-Af及植物过表达载体PBI121双酶切DoubledigestionofDcCOL2-Ws,DcCOL5a-Ws,DcCOL5a-Afandplantover-expressionvec....



本文编号:3968238

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