花椒油树脂提

发布时间：2020-11-19 23:46

　　本文以陕西韩城大红袍花椒为原料,采用纤维素酶酶解法,结合响应面优化花椒油树脂提取工艺,测定酶解法所得花椒油树脂和超临界CO2萃取法所得花椒油树脂的理化性质,并通过气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术对两种方法所得花椒油树脂化学成分及含量并进行分析与鉴定,采用七种抗氧化体系分别对两种提取方法所得花椒油树脂抗氧化性进行研究,并以食品中常见的四种细菌为研究对象,探究两种提取方法所得花椒油树脂的抑菌性及抑菌机理。主要研究结果如下:1.纤维素酶酶解法优化花椒油树脂提取工艺结果表明:花椒油树脂采用纤维素酶酶解法提取最佳工艺条件为:50%的乙醇做提取剂、纤维素酶用量62.3mg/L、酶解时间2.3h、酶解温度50 ℃、液料比47.4:1。验证试验表明,在此工艺条件下花椒油树脂提取率可达37.22%。2.通过气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术对两种方法所得花椒油树脂化学成分及其含量进行分析与鉴定。结果表明:酶解法所得花椒油树脂中97.7%的化合物被鉴定出来,其中花椒素(10.85%)、柠檬烯二醇(5.94%)、柠檬酸月桂酯(5.38%)等含量最高;超临界CO2萃取所得的花椒油树脂共鉴定出48种化合物,占总化合物的96.3%,含量较高的成分有γ-萜品醇(9.29%)、芳樟醇(8.84%)、乙酸萜品酯(8.23%)等。3.抗氧化试验结果表明:酶解法所得花椒油树脂和超临界CO2萃取法所得花椒油树脂对DPPH自由基有较强的清除能力,当样品浓度达到0.1mg/mL时,酶解法所得花椒油树脂对DPPH自由基的清除能力和BHT相当,高于超临界CO2萃取法所得花椒油树脂。两种方法提取所得花椒油树脂样品对ABTS自由基均有一定的清除能力,但在同浓度条件下均低于Vc和BHT。对超氧阴离子自由基清除能力测定结果可知,Vc、BHT、酶解法所得花椒油树脂、超临界C02萃取法所得所得花椒油树脂对超氧阴离子自由基清除率的IC50分别为:0.045、0.056、0.098和0.126mg/mL。两种方法提取所得花椒油树脂对羟基自由基均有较强的清除能力,但同浓度条件下均低于Vc。还原力测定试验中,Vc的还原力大于BHT和两种方法所得花椒油树脂的还原力,试验样品中超临界CO2萃取法所得花椒油树脂还原力最弱。在β-胡萝卜素/亚油酸体系中,两种方法所得花椒油树脂抗氧化能力均高于Vc却略低于BHT。在抗核桃油脂氧化体系中,酶解法所得花椒油树脂和超临界CO2萃取法所得所得花椒油树脂抑制核桃油脂过氧化的能力存在浓度相关性,浓度越高,抗氧化性越强,但效果低于BHT对油脂的抗氧化能力。4.抑菌试验结果表明:两种方法所得花椒油树脂对四种供试菌均有一定程度的抑制作用,样品溶液浓度为16mg/mL时,酶解法所得花椒油树脂对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌和沙门氏菌抑菌率分别为61.46%、59.46%、55.67%、55.77%。同浓度的超临界C02萃取法所得所得花椒油树脂对四种受试菌的抑菌率分别为63.86%、60.10%、57.55%、55.99%。酶解法所得花椒油树脂对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌和沙门氏菌的最小抑菌浓度分别为0.25、0.5、0.5、1.0mg/mL。超临界C02萃取法所得花椒油树脂对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌和沙门氏菌的最小抑菌浓度分别为0.25、0.25、0.5、0.5mg/mL。通过抑菌率及最低抑菌浓度的测定可知超临界CO2萃取法所得花椒油树脂的抑菌效果优于酶解法所得花椒油树脂的抑菌效果。生长曲线研究结果表明花椒油树脂主要通过延长调整期,推迟并抑制对数生长期而阻碍受试菌的生长于繁殖。抑菌机理的探究试验证明花椒油树脂通过使菌体细胞壁和细胞膜破损或断裂增加其通透性,从而导致细胞内带电离子、蛋白质、核酸等物质泄露,进而使细胞生长和繁殖受到抑制,甚至死亡。
【学位单位】：陕西师范大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：TQ914.1
【部分图文】：

