高产木聚糖酶酿酒酵母工程菌的构建及发酵条件优化
发布时间：2021-03-20 16:00
木聚糖酶被用作重要的工业酶制剂,已经成熟应用在纸浆造纸、饲料加工、酿造等工业生产中。β-1,4-内切木聚糖酶是木聚糖完全水解酶系中关键酶,其结构包括催化域、结合域、热稳定域及未知功能结构域等,催化采用内切水解方式,专一性作用主链分子中的β-1,4-糖苷键。为了成功实现酿酒酵母高效分泌木聚糖酶,本研究采用重叠延伸PCR法将组成型启动子PGK、外源蛋白分泌α-factor、木聚糖酶（xylanaseB,XynB）和终止子CYC1构建成PαXC表达盒。利用rDNA整合法将组成型表达载体pYES2-PαXC-rDNA整合到酿酒酵母基因组中,通过尿嘧啶营养缺陷型筛选获得阳性转化子,基于液滴数字PCR（digital polymerase chain reaction,ddPCR）法鉴定重组酿酒酵母菌株木聚糖酶基因的拷贝数,利用3,5-二硝基水杨酸（DNS）法检测不同拷贝数的木聚糖酶基因重组菌株的产酶活力,考察不同拷贝数的木聚糖酶基因与其酶活力之间的关系,对酶活力最高的重组菌株进行遗传稳定性研究,通过单因素分析和响应面法优化重组菌株产木聚糖酶的发酵条件,研究结果如下:1、利用重叠延伸PCR法成功构...
【文章来源】：吉林农业大学吉林省
【文章页数】：62 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
秸秆组成的化学分子结构
的 α-阿拉伯糖苷酶/β-木糖苷酶协同效力水解木聚糖[31]；20活性木聚糖降解酶工程菌，降解的低聚木糖效率高、木二糖袁建敏等制备了特异性木聚糖降解复合酶制剂，改善了小麦芬等探讨了 γ 射线穿透木聚糖的机理[34]。基于木聚糖结构对、氧化等。2012 年，过嫣丹采用碱-过氧化氢法从谷物麸皮伯木聚糖，采用溴代正丁烷、溴代十二/十六烷作醚化剂增改性[35]；2015 年，杨成等以谷物阿拉伯木聚糖和季铵化试催化剂合成阳离子阿拉伯木聚糖，使其与卤代烷烃在碱催调理剂或增稠剂，可广泛应用于化妆品及个人护理品中，也纸、食品等领域[36]。木聚糖除了被化学改性外，可以采用物功能性质料。2015 年，Kirsi S 等将桦木牛皮纸浆木聚糖在羟碱萃取和改性，以提高其对薄膜的可加工性[37]；2017 年，糖的双网络纳米复合水凝胶，具有优良的机械性能、较高的，广泛应用于生物医学领域[38]。
实验结构图
【参考文献】：
期刊论文
[1]耕作及秸秆还田对辽南地区土壤水分及春玉米水分利用效率的影响[J]. 战秀梅,宋涛,冯小杰,王雪鑫,徐晓楠,刘小虎,韩晓日. 沈阳农业大学学报. 2017(06)
[2]秸秆还田对土壤有机碳影响研究取得新进展[J]. 农业科技与信息. 2017(22)
[3]微滴式数字PCR（ddPCR）快速检测α珠蛋白基因αααanti-3.7三联体[J]. 龚小倩,杨学煌,乔伶俐,陈亚军,周万军. 南方医科大学学报. 2017(09)
[4]N-端置换提高木聚糖酶AoXyn11A的耐热性[J]. 何瑶,吴芹,殷欣,胡蝶,邬敏辰. 食品与生物技术学报. 2017(08)
[5]木聚糖酶对戊聚糖及面团品质的影响[J]. 许真,王显伦. 食品科学. 2017(15)
[6]蒸汽爆破和化学处理对玉米秸秆化学成分的影响[J]. 韩浩然,常娟,尹清强,王平. 江苏农业科学. 2017(08)
[7]一株碱性木聚糖酶产生菌的筛选及发酵条件的优化[J]. 易旭东,潘虎,田云,刘博伦,林元山. 中国农学通报. 2017(17)
[8]一株产耐热耐碱木聚糖酶菌株的筛选及酶学性质研究[J]. 张晓元,郝荣华,刘飞,陈勉,朱希强,凌沛学. 食品与药品. 2017(02)
