几丁质脱乙酰酶产生菌的诱变育种及产酶条件研究
发布时间：2020-12-27 21:42
壳聚糖,几丁质的脱乙酰基产物,具有比几丁质更好的溶解性、可降解性和生物相容性。壳聚糖有抑菌、保湿、调节血脂等优良性能,因而在食品、医药等领域有很大的开发和应用潜力。几丁质脱乙酰酶（CDA）,是酶法制备壳聚糖的关键酶。该方法制备壳聚糖反应条件温和、能耗值低、环境友好,是行业未来的发展趋势。本研究以海口红树林土壤中筛选出的一株产CDA丝状真菌PenicilliumjanthinellumUV-OS为出发菌株,采用多级紫外诱变方法进行诱变育种,针对筛选获得的高产诱变菌株的培养基配方和发酵条件进行了优化,最后对胞外CDA粗酶的酶学性质进行了研究,主要内容和结果如下:1.紫外线诱变育种以Penicillium janthinellum UV-OS为出发菌株,对其孢子液进行紫外线诱变处理,经多级紫外诱变后获得一株高产CDA诱变菌株UV-3S。UV-3S的胞外CDA酶活值为11.05 U/mL,是原始株UV-OS的2.13倍。2.诱变菌株UV-3S与野生菌株UV-OS的发酵产酶特性诱变菌株UV-3S与野生菌株UV-0S培养24 h后,每12 h分别测定它们的胞外CDA酶活、胞内CDA酶活、残糖量、生...
【文章来源】：海南大学海南省 211工程院校
【文章页数】：61 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图３诱变菌株ＵＶ－３Ｓ菌丝体Ｕ），产孢结构（ｂ）?（ｃ）及孢子的显微图（ｄ）??Ｆｉｇ．３?Ｍｉｃｒｏｇｒａｐｈ?ｏｆ?ｍｙｃｅｌｉｕｍ?（ａ），?ｓｐｏｒｏｇｅｎｏｕｓ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?（ｂ）?（ｃ）?ａｎｄ?ｓｐｏｒｅｓ?（ｄ）?ｏｆ?ｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓ??ＵＶ－３Ｓ??（ｉ）分子生物学鉴定结?
海南大学硕士学位论文??３结果与分析??１高产ＣＤＡ突变菌株的选育??１．１菌种鉴定??）形态学鉴定结果??图２－ａ为ＵＶ－３Ｓ菌落在筛选培养基的表型特征图，图２－ｂ为ＵＶ－３Ｓ菌株在面培养基的表型特征图。由图２－ａ可知，菌落为乳白色、圆形、不透明、表面润、全缘、中间隆起、有光泽；继续培养，菌丝体产ＣＤＡ酶，将筛选培养基中硝基乙酰苯胺的乙酰基脱去，生成黄色的对硝基苯胺，使菌落周围呈现黄色透明一步培养黄色透明圈变大。菌株在ＰＤＡ斜面培养基的表型与在筛选培养基的同，在生长初期，菌丝体呈白色，气生菌丝生长旺盛，呈丝绒状，培养２－３天产灰绿色孢子。?????
图６?ＵＶ－ＯＳ?（ａ）与诱变菌株ＵＶ－３Ｓ?（ｂ）细胞壁几丁质的红外光谱??Ｆｉｇ．６?ＦＴ－ＩＲ?ｓｐｅｃｔｒｕｍ?ｏｆ?ｃｅｌｌ?ｗａｌｌ?ｃｈｉｔｉｎ?ｆｒｏｍ?Ｐｅｍｃｉｌｌｉｕｍ?ｊａｎｔｈｉｔｉｅｌｌｕｍ?ＵＶ－ＯＳ?（ａ）?ａｎｄ??ｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓ?ＵＶ－３Ｓ?（ｂ?