花椒油树脂,提取率,酶用量,油树脂

Ｆｉｇ．?２－１?Ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?Ｓｏｌｖｅｎｔ?ｏｎ?ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ?ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ?ｏｆ?Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ?ｏｌｅｏｒｅｓｉｎ??２．４．２．２酶用量对花椒油树脂提取率的影响??酶用量对花椒油树脂提取率影响如图２－２所示。由图２－２可以看出：当酶用??量较少时，花椒油树脂提取率较低，主要由于酶与底物接触不完全导致组织结构??未被完全破坏，有效成分溶出速率较低；随着酶用量增加花椒油树脂提取率逐渐??增加，主要由于酶与底物充分接触加快了酶解反应速率。当酶用量为６０?ｍｇ／Ｌ时，??提取率达到试验范围最大值３６．６１％；此后继续增加酶用量，可能由于酶用量己??达过饱和，底物浓度相对较低，不仅使酶得不到充分利用，造成浪费，而且还使??提取率呈稍微下滑趋势。由此可知当酶用量为６０?ｍｇ／Ｌ时提取效果较佳。??Ａ??ｍ?３５?－?／??３４?－?／??３３?？??３２?－??３１?－??３０??１?１?１?１?？?１??０?２０?４０?６０?８０?１００??酶用?Ｍ｛ｍｇ／Ｌ）??图２－２酶用量对花椒油树脂提取率的影响??Ｆｉｇ．?２－２?Ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?ｅｎｚｙｍｅ?ｄｏｓａｇｅ?ｏｎ?ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ?ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ?ｏｆ?Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ?ｏｌｅｏｒｅｓｉｎ??１２??

等高线图,响应面,酶用量,交互作用

Ｆｉｇ．２－７?Ｔｈｅ?ｒｅｓｕｌｔｓ?ｏｆ?ＲＳＭ?ｐｌｏｔ?ａｎｄ?ｉｔｓ?ｃｏｎｔｏｕｒ?ｐｌｏｔ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?ｅｎｚｙｍｅ?ｄｏｓａｇｅ?（Ｘｉ）?ａｎｄ??ｅｎｚｙｍｏｌｙｓｉｓ?ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ?（Ｘ３）?ａｎｄ?ｔｈｅ?ｍｕｔｕａｌ?ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ?ｂｅｔｗｅｅｎ?ｔｈｅｍ?ｏｎ?ｔｈｅ?ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ??ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ?ｏｆ?Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ?ｏｌｅｏｒｅｓｉｎ??龙的＾—Ｉ?提取匕＇??丨??．．?，?１??釣龙．ｗ??１?—?，??图２－８酶用量（Ｘ〇、液料比（Ｘ４）及其交互作用的响应面和等高线??Ｆｉｇ．２－８?Ｔｈｅ?ｒｅｓｕｌｔｓ?ｏｆ?ＲＳＭ?ｐｌｏｔ?ａｎｄ?ｉｔｓ?ｃｏｎｔｏｕｒ?ｐｌｏｔ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?ｅｎｚｙｍｅ?ｄｏｓａｇｅ?（Ｘｉ）?ａｎｄ??ｌｉｑｕｉｄ－ｓｏｌｉｄ?ｒａｔｉｏ?（Ｘ４）?ａｎｄ?ｔｈｅ?ｍｕｔｕａｌ?ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ?ｂｅｔｗｅｅｎ?ｔｈｅｍ?ｏｎ?ｔｈｅ?ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ?ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ?ｏｆ??Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ?ｏｌｅｏｒｅｓｉｎ??

等高线图,响应面,酶用量,交互作用