迷迭香黄酮的成分分析、抗氧化性研究及其在腌肉制品中的应用

发布时间：2020-09-22 18:36

　　迷迭香(Rosmarinus officinalis L.)是唇形科迷迭香属植物,原产于环地中海沿岸地区,近年在我国云南、贵州、海南等地已被大面积引种栽培,多年来一直被用作香料,用于佐餐及腌制、熏制食品的调味,其成分主要包括黄酮类、萜类和精油等。然而,现有的报道大多是针对迷迭香中个别活性成分如迷迭香酸等单独进行研究,本文希望对迷迭香黄酮的成分及抗氧化活性等方面进行系统的研究,进而指导其作为天然抗氧化剂在食品中的应用。本课题的研究包括五个部分:(1)通过单因素试验(包括乙醇体积分数、液料比、微波温度、微波起始功率和提取时间五个因素)和响应面法优化微波辅助提取迷迭香中黄酮类物质的最佳工艺条件。结果表明,微波辅助法提取迷迭香黄酮的最佳条件是:乙醇体积分数45%,液料比40:1(mL:g),微波温度77℃,微波起始功率500 W,提取时间7 min,在此条件下,迷迭香黄酮提取率为7.88%。(2)采用D101大孔树脂纯化迷迭香黄酮,纯化条件为:上样液浓度1.0 mg/mL、上样液pH=4、流速2 BV/h、解析液乙醇体积分数50%。采用高效液相色谱法分析纯化效果,在以上纯化条件下,迷迭香黄酮纯度由30%增加到70%,为纯化前的2.3倍。(3)采用高效液相色谱-质谱/质谱联用技术(HPLC-MS/MS)对迷迭香黄酮成分进行定性及定量分析。通过与标准品对比相对分子质量、保留时间以及二级质谱碎片等信息,鉴定出没食子儿茶素、栀子苷、二氢丁香苷、木犀草苷、木犀草素-7-O-?-D葡萄糖醛酸苷、橙皮苷、槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸苷、迷迭香酸、芹菜素7-O葡萄糖苷、木犀草素-5-O-葡萄糖醛酸苷、木犀草素-3’-O-葡萄糖醛酸苷以及迷迭香酚12种成分。(4)采用两种结合化学法的离线HPLC法,评价了迷迭香黄酮中各成分清除DPPH自由基和OH自由基的能力,结果表明,迷迭香酸对于DPPH自由基和OH自由基均具有最强的清除能力,清除率分别高达86.5%和83.9%,而其余成分对于两种自由基的清除能力有所不同。同时,利用细胞模型法初步评价了迷迭香黄酮的细胞内抗氧化活性,结果显示,浓度在1~100μg/mL范围内,迷迭香黄酮对人宫颈癌细胞(Hela)的存活率几乎无影响,且其清除活性氧(ROS)的能力大于迷迭香酚、小于迷迭香酸;但当浓度达到1000μg/mL时,迷迭香黄酮可杀死一定量的Hela,细胞存活率仅为62.3%。(5)制备了迷迭香黄酮(RF)的β-环糊精钾金属有机骨架材料(K-CD-MOF)包结物(RF-K-CD-MOF),RF-K-CD-MOF中黄酮的包结率为87.9%,结果表明RF-K-CD-MOF的热稳定性及耐酸碱性明显优于RF。此外,将RF及RF-K-CD-MOF添加到五花肉上,研究加工过程中脂质氧化规律,结果表明,与不添加黄酮的对照组相比,添加RF及RF-K-CD-MOF各组均具有较低的过氧化值(POV)和丙二醛(MDA)含量,且添加RF-K-CD-MOF各组表现出更好的抑制脂质氧化效果。
【学位单位】：天津商业大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：TS251.6;TS264.3
【部分图文】：

交互作用,响应值,响应曲面,等高线

响应值的影响。根据所得回归方程，以273 nm处的吸光度值Y作为响应值，分别将乙醇体积分数、液料比、微波温度定为0水平，绘制出三维响应曲面图及相应等高线，如图2-3。

高效液相色谱,迷迭香,总黄酮,大孔树脂

第三章迷迭香黄酮的纯化101 大孔树脂对迷迭香黄酮纯化效果分析方法3.3.1.2对迷迭香总黄酮进行纯化，由公式(3-1)得其纯化后纯度。并按照方法3.3.1.3对其纯化效果进行检测，图3-1为经D101大孔树总黄酮样品液在273 nm下的高效液相色谱图。从图3-1中可以看出D101大孔树脂纯化后的响应值比同浓度下纯化前的有明显增大，纯均明显增大2.3倍左右，与纯度计算结果相吻合，由此可知，D101黄酮类化合物能起到很好的纯化作用。这将为后续的成分分析、抗定基础。果与讨论

包结,迷迭香,包结物,黄酮

图 6-1 K-CD-MOF 材料的显微镜照片（×40）Fig.6-1 Microscope image of K-CD-MOF（×40）F-K-CD-MOF 的包结率方法6.3.1.2和6.3.1.3进行实验，计算得到不同芯壁比包结物的包结所示。由图6-2可知，随着壁材（K-CD-MOF）的增加，迷迭香黄酮大；当芯壁比达到1:10时，包结率达到87.9%，而当芯壁比达到1:12度变缓。因此，采用迷迭香黄酮与K-CD-MOF材料制备包结物的最0。

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