植物油中脂肪酸检测新方法的研究

发布时间：2020-10-16 21:40

　　 我们日常生活中植物油种类繁多,如菜籽油、豆油和花生油等,但各种植物油的脂肪酸组成和含量并不相同,为了均衡营养、合理摄入植物油中的脂肪酸,开发出更加简便、灵敏的脂肪酸检测技术是非常必要的。目前检测植物油中脂肪酸的方法主要有气相色谱法和气质联用法,而这些方法在分析之前都需要将沸点较高的三酰甘油酯衍生为沸点较低的甲酯化合物,在这个过程中都会产生比较多的副产物,存在反应不完全的问题;另外,油脂中脂肪酸的定量分析大多采用峰面积归一法,只能得到相对含量。针对传统方法出现的问题,本研究以植物油为分析对象,通过一系列的条件优化、方法学考察及其验证实验建立了高效液相色谱-蒸发光散射检测法(HPLC-ELSD法)、高效液相色谱-荧光检测法(HPLC-FLD法)以及高效液相色谱-激光诱导荧光检测法(HPLC-LIFD法),更加简便、灵敏的检测脂肪酸。实验结果如下:第一部分利用高效液相色谱与蒸发光散射检测器联用,通过色谱条件的优化,对9种脂肪酸实现了良好的分离。并且在该方法中脂肪酸的线性关系较好;稳定性和精密度的相对标准偏差都在3%之内;芥酸最低检测限达到10~(-6) mol/L,其余脂肪酸的最低检测限达到10~(-5) mol/L;平均回收率都在90%-110%之内。本方法中样品无需衍生,前处理过程简便,可以得到植物油中脂肪酸的绝对含量,但只能检测到C14-C22脂肪酸。第二部分合成了荧光标记试剂,1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(EDC)作为缩合剂,4-二甲基吡啶(DMAP)作为催化剂,在35℃C下40 min内完成脂肪酸的荧光标记衍生。在荧光检测器激发波长440 mn,发射波长520 nm时,通过色谱条件的优化在50 min内对19种脂肪酸实现了良好的分离。并且该方法中19种脂肪酸都有较好的线性关系;稳定性和精密度的相对标准偏差都在4%之内;最低检测限都达到10~(-8) mol/L;平均回收率都在90%-110%之内。该方法衍生过程简单,能够检测C_3-C_(22)的脂肪酸,并且比高效液相色谱-蒸发光散射检测法具有更高的灵敏度。第三部分利用高效液相色谱与激光诱导荧光检测器联用,通过色谱条件的优化,在毛细管柱管径为530 μm,流速0.2 mL/min时,对19种脂肪酸实现了良好的分离。该方法中19种脂肪酸都有较好的线性关系;稳定性和精密度的相对标准偏差都在3%之内;11种脂肪酸的最低检测限达到10~(-9) mol/L,其余8种脂肪酸的最低检测限达到10~(-8)mol/L;平均回收率都在90%-110%之内。该方法操作简便,并且比高效液相色谱-荧光检测法具有更高的灵敏度。
【学位单位】：中南林业科技大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：TS227
【部分图文】：

ｏｆ?ｅｖａｐｏｒａｔｉｖｅ?ｌｉｇｈｔ?ｓｃａｔｔｅｒｉｎｇ?ｄｅｔｅｃｔｏｒ?ｉｓ?７５°Ｃ；ｔｈｅ?ｏｉｌ－ｆｒｅｅ?ａｉｒ?ｐｕｍｐ?ｈａｓ?ａ?ｃａｒｒｉｅｒ?ｇａｓ?ｆｌｏｗ?ｒａｔｅ?ｏｆ??２．０?Ｌ／ｍｉｎ；?ｔｈｅ?ｇａｉｎ?ｉｓ?４．??由上图２．１可知，随着流动相ｐＨ的增加，脂肪酸的分离效果越来越好，尤??其对于１和２脂肪酸。所以将流动相ｐＨ＝４．５２时作为最优的色谱分离条件。??２．４．２各脂肪酸的定性分析??采用优化好的色谱条件对混合脂肪酸标准样品及各脂肪酸标准样品进行进??样测定。所得色谱分离图如图２．２所示。??１３??

２．４．３方法学考察??２．４．３．１线性关系考察??各脂肪酸标准品的标准曲线如下图２．３所示。各脂肪酸的线性关系、相关系??数和线性范围总结如下表２．４所示：??１４??

２．４．４样品中脂肪酸的分析??将制备的茶油和菜籽油样品用优化好的色谱条件依次进行进样测定。茶油??和菜籽油的色谱图如图２．４所示。茶油和菜籽油的脂肪酸含量如表２．９所示。??２．４ｘ１０５－｜??Ａ??１．６ｘ１０ｓ－??＞??Ｈ??￡?８．０ｘ１０４－??ｃ??〇？〇?＿??／■—??Ａ?＊？???????????—????０?２０?４０?６０??Ｔｉｍｅ?／?ｍｉｎ??２．４ｘ１０ｓ－ｉ??Ｂ??１．６ｘ１０５－??＞??ｉ?，??ＣＯ?？：??Ｉ?８．０ｘ１０、??１?Ｉ?３?５?＿??０．０－?ＬＵｏ?ｌ?＊?」???ｉ????０?２０?４０?６０??Ｔｉｍｅ?／?ｍｉｎ??图２．４样品的液相色谱图??Ｆｉｇ．２．４?Ｔｈｅ?ｌｉｑｕｉｄ?ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ?ｏｆ?ｏｉｌ?ｓａｍｐｌｅｓ??图中Ａ为茶油，Ｂ为菜籽油；１为亚麻酸，２为亚油酸，３为软脂酸，４为油酸，５为??硬脂酸，６为芥酸，７为山嵛酸。??Ｉｎ?ｔｈｅ?ｆｉｇｕｒｅ，?Ａ：ｔｅａ?ｏｉｌ，?Ｂ：ｒａｐｅｓｅｅｄ?ｏｉｌ；?ｌ：ｌｉｎｏｌｅｎｉｃ?ａｃｉｄ，２：ｌｉｎｏｌｅｉｃ?ａｃｉｄ，３：ｐａｌｍｉｔｉｃ?ａｃｉｄ？４：ｏｌｅｉｃ??ａｃｉｄ，５：ｓｔｅａｒｉｃ?ａｃｉｄ，６：ｅｒｕｃｉｃ?ａｃｉｄ，ａｎｄ?７：ｂｅｈｅｎｉｃ?ａｃｉｄ．．??１８??
【参考文献】

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本文编号：2843810