食用植物油微量伴随物的细胞抗氧化评价模型构建及应用研究

发布时间：2020-10-30 02:05

　　生育酚、植物甾醇、角鲨烯、多酚和谷维素等植物油微量伴随物,既是营养素又是天然抗氧化剂,直接影响油脂的功能性和氧化稳定性。现有的抗氧化能力评价手段如化学清除自由基方法,无法反映微量伴随物调节细胞氧化还原状态的能力。鉴于此,本课题构建植物油微量伴随物的细胞抗氧化(Cellular antioxidant activity,CAA)模型评价方法,并应用于评价精炼各工序稻米油和15种常见植物油的细胞抗氧化能力。主要研究内容如下:首先,采用亚甲基蓝实验确定槲皮素和油脂醇提物在肝癌细胞HepG2中最大耐受浓度,建立槲皮素浓度-CAA值、油脂醇提物浓度-CAA值的标准曲线,确认CAA模型对于评价植物油微量伴随物细胞抗氧化能力的有效性。结果表明:细胞对槲皮素和橄榄油醇提物的最大耐受浓度分别为32μM和5 mg/mL,标准曲线分别为y=22.57ln(x)-32.28(R2=0.9811,有效范围0~32μM),y=15.58ln(x)+37.61(R2=0.9891,有效范围0~5mg/m L),槲皮素和橄榄油醇提物的浓度均与模型评价出CAA值均呈现高相关性(R20.98)。其次,收集三个不同稻米油工厂各精炼工序油样,分析了精炼工序中稻米油酸值和过氧化值等理化指标及主要脂肪酸组成,生育酚、角鲨烯、甾醇、谷维素和多酚五种微量伴随物含量的变化,并采用ABTS、FRAP、ORAC和DPPH四种化学清除自由基方法和CAA法对其抗氧化能力进行评估,最后采用Pearson相关性分析研究了微量伴随物与化学法及细胞法之间的关系。结果表明,精炼过程中微量伴随物呈现不同程度的损失,同时化学清除自由基能力呈相应的降低趋势,ABTS、ORAC和DPPH法均与总酚、角鲨烯、总甾醇和谷维素含量呈极显著正相关(P0.01)。精炼各工序稻米油醇提物在0~200mg/m L范围内均未出现细胞毒性作用。各精炼工序稻米油醇提物在浓度0~200 mg/m L范围内均对细胞无毒性损伤作用,三个工厂稻米油均在脱酸工序的CAA值相对较大。相关性分析显示精炼过程中稻米油醇提物CAA值与总甾醇含量显著相关(P0.05),CAA法与四种化学法之间均不显著相关(P0.05)。最后,采集稻米油、大豆油、橄榄油、亚麻籽油、芝麻油等15种新鲜无添加抗氧化剂的植物油,分析其中生育酚、角鲨烯、甾醇和总酚四种微量伴随物,利用ORAC法和CAA法研究其抗氧化能力,采用Pearson相关性分析研究微量伴随物与抗氧化能力之间的相互关系。结果表明,15种植物油中高酚橄榄油、芝麻油和低酚橄榄油的总酚含量最高,分别为33.12±0.21、21.13±0.66和8.17±0.26 mg GAE/100 g油;高酚橄榄油、芝麻油和亚麻籽油的ORAC值最大,分别为1778±42、1587±32和1092±3μmol TE/100 g油。高酚橄榄油、低酚橄榄油、芝麻油以及亚麻籽油对HepG2细胞毒性和抗增殖作用能力最强,并且这四种植物油CAA值亦显著高于其他的11种植物油(P0.01)。相关性分析显示CAA值和ORAC值均与总酚含量呈显著相关(P0.05),CAA与ORAC两方法评价结果之间呈极显著相关(P0.01)。
【学位单位】：江南大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：TS225.1
【部分图文】：

抗氧化,基本原理,细胞,二氯荧光黄

的基本原理如图 1-5 所示[61]。使用 2',7'-二氯荧光黄双乙酸盐（氧化物质处理细胞，抗氧化物质和 DCFH-DA 可以穿过细胞膜图 1-5 细胞抗氧化（CAA）基本原理[61]5 Schematic representation of the basis of the cellular antioxidant activity (CA

氧化损伤,细胞毒性实验