[9]γ射线辐照降解木聚糖的机理研究[J]. 武小芬,陈亮,陈静萍,苏小军,齐慧,王克勤,邓明. 核农学报. 2017(05)
[10]微滴式数字PCR技术定量检测发酵乳中金黄色葡萄球菌[J]. 周巍,李月华,孙勇,李永波,张涛,刘琼,张岩,王丽霞. 食品科学. 2017(16)
博士论文
[1]耐热木聚糖酶重组酵母高密度发酵工艺及其生物学特性研究[D]. 商婷婷.中国农业大学 2017
[2]木质纤维素干法生物炼制生产葡萄糖酸和木糖酸的微生物发酵过程研究[D]. 张宏森.华东理工大学 2016
[3]酿酒酵母异源蛋白高效分泌适配元件的发掘及人造纤维小体的构制[D]. 汤红婷.山东大学 2016
[4]我国农业废弃物新型能源化开发利用研究[D]. 左旭.中国农业科学院 2015
[5]农作物秸秆木质纤维素生产乙醇和乳酸的高效生物炼制过程研究[D]. Qureshi Abdul Sattar（萨塔）.华东理工大学 2015
[6]秸秆燃料特性及清洁燃烧设备研究[D]. 付成果.中国农业大学 2015
[7]β-葡聚糖对髓源性抑制细胞的分子调控及其在抗瘤免疫中的作用[D]. 田洁.江苏大学 2014
硕士论文
[1]木薯原料制生物丁醇发酵技术研究[D]. 王文博.浙江大学 2017
[2]木聚糖酶温度特性的改善及其在总皂苷提取中的应用[D]. 吴芹.江南大学 2017
[3]酿酒酵母中甘草次酸人工合成体系的构建与优化[D]. 李宏彪.石河子大学 2017
[4]基于计算机辅助设计改造饲用植酸酶、木聚糖酶酶学特性的研究[D]. 苗华彪.云南师范大学 2017
[5]发酵与酶解处理玉米秸秆工艺优化及其对饲用品质影响研究[D]. 地里百尔·努尔.吉林农业大学 2016
[6]改性玉米秸秆的表征及吸附性能研究[D]. 陈晓晓.长春工业大学 2016
[7]玉米秸轩混污泥燃料成型及其燃烧特性研究[D]. 姜秋玥.辽宁工业大学 2016
[8]酿酒酵母发酵菊糖生产乙醇过程的研究[D]. 何天琪.大连工业大学 2016
[9]碱性木聚糖酶基因的优化及在毕赤酵母中的表达[D]. 马婷.武汉轻工大学 2014
[10]利用酿酒酵母表达重组人白蛋白—甲状旁腺激素（1-34）ab二联体蛋白[D]. 刘青霞.江南大学 2013
本文编号：3091270
【文章来源】：吉林农业大学吉林省
【文章页数】：62 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
秸秆组成的化学分子结构
的 α-阿拉伯糖苷酶/β-木糖苷酶协同效力水解木聚糖[31]；20活性木聚糖降解酶工程菌，降解的低聚木糖效率高、木二糖袁建敏等制备了特异性木聚糖降解复合酶制剂，改善了小麦芬等探讨了 γ 射线穿透木聚糖的机理[34]。基于木聚糖结构对、氧化等。2012 年，过嫣丹采用碱-过氧化氢法从谷物麸皮伯木聚糖，采用溴代正丁烷、溴代十二/十六烷作醚化剂增改性[35]；2015 年，杨成等以谷物阿拉伯木聚糖和季铵化试催化剂合成阳离子阿拉伯木聚糖，使其与卤代烷烃在碱催调理剂或增稠剂，可广泛应用于化妆品及个人护理品中，也纸、食品等领域[36]。木聚糖除了被化学改性外，可以采用物功能性质料。2015 年，Kirsi S 等将桦木牛皮纸浆木聚糖在羟碱萃取和改性，以提高其对薄膜的可加工性[37]；2017 年，糖的双网络纳米复合水凝胶，具有优良的机械性能、较高的，广泛应用于生物医学领域[38]。
实验结构图
【参考文献】：
期刊论文
[1]耕作及秸秆还田对辽南地区土壤水分及春玉米水分利用效率的影响[J]. 战秀梅,宋涛,冯小杰,王雪鑫,徐晓楠,刘小虎,韩晓日. 沈阳农业大学学报. 2017(06)
