柠檬桉树脂有效成分的提

发布时间：2020-08-04 07:58

【摘要】：柠檬桉是广西重要林业树种之一,具有很好的经济价值。本论文以柠檬桉树脂为原料,开展了柠檬桉树脂总黄酮、多酚、多糖及蛋白质的提取、纯化及抗氧化活性研究。主要研究内容和取得结果如下:(1)柠檬桉树脂中黄酮的提取纯化和抗氧化活性。首先采用盐酸-锌粉、薄层层析等方法定性鉴别了柠檬桉树脂含有总黄酮,进而以芦丁为标准品构建了紫外可见分光光度法测定黄酮的定量分析方法,黄酮浓度(C)与吸光度(A)的线性关系为:A=25.11c+0.08。采用该法测定柠檬桉树脂总黄酮粗提液(A)含量,结果表明树脂中含有4.64%总黄酮。然后分别采用氯仿-乙酸丁酯、氯仿-二甲基甲酰胺、二甲基甲酰胺-氯仿两次超声萃取后得到纯化物B、C、D,它们的总黄酮质量分数分别为10.39%、18.03%、44.15%。最后,进行了A、B、C、D抗氧化活性研究,结果表明,A、B、C、D清除2,2-二苯基-1-苦味基肼自由基(DPPH·)的活性分别为91.75%、74.22%、88.44%、91.56%，总抗氧化能力分别为19.99、1.75、4.39、3.79 μmol 芦丁当量(RE).g-1,还原能力分别为1.16、0.36、0.39、0.45 μmol RE·g-1。(2)柠檬桉树脂中多酚的提取纯化和抗氧化活性。采用明胶溶液、三氯化铁溶液等定性鉴别方法检验柠檬桉树脂中含有多酚且属于水解类多酚。以没食子酸为标准品,用紫外分光光度法建立了多酚定量分析方法,给出了浓度(C)与吸光度(A)线性方程为:A=145.30c+0.16。用该法测定得到树脂中多酚含量为13.40%。用乙酸乙酯、醇提水沉-正丁醇萃取纯化得到质量分数分别为28.01%和39.60%纯化物。柠檬桉树脂多酚粗提液、乙酸乙酯纯化物、醇提水沉-正丁醇纯化物和维生素(Vc)进行了抗氧化活性实验,结果表明,它们清除DPPH·自由基活性分别为89.68%、86.45%、89.11%、91.12%,总抗氧化活性分别为13.44、12.68、15.46、14.89μmol.没食子酸当量(GE)·g-1,还原能力活性分别为0.99、0.78、1.04、1.20 μmol.GE·g-1。(3)柠檬桉树脂中多糖的提取纯化及其抗氧化活性研究。采用3%α-萘酚乙醇溶液、斐林试剂定性鉴别了柠檬桉树脂中含有多糖,以葡萄糖为标准品,建立了3，5-二硝基水杨酸吸光光度法测定总糖定量分析方法,给出总糖浓度(C)与吸光度(A)线性关系为:A=4.38c-0.47。用该法测得柠檬桉树脂的总糖含量为18.21%。用苯酚-硫酸吸光光度法建立了多糖的定量分析方法,多糖浓度(C)与吸光度(A)线性关系为:A=12.34c+0.05。该法测得柠檬桉中多糖含量为16.78%。采用Sevage法、三氯乙酸法等多种手段进行柠檬桉多糖的纯化,分别获得质量分数为22.14%、38.56%、51.66%纯化多糖,并进行了它们抗氧化活性研究,结果表明不同质量分数多糖的抗氧化活性顺序为:80%纯化多糖60%纯化多糖30%纯化多糖,即质量分数增高,抗氧化活性增大。(4)柠檬桉树脂中蛋白质的提取纯化及其抗氧化活性研究。以牛血清蛋白为标准品,采用紫外分光光度法建立了柠檬桉树脂蛋白质定量分析方法,给出蛋白质浓度(C)与吸光度(A)线性关系为:A=5.70c+0.02。此法测得柠檬桉树脂蛋白质含量为7.47%。并考察了树脂蛋白质粗提液的抗氧化活性,结果表明蛋白质粗提液的抗氧化能力随浓度的增加,有所增强。
【学位授予单位】：广西大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：TQ28
【图文】：

