白虫草多糖提取及抗炎活性研究

发布时间：2020-06-01 15:44

【摘要】：白虫草(Cordyceps militaris Link)是长白山区进行蛹虫草繁育过程中在培育床边自然衍生的一种植物,具有完全的植物生长性质,是一种新型植物。它与蛹虫草的生长周期,生长环境完全一致,目前已成功进行人工驯化养殖。并且经过应用实验得知,白虫草的功效与蛹虫草极其相近,但白虫草养殖容易,成本低廉,具有极高的应用价值。白虫草的养殖和应用为长白山特产植物产业发展提供了一条新的途径。目前对白虫草研究比较少,有较高的研究价值。本文采用超声波辅助提取法对白虫草多糖进行提取。通过单因素实验,研究料液比、提取温度、提取时间和超声波功率对白虫草多糖提取率的影响。通过正交试验设计和响应面建模确定最佳的提取工艺,进而优化该工艺的提取工艺参数:提取时间为3 h,提取温度为60°C,超声波功率为1600 w,料液比为1:40;将醇沉得到的白虫草多糖先后通过DEAE-Sepharose和葡萄糖Sephadex G-100色谱柱进行分离纯化,制备白虫草多糖纯品,在水洗和0.05 M NaCl洗脱部分得到3个明显主峰,分别命名为CKI,CKII,CKIII;利用PMP-柱前衍生高效液相色谱法(HPLC)测定白虫草多糖组CKII的单糖组成,确定其中主要有6种单糖,分别为Ara(L-阿拉伯糖),Gal(D-半乳糖),Xyl(D-木糖),Man(D-甘露糖),Glc(D-葡萄糖)和Rha(L-鼠李糖)。建立小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7)和小鼠胚胎成纤维细胞(NIH3T3)体外细胞抗炎模型,对提取所得到的白虫草多糖进行抗炎活性研究。通过检测给药前后RAW264.7和NIH3T3细胞前列腺素(PGE2)和NO分泌量,判断白虫草多糖是否具有抗炎活性,同时与罗非昔布抗炎效果进行对比,其抗炎效果与给药量关系为:未给药1 mg/mL2 mg/mL5 mg/mL50 mg/mL10 mg/mL罗非昔布。最佳给药量为10 mg/mL。本研究探究了超声波辅助法提取白虫草多糖的最佳提取工艺,分析了白虫草多糖的单糖组成,研究了白虫草多糖的抗炎活性,为更好地应用白虫草提供了更多的可能性,对白虫草中有效成分功效研究及其相关产品的开发提供了方向。
【图文】：

19（D） 料液比对提取率的影响取温度、超声波功率、提取时间及料液比对白虫草多糖提取、B、C、D 分别对应提取时间、提取温度、超声波率的影响。对提取率的影响：当超声功率设定为 1000 w，提液比固定为 1:10 时。由图 3.1A 可知，随提取时间增超声波会使细胞破碎，促进内溶物溶出，提取时间增而使得提取率增加，但当提取时间达到 3.5 小时后，，为水溶性内溶物已经溶出完毕。

图3.2两因素交互影响白虫草多糖提取量响应面图
【学位授予单位】：长春工业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：TQ464

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本文编号：2691704