别藻蓝蛋白的提取纯化工艺研究及光谱分析

发布时间：2021-01-17 19:43

　　本论文以新鲜巢湖水华蓝藻和钝顶螺旋藻为对比研究对象,以别藻蓝蛋白（APC）的纯度和回收率为指标,研究对比了不同盐析方式对两种藻中别藻蓝蛋白的提纯效果和最优条件,试验探索了羟基磷灰石（HA）柱层析法提纯别藻蓝蛋白的条件,探索了常见因素对别藻蓝蛋白稳定性的影响,并运用紫外-可见吸收光谱法,分析了试剂级别藻蓝蛋白提取纯化工艺组合的纯化机理。具体研究内容与结果有:（1）粗提纯条件的优化实验。分别研究单步高浓度盐析、分段两步盐析对巢湖蓝藻、钝顶螺旋藻中别藻蓝蛋白的纯化效果,探索不同硫酸铵浓度对提取纯化别藻蓝蛋白的影响。结果表明:分段两步盐析比单步高浓度盐析的纯化效果更好,螺旋藻的最佳硫酸铵浓度为1.6 mol/L、2.2 mol/L,纯度由0.34提升至1.24,巢湖蓝藻的最佳硫酸铵浓度为1.4 mol/L、2.0 mol/L,纯度由0.15上升至0.85。（2）柱层析条件的优化实验。通过纯度比较及光谱分析,研究羟基磷灰石柱层析在不同淋洗梯度条件对别藻蓝蛋白洗脱效果的影响,并采用优选出的最佳方案应用于螺旋藻和巢湖蓝藻中别藻蓝蛋白的分离提纯。结果表明:选择50、100、200 mmol/L的浓度梯... 

【文章来源】：合肥工业大学安徽省 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：64 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
致谢
摘要
abstract
第一章 绪论
    1.1 研究背景
        1.1.1 螺旋藻概述
        1.1.2 巢湖蓝藻概述
        1.1.3 别藻蓝蛋白的性质作用
        1.1.4 别藻蓝蛋白的纯化方法
        1.1.5 别藻蓝蛋白的光谱分析
        1.1.6 别藻蓝蛋白的稳定性
    1.2 研究进展
        1.2.1 蓝藻资源化利用现状
        1.2.2 别藻蓝蛋白的纯化研究现状
        1.2.3 别藻蓝蛋白稳定性研究现状
    1.3 课题的提出
        1.3.1 选题依据
        1.3.2 研究意义
        1.3.3 研究路线与研究内容
第二章 别藻蓝蛋白粗提纯条件的优化
    2.1 前言
    2.2 材料与方法
        2.2.1 试剂与仪器
        2.2.2 实验方法
        2.2.3 分析方法
    2.3 结果与讨论
        2.3.1 单步高浓度盐析单因素实验结果与分析
        2.3.2 分段两步盐析单因素实验结果与分析
        2.3.3 螺旋藻与巢湖蓝藻粗提纯实验结果对比与分析
    2.4 小结
第三章 别藻蓝蛋白柱层析条件的优化
    3.1 前言
    3.2 材料与方法
        3.2.1 试剂与仪器
        3.2.2 实验方法
        3.2.3 分析方法
    3.3 结果与讨论
        3.3.1 HA柱层析淋洗液梯度的选择结果与分析
        3.3.2 两步盐析结合一步HA柱层析的实验结果与分析
    3.4 小结
第四章 试剂级别藻蓝蛋白纯化过程中的光谱分析
    4.1 前言
    4.2 材料与方法
        4.2.1 试剂与仪器
        4.2.2 实验方法
        4.2.3 分析方法
    4.3 结果与讨论
        4.3.1 单步高浓度盐析的光谱分析
        4.3.2 分段两步盐析的光谱分析
        4.3.3 经HA柱层析纯化后的光谱分析
        4.3.4 不同工艺阶段后APC的光谱图比较
    4.4 小结
第五章 别藻蓝蛋白的稳定性研究
    5.1 前言
    5.2 材料与方法
        5.2.1 试剂与仪器
        5.2.2 实验方法
    5.3 分析方法
    5.4 结果与讨论
        5.4.1 光照和时间对别藻蓝蛋白稳定性的影响
        5.4.2 温度对别藻蓝蛋白稳定性的影响
        5.4.3 酸碱度对别藻蓝蛋白稳定性的影响
    5.5 小结
第六章 结论与展望
    6.1 结论
    6.2 研究特色
    6.3 展望
参考文献
攻读硕士学位期间发表的论文


【参考文献】：
期刊论文
[1]巢湖水体富营养化成因分析及治理对策[J]. 朱庆春.  安徽农学通报. 2017(09)
[2]四步盐析提取巢湖新鲜蓝藻中藻蓝蛋白及其稳定性[J]. 赵冰冰,张发宇,陈裕,汪家权.  环境工程学报. 2016(05)
[3]巢湖富营养化的历程、空间分布与治理策略（1984-2013年）[J]. 张民,孔繁翔.  湖泊科学. 2015(05)
[4]pH对腐熟蓝藻微生物燃料电池产电性能的影响[J]. 陈桂顶,朱光灿,周越.  中南大学学报(自然科学版). 2015(07)
[5]藻蓝蛋白抑制人结肠癌SW480细胞增殖的初步研究[J]. 张成,潘若望,李坤鹏,舒健峰,陈吉顺,刘倩,包其郁,应俊,李佩珍.  中国微生态学杂志. 2015(02)
[6]冬季巢湖西半湖的富营养化及污染状况研究——基于浮游藻类的多样性分析[J]. 李梦,刘桂建,吴蕾,刘荣琼,汪家权.  中国科学技术大学学报. 2015(02)
[7]蓝藻和松木热解液化制取生物油的试验研究[J]. 徐珊,王晶博,陆阿定,周宇芳,胡建坤.  可再生能源. 2014(09)
[8]太湖水体中藻蓝蛋白的紫外-可见吸收光谱特征分析[J]. 张静,韦玉春,王国祥,程春梅,夏晓瑞.  光谱学与光谱分析. 2014(05)
[9]紫外吸收光谱积分法分析蛋白质浓度-以碱性磷酸酶为例[J]. 朱元荣,吴丰昌,林樱.  光谱学与光谱分析. 2013(07)
[10]螺旋藻营养保健价值及开发应用进展[J]. 张文,吴清平,吴军林.  食品与发酵科技. 2013(03)

博士论文
[1]试剂级藻蓝蛋白提取纯化工艺研究及光谱分析[D]. 张发宇.合肥工业大学 2017

硕士论文
[1]高效提纯巢湖蓝藻藻蓝蛋白工艺研究[D]. 盛晶梦.合肥工业大学 2016
[2]巢湖水华蓝藻藻蓝蛋白提取纯化研究[D]. 赵冰冰.合肥工业大学 2015
[3]钝顶螺旋藻中藻蓝蛋白提取纯化及稳定性研究[D]. 徐蕾然.天津科技大学 2013
[4]巢湖富营养化连续在线监测与蓝藻水华预警[D]. 肖永辉.扬州大学 2011
[5]太湖蓝藻厌氧发酵产挥发性脂肪酸的研究[D]. 李玉祥.江南大学 2009



本文编号：2983479