【参考文献】：
期刊论文
[1]一株产几丁质脱乙酰酶丝状真菌的发酵条件优化研究[J]. 应聪萍,王瑶,李永成. 食品工业科技. 2016(01)
[2]羧甲基壳聚糖的性能及应用概况[J]. 王美娜,李苑新,蔡兴. 中国实验方剂学杂志. 2015(01)
[3]高产几丁质酶巴伦葛兹类芽孢杆菌的筛选和发酵条件优化[J]. 付星,闫巧娟,江正强,杨鑫斌,刘竹青,杨绍青. 微生物学通报. 2015(04)
[4]表面活性剂辅助酶法提取黄芪黄酮的工艺优化[J]. 王超,杜冰,谢蓝华,张嘉怡,林凤英,杨公明. 食品工业科技. 2014(23)
[5]几丁质脱乙酰酶(CDA)的研究进展[J]. 闵婷,倪孟祥. 药物生物技术. 2011(01)
[6]紫外诱变选育壳聚糖酶高产菌株的初步研究[J]. 屠洁,刘冠卉,徐桂娥,李前龙. 中国酿造. 2010(11)
[7]甲壳素/壳聚糖生物抗菌敷料在皮肤组织工程中的应用[J]. 何玲,于波,王慧丽,李青,吕品. 中国组织工程研究与临床康复. 2010(38)
[8]高产几丁质酶的枯草芽孢杆菌诱变育种及发酵条件研究[J]. 张敏,胡晓,万津瑜,雷欣雨,赵丹萍. 中国农学通报. 2010(11)
[9]紫外光诱导苎麻疫霉抗甲霜灵突变及对苎麻疫霉生物学特性的影响[J]. 吴向辉,高智谋,陈方新,潘月敏,陆保君. 菌物学报. 2010(01)
[10]壳聚糖接枝水杨酸对草莓的保鲜作用[J]. 侯怀恩,侯益民,李雪菊. 河南科学. 2009(12)
博士论文
[1]紫外线损伤微生物机理及增强活性污泥降解特性应用研究[D]. 江映翔.昆明理工大学 2003
硕士论文
[1]产几丁质酶渤海丝状真菌（Alternaria tenuissima）的筛选、鉴定及产酶研究[D]. 刘丹.天津师范大学 2012
[2]几丁质脱乙酰酶菌株的选育[D]. 张菁菁.陕西科技大学 2012
[3]几丁质脱乙酰酶产生菌的诱变筛选及发酵条件优化[D]. 刘丽.山东师范大学 2011
[4]甘蓝夜蛾中两种不同类型几丁质脱乙酰基酶基因的克隆与表达研究[D]. 姚磊.东北农业大学 2011
[5]Rhodococcus sp. Y104产几丁质脱乙酰酶的分离纯化[D]. 岳洪霞.山东轻工业学院 2010
[6]海洋微生物几丁质酶菌株筛选及培养条件[D]. 辛雪娇.大连工业大学 2010
[7]产几丁质酶菌株的筛选与鉴定及几丁质酶酶学性质研究[D]. 熊晶.中南大学 2009
[8]几丁质脱乙酰酶产生菌的筛选[D]. 刘丽萍. 2007
本文编号：2942536
【文章来源】：海南大学海南省 211工程院校
【文章页数】：61 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图３诱变菌株ＵＶ－３Ｓ菌丝体Ｕ），产孢结构（ｂ）?（ｃ）及孢子的显微图（ｄ）??Ｆｉｇ．３?Ｍｉｃｒｏｇｒａｐｈ?ｏｆ?ｍｙｃｅｌｉｕｍ?（ａ），?ｓｐｏｒｏｇｅｎｏｕｓ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?（ｂ）?（ｃ）?ａｎｄ?ｓｐｏｒｅｓ?（ｄ）?ｏｆ?ｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓ??ＵＶ－３Ｓ??（ｉ）分子生物学鉴定结?
海南大学硕士学位论文??３结果与分析??１高产ＣＤＡ突变菌株的选育??１．１菌种鉴定??）形态学鉴定结果??图２－ａ为ＵＶ－３Ｓ菌落在筛选培养基的表型特征图，图２－ｂ为ＵＶ－３Ｓ菌株在面培养基的表型特征图。由图２－ａ可知，菌落为乳白色、圆形、不透明、表面润、全缘、中间隆起、有光泽；继续培养，菌丝体产ＣＤＡ酶，将筛选培养基中硝基乙酰苯胺的乙酰基脱去，生成黄色的对硝基苯胺，使菌落周围呈现黄色透明一步培养黄色透明圈变大。菌株在ＰＤＡ斜面培养基的表型与在筛选培养基的同，在生长初期，菌丝体呈白色，气生菌丝生长旺盛，呈丝绒状，培养２－３天产灰绿色孢子。?????