柠檬桉,树脂,工艺路线,抗氧化活性

１．９．１研究方案逡逑本文以柠檬桉树脂为原料，开展其有效成分的提取、纯化及抗氧化活性研究。研究逡逑方案如图１－１所示。逡逑柠檬桉树脂逡逑提取、纯化逡逑１逦１逦￣￣逦Ｉ逦１逡逑逦邋邋邋邋Ｉ逦邋邋Ｉ逦邋邋Ｉ逦逡逑总黄酮逦多酚逦多糖逦蛋u6质逡逑逦Ｉ逦Ｊ逦±逦１逦逡逑逦抗氧化活性研宄逦逡逑图１－１柠檬桉树脂研究的工艺路线逡逑Ｆｉｇ．邋１－１邋Ｔｈｅ邋ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｃａｌ邋ｒｏｕｔｅ邋ｏｆ邋ｅｕｃａｌｙｐｔｕｓ邋ｃｉｔｒｉｏｄｏｒａ邋ｒｅｓｉｎ邋ｒｅｓｅａｒｃｈ逡逑１．９．２研究内容逡逑针对上述研宄方案，主要研宄内容如下：逡逑（１）

总黄酮,原料预处理,工艺路线,柠檬桉

２．２实验方法逡逑２．２．１研究的工艺路线逡逑本章按图２－１所示的工艺路线图对柠檬桉树脂总黄酮进行提取、纯化，并对柠檬桉逡逑树脂总黄酮粗提物及各纯化物的抗氧化活性进行研宄。逡逑柠檬桉树脂逡逑１逦逡逑预处理逡逑逦Ｘ逦逡逑总黄酮提取逡逑Ｔ逡逑逦ｉ逦逡逑定性分析逡逑定置分析逡逑１逡逑分离纯化逡逑１逦■逦￣￣—Ｉ逡逑纯化物Ｂ邋｜逦｜纯化物Ｃ邋｜逦｜纯化物Ｄ逡逑＂Ｉ逦１逡逑逦抗氧化活性逦逡逑图２－１总黄酮研究的工艺路线逡逑Ｆｉｇ．２－１邋Ｔｈｅ邋ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｃａｌ邋ｒｏｕｔｅ邋ｏｆ邋ｔｏｔａｌ邋ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ邋ｒｅｓｅａｒｃｈ逡逑２．２．２实验原料预处理逡逑将采得的固体柠檬桉树脂除去树皮、树叶等大块杂质，用研钵捣碎gq粉末状，待用逡逑［９８］逡逑Ｏ逡逑１５逡逑

芦丁,薄层层析,标准品,总黄酮

Ｆｉｇ．２－２邋Ｔｈｅ邋ｒｅｓｕｌｔ邋ｏｆ邋ｔｈｉｎ邋ｌａｙｅｒ邋ｏｆ邋ｃｒｕｄｅ，邋ｒｕｔｉｎ逡逑ａ－柠檬桉树脂粗提液；ｂ－芦丁标准品逡逑由表２－４、图２－２可知：以氯仿：乙酸乙酯：冰醋酸＝６：邋４：邋０．５为最佳展开剂在薄层板上逡逑展开，２５４ｎｍ紫外灯下观察，粗提液薄层板ａ出现８个斑点，念珠状拖尾分离较好，比逡逑移值在０．２￣０．８之间，符合薄层层析要求。其中两个斑点与芦丁标准品ｂ位置相近。证逡逑明柠檬桉树脂中有总黄酮的存在。逡逑２．３．２总黄酮定量分析方法的构建逡逑２．３．２．１总黄酮标准曲线绘制逡逑将一系列芦丁标准溶液，经三氯化铝－乙酸钠显色后，测定各浓度对应对的吸光度逡逑

【参考文献】