[2]秸秆还田对土壤有机碳影响研究取得新进展[J]. 农业科技与信息. 2017(22)
[3]微滴式数字PCR（ddPCR）快速检测α珠蛋白基因αααanti-3.7三联体[J]. 龚小倩,杨学煌,乔伶俐,陈亚军,周万军. 南方医科大学学报. 2017(09)
[4]N-端置换提高木聚糖酶AoXyn11A的耐热性[J]. 何瑶,吴芹,殷欣,胡蝶,邬敏辰. 食品与生物技术学报. 2017(08)
[5]木聚糖酶对戊聚糖及面团品质的影响[J]. 许真,王显伦. 食品科学. 2017(15)
[6]蒸汽爆破和化学处理对玉米秸秆化学成分的影响[J]. 韩浩然,常娟,尹清强,王平. 江苏农业科学. 2017(08)
[7]一株碱性木聚糖酶产生菌的筛选及发酵条件的优化[J]. 易旭东,潘虎,田云,刘博伦,林元山. 中国农学通报. 2017(17)
[8]一株产耐热耐碱木聚糖酶菌株的筛选及酶学性质研究[J]. 张晓元,郝荣华,刘飞,陈勉,朱希强,凌沛学. 食品与药品. 2017(02)
[9]γ射线辐照降解木聚糖的机理研究[J]. 武小芬,陈亮,陈静萍,苏小军,齐慧,王克勤,邓明. 核农学报. 2017(05)
[10]微滴式数字PCR技术定量检测发酵乳中金黄色葡萄球菌[J]. 周巍,李月华,孙勇,李永波,张涛,刘琼,张岩,王丽霞. 食品科学. 2017(16)
博士论文
[1]耐热木聚糖酶重组酵母高密度发酵工艺及其生物学特性研究[D]. 商婷婷.中国农业大学 2017
[2]木质纤维素干法生物炼制生产葡萄糖酸和木糖酸的微生物发酵过程研究[D]. 张宏森.华东理工大学 2016
[3]酿酒酵母异源蛋白高效分泌适配元件的发掘及人造纤维小体的构制[D]. 汤红婷.山东大学 2016
[4]我国农业废弃物新型能源化开发利用研究[D]. 左旭.中国农业科学院 2015
[5]农作物秸秆木质纤维素生产乙醇和乳酸的高效生物炼制过程研究[D]. Qureshi Abdul Sattar（萨塔）.华东理工大学 2015
[6]秸秆燃料特性及清洁燃烧设备研究[D]. 付成果.中国农业大学 2015
[7]β-葡聚糖对髓源性抑制细胞的分子调控及其在抗瘤免疫中的作用[D]. 田洁.江苏大学 2014
硕士论文
[1]木薯原料制生物丁醇发酵技术研究[D]. 王文博.浙江大学 2017
[2]木聚糖酶温度特性的改善及其在总皂苷提取中的应用[D]. 吴芹.江南大学 2017
[3]酿酒酵母中甘草次酸人工合成体系的构建与优化[D]. 李宏彪.石河子大学 2017
[4]基于计算机辅助设计改造饲用植酸酶、木聚糖酶酶学特性的研究[D]. 苗华彪.云南师范大学 2017
[5]发酵与酶解处理玉米秸秆工艺优化及其对饲用品质影响研究[D]. 地里百尔·努尔.吉林农业大学 2016
[6]改性玉米秸秆的表征及吸附性能研究[D]. 陈晓晓.长春工业大学 2016
[7]玉米秸轩混污泥燃料成型及其燃烧特性研究[D]. 姜秋玥.辽宁工业大学 2016
[8]酿酒酵母发酵菊糖生产乙醇过程的研究[D]. 何天琪.大连工业大学 2016
[9]碱性木聚糖酶基因的优化及在毕赤酵母中的表达[D]. 马婷.武汉轻工大学 2014
[10]利用酿酒酵母表达重组人白蛋白—甲状旁腺激素（1-34）ab二联体蛋白[D]. 刘青霞.江南大学 2013
本文编号：3091270
本文链接：https://www.wllwen.com/projectlw/hxgylw/3091270.html
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