图６?ＵＶ－ＯＳ?（ａ）与诱变菌株ＵＶ－３Ｓ?（ｂ）细胞壁几丁质的红外光谱??Ｆｉｇ．６?ＦＴ－ＩＲ?ｓｐｅｃｔｒｕｍ?ｏｆ?ｃｅｌｌ?ｗａｌｌ?ｃｈｉｔｉｎ?ｆｒｏｍ?Ｐｅｍｃｉｌｌｉｕｍ?ｊａｎｔｈｉｔｉｅｌｌｕｍ?ＵＶ－ＯＳ?（ａ）?ａｎｄ??ｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓ?ＵＶ－３Ｓ?（ｂ?
【参考文献】：
期刊论文
[1]一株产几丁质脱乙酰酶丝状真菌的发酵条件优化研究[J]. 应聪萍,王瑶,李永成. 食品工业科技. 2016(01)
[2]羧甲基壳聚糖的性能及应用概况[J]. 王美娜,李苑新,蔡兴. 中国实验方剂学杂志. 2015(01)
[3]高产几丁质酶巴伦葛兹类芽孢杆菌的筛选和发酵条件优化[J]. 付星,闫巧娟,江正强,杨鑫斌,刘竹青,杨绍青. 微生物学通报. 2015(04)
[4]表面活性剂辅助酶法提取黄芪黄酮的工艺优化[J]. 王超,杜冰,谢蓝华,张嘉怡,林凤英,杨公明. 食品工业科技. 2014(23)
[5]几丁质脱乙酰酶(CDA)的研究进展[J]. 闵婷,倪孟祥. 药物生物技术. 2011(01)
[6]紫外诱变选育壳聚糖酶高产菌株的初步研究[J]. 屠洁,刘冠卉,徐桂娥,李前龙. 中国酿造. 2010(11)
[7]甲壳素/壳聚糖生物抗菌敷料在皮肤组织工程中的应用[J]. 何玲,于波,王慧丽,李青,吕品. 中国组织工程研究与临床康复. 2010(38)
[8]高产几丁质酶的枯草芽孢杆菌诱变育种及发酵条件研究[J]. 张敏,胡晓,万津瑜,雷欣雨,赵丹萍. 中国农学通报. 2010(11)
[9]紫外光诱导苎麻疫霉抗甲霜灵突变及对苎麻疫霉生物学特性的影响[J]. 吴向辉,高智谋,陈方新,潘月敏,陆保君. 菌物学报. 2010(01)
[10]壳聚糖接枝水杨酸对草莓的保鲜作用[J]. 侯怀恩,侯益民,李雪菊. 河南科学. 2009(12)
博士论文
[1]紫外线损伤微生物机理及增强活性污泥降解特性应用研究[D]. 江映翔.昆明理工大学 2003
硕士论文
[1]产几丁质酶渤海丝状真菌（Alternaria tenuissima）的筛选、鉴定及产酶研究[D]. 刘丹.天津师范大学 2012
[2]几丁质脱乙酰酶菌株的选育[D]. 张菁菁.陕西科技大学 2012
[3]几丁质脱乙酰酶产生菌的诱变筛选及发酵条件优化[D]. 刘丽.山东师范大学 2011
[4]甘蓝夜蛾中两种不同类型几丁质脱乙酰基酶基因的克隆与表达研究[D]. 姚磊.东北农业大学 2011
[5]Rhodococcus sp. Y104产几丁质脱乙酰酶的分离纯化[D]. 岳洪霞.山东轻工业学院 2010
[6]海洋微生物几丁质酶菌株筛选及培养条件[D]. 辛雪娇.大连工业大学 2010
[7]产几丁质酶菌株的筛选与鉴定及几丁质酶酶学性质研究[D]. 熊晶.中南大学 2009
[8]几丁质脱乙酰酶产生菌的筛选[D]. 刘丽萍. 2007
本文编号：2942536
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