短链硫酯酶缺失对大肠杆菌合成聚羟基丁酸乳酸酯的影响

发布时间：2021-03-15 13:40

　　聚羟基脂肪酸酯（PHAs）是一种由生物合成的聚合物,一般在微生物体内以小颗粒的形式作为能量储存物质存在,其性质与由石油衍生的化学塑料有一定的相似性,此外还具有独特的可降解能力和良好的生物相容性,因此可以作为化学塑料的替代品,缓解目前危害较大的由塑料堆积引发的白色污染等问题。聚羟基丁酸乳酸酯[P（3HB-co-LA）]是属于PHAs的一种共聚物,该聚合物融合了 P（3HB）和PLA共同的优点,具有更好的韧性和透明性。本研究以大肠杆菌E.coli MG1655作为背景菌株,通过表达聚羟基脂肪酸酯合成所需的β-酮硫解酶（phaA）和乙酰乙酰辅酶A还原酶（phaB）,突变后的PHA合成酶（phaCm）,用于共聚物前体LA-CoA合成所需的丙酸辅酶A转移酶突变体（pctth）,构建重组大肠杆菌菌株MG1655-03一步合成聚羟基丁酸乳酸酯。为了提高共聚物中乳酸组分含量,在优化后的木糖发酵中,敲除基因D-乳酸脱氢酶（dld）获得的重组菌株WXJ01-03的乳酸含量从23.8 mol%增加至37.2 mol%。大肠杆菌内源性硫酯酶可以降解脂肪酰辅酶A,通过摇瓶发酵筛选出对LA-CoA具有降解作用的硫... 

【文章来源】：华东理工大学上海市 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：67 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１．２不同乳酸含量下的Ｐ（３ＨＢ－ｃｏ－ＬＡ）?ｌ４１ｌ??Ｆｉｇ．?１．２?Ｐ（３ＨＢ?

图１．４基因工程大肠杆菌合成Ｐ（３ＨＢ－ｃｏ－ＬＡ）??Ｆｉｇ．?１．４?Ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ?ｏｆ?Ｐ（３ＨＢ－ｃｏ－ＬＡ）?ｂｙ?ｇｅｎｅｔｉｃａｌｌｙ?ｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄ?Ｅ?ｃｏｌｉ??

图２．１带有不同同源臂的卡那霉素片段电泳图

【参考文献】：
期刊论文
[1]弱化呼吸链水平对代谢工程大肠杆菌聚羟基丁酸乳酸酯合成的影响[J]. 陆静娴,李志敏,叶勤,吴辉.  生物工程学报. 2019(01)
[2]聚羟基脂肪酸酯的合成和应用研究进展[J]. 朱博超,焦宁宁.  现代塑料加工应用. 2003(05)



本文编号：3084273