灵芝孢子粉饮片的生产工艺与质量控制研究

发布时间：2020-05-25 14:28

【摘要】：灵芝孢子粉为多孔菌科真菌赤芝或紫芝的干燥成熟孢子,富含大量活性物质。作为灵芝的主要活性成分—灵芝多糖,既可降低血糖、血脂,又能抗氧化,增加免疫力。破壁的灵芝孢子粉比实体易被机体吸收利用,相比较其药用价值可高达几十倍。故灵芝孢子粉的生产工艺,质量控制,用法用量就成为了研究的重点。综合多方面原因,本文对灵芝孢子粉饮片的生产工艺、质量控制、用法用量进行了研究,并拟定灵芝孢子粉的质量控制标准草案。主要研究内容如下文所示:1、灵芝孢子粉饮片的生产工艺研究采用滚轴振动磨对原材料进行粉碎,以超微粉破壁率、浸出物和多糖含量吸光度的结果考察超微粉碎过程中的影响因素,结果表明最优条件为:药材55℃下干燥2小时后粉碎90分钟。2、灵芝孢子粉饮片的质量控制研究(1)按照浙江省中药饮片炮制规范2015年版的相关方法对灵芝孢子粉饮片的性状、鉴别(显微鉴别、薄层鉴别)、检查(杂质、水分、总灰分、破壁率、过氧化值)、浸出物进行测定。测定结果显示,灵芝孢子粉饮片为黄褐色至紫褐色的粉末。气微,味淡;显微鉴别孢子多数均呈破碎状,褐色。薄层鉴别中供试品色谱的斑点与对照品色谱的斑点位置相同,且颜色也相同,空白无干扰;杂质检查没有检查出有菌丝、淀粉粒等异物的存在。水分≤9.0%,总灰分≤3.0%,破壁率≥95.0%,过氧化值≤0.20,浸出物为≥5.0%。(2)采用高效液相法对灵芝孢子粉饮片的甘油三油酸酯特征图谱进行测定分析。选定的色谱条件为:Agilent 1100高效液相系统,色谱柱为Welch月旭UltimateXB-C18(4.6?250mm,5μm),乙腈-异丙醇(51∶49)作为流动相,采用1.0 ml/min的流速,1.7ml/min的载气流速。检测结果显示,其特征图谱有十个Mark峰,保留时间在13-38min之间有一段指纹区,甘油三油酸酯保留时间在27.5min,相似度≥0.99。对上述方法进行方法学验证,结果显示,耐用性、精密度等良好。(3)灵芝孢子粉饮片中的油脂利用乙醚提取的方法测定含油率,结果十批样品的含油率为27.5%、27.3%、27.1%、28.0%、27.9%、28.2%、30.8%、31.0%、30.6%、30.6%;多糖含量测定采用UV法,结果表明,该方法的专属性、精密度、稳定性(2小时内稳定)、重复性良好,线性关系为A=0.00844X+0.0179,r=0.99919(n=5),回收率平均为110.1%。由该法测定的十批样品的含量分别为1.01%、0.98%、0.99%、0.97%、1.00%、0.99%、1.24%、1.25%、1.23%、1.23%。3、灵芝孢子粉饮片的用法用量研究通过紫外分光光度法测定样品中多糖溶出量,可得到其用法用量。结果显示,灵芝孢子粉饮片在pH4.5磷酸盐缓冲液介质中的多糖溶出量明显高于pH1.2盐酸溶液和pH6.8磷酸盐缓冲液,结论为餐后服用效果较好。开水冲服灵芝孢子粉饮片和传统水煎煮灵芝孢子粉两种制剂方式,其多糖溶出量测定比值为3:1,参照“浙江省中药饮片炮制规范2015版”灵芝孢子粉的用量,确定该饮片的用量为2~4g。药品用量关系到其有效性、安全性,但调查发现药品标准及规范中的破壁灵芝孢子粉用量不统一。本课题就规范用法用量这一目标,经过研究确定了最优的灵芝孢子粉饮片生产工艺,之后采用多种方法进行质量控制研究,最终制定出一套合理的质量标准草案,为以后的研究人员提供一定的研究基础。
【图文】：

破壁率,超微粉碎,药材,含水量

取以上干燥两个小时，预冷冻后的药材样品，进行超微粉碎，分别在超微粉碎 60min、90min、120min 时停止仪器运行，并取样、测定三份样品的浸出物量。此外，分别称取三份样品各 1.5g，采用含量测定法，通过紫外分光光度法测定多糖的吸光度。综合分析两种测定指标的结果，比较超微粉碎时间对粉碎工艺的影响。2.3 实验结果2.3.1 药材含水量对工艺的影响本课题研究中，采用显微计数法进行破壁率的计算。具体数据见表 2-2 及图 2-1表 2-2 药材含水量对超微粉破壁率的影响Tab.2-2 Effect of Water Content of Medicinal materials on breaking rate of ultrafine powder预处理未烘干烘干 1h 烘干 2h 烘干 3h含水量 20.7% 13.3% 8.4% 7.9%破壁率 60.5% 75.8% 95.6% 96.1%

灵芝孢子粉,饮片,显微鉴别

13图 3-1 灵芝孢子粉饮片 60 倍镜下的部分显微鉴别图Fig.3-1 Microscopic identification of some Ganoderma lucidum spore powder pieces under 60Xmicroscope从观察结果可以看出，10 批样品中孢子大多数均呈破碎状，，褐色。3.2.2 薄层鉴别3.2.2.1 试药与仪器（1）样品：灵芝孢子粉饮片[由灵芝孢子粉由北京葆年堂（菏泽）药业有限公司生产并提供]。灵芝孢子对照药材[来源：中国食品药品检定研究院，批号：121701-201401]（2）试剂：石油醚(30~60℃)[来源：天津市北辰方正试剂厂，分析纯，批号：20171026]环己烷[来源：天津市富宇精细化工有限公司，分析纯，批号：20160801]
【学位授予单位】：河南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：TQ461

【参考文献】