利用稀禾定筛选高生长高油脂的寇氏隐甲藻突变株及转录分析

发布时间：2020-12-04 17:39

　　寇氏隐甲藻（Crypthecodinium cohnii）是一种异养海洋微藻,其体内DHA含量占油脂含量的30-50%,而体内其他多不饱和脂肪酸含量占油脂含量的比例都达不到1%。由于这些优势,近些年来寇氏隐甲藻已经被广泛应用于DHA的工业化生产中。但是,到目前为止,寇氏隐甲藻的全基因组序列测序还没有被完成,限制了基因工程在寇氏隐甲藻中应用,人们无法通过基因改造的方式获得性状更为优良的寇氏隐甲藻突变株。因此,诱变育种仍然是获得高产寇氏隐甲藻突变株的主要方式。在本研究中,我们发现一定浓度的乙酰辅酶A羧化酶活性抑制剂稀禾定能够显著抑制寇氏隐甲藻的生长。因此,我们提出选用稀禾定作为一种突变株筛选剂,用于筛选乙酰辅酶A羧化酶活性增强同时生长和油脂含量有所提高的突变株。为了实现这一目标,我们将常压室温等离子体（ARTP）诱变技术与基于稀禾定的突变株筛选方法相结合,并成功应用于寇氏隐甲藻中,经过两轮诱变筛选,成功获得了高产的寇氏隐甲藻突变株。我们得到的寇氏隐甲藻突变株M-1-2,与野生株WT相比,其干重和油脂分别提高了24.32%和7.05%,证明了基于稀禾定的筛选方法的有效性。与上述结果相一致的,... 

【文章来源】：天津大学天津市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：82 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

DHA化学结构式Figure1-1ChemicalstructureofDHA

基载体蛋白（BCCP）、α-羟基转移酶（α-CT）和 β-羟基转移酶（一条多功能的长多肽链上，主要存在于植物液泡、动物、酵母、同质型 ACCase 都由核基因编码，其功能域上有高度保守的BC-BCCCT-COOH[71]。乙酰辅酶 A 羧化酶的结构图如图 1-2 所示。

A 羧化酶抑制剂——稀禾定oxydim）又被称为拿补净，其化学名称为 2基）丙基]-3-羟基-2-环己烯-1-酮，是一种草[77]。稀禾定结构如图 1-3 所示。

【参考文献】：
期刊论文
[1]采用常压室温等离子体诱变技术获得一株高产雄甾-4-烯-3,17-二酮的突变菌株Mycobacterium neoaurum ZADF-4（英文）[J]. Chao LIU,Xian ZHANG,Zhi-ming RAO,Ming-long SHAO,Le-le ZHANG,Dan WU,Zheng-hong XU,Hui LI.  Journal of Zhejiang University-Science B（Biomedicine & Biotechnology）. 2015(04)
[2]钝顶节旋藻高产藻株的诱变选育[J]. 刘奇,臧晓南,张学成.  中国海洋大学学报(自然科学版). 2015(04)
[3]高产DHA寇氏隐甲藻突变株的筛选[J]. 佘隽,田华,陈涛,何东平.  食品科学. 2013(17)
[4]精喹禾灵筛选高脂微藻的有效性研究[J]. 曲晓梅,宓文义,朱葆华,杨官品,李色东,潘克厚.  中国海洋大学学报(自然科学版). 2013(06)
[5]高产二十二碳六烯酸隐甲藻的选育及其发酵条件研究[J]. 孙中贯,刘咏,姚建铭,李俊,朱素梅.  食品科学. 2013(05)
[6]三种海洋微藻和三种淡水微藻脂肪酸组成特征的比较分析[J]. 董丽华,游江涛,林秋奇,胡韧,韩博平.  热带亚热带植物学报. 2004(03)
[7]三种海洋微藻生长期脂肪酸组成研究[J]. 李文权,廖启斌,李芊,陈清花,王宪.  海洋环境科学. 2002(02)
[8]环境条件对隐甲藻生长及DHA产量的影响[J]. 王菊芳,梁世中,陈峰.  海洋科学. 2002(02)
[9]碳、氮源对隐甲藻油脂和DHA积累的影响[J]. 王永华,梁世中,杨博.  中国油脂. 2001(06)
[10]碳氮比对隐甲藻(Crypthecodinium cohnii)总脂及DHA含量的影响[J]. 王菊芳,梁世中,吴振强,谭字榴,陈峰.  华南理工大学学报(自然科学版). 2000(10)

硕士论文
[1]莱茵衣藻高产油脂藻株的诱变筛选及其油脂代谢关键酶基因的转录分析[D]. 张晓舟.中国海洋大学 2013
[2]优化海产微藻多不饱和脂肪酸生产条件的研究[D]. 蒋汉明.汕头大学 2003



本文编号：2897988