油基对脂质伴随物细胞抗氧化的影响研究
发布时间：2021-03-21 08:42
植物油含α-生育酚、γ-谷维素和甾醇等活性成分,它们作为植物油中常见的微量脂质伴随物,具有良好的抗氧化功能。植物油中占比最高的甘油酯因具有不同长度和饱和度的碳链,在性质上存在较大差异,此差异是否会影响脂质伴随物在细胞中抗氧化功能的发挥,机理为何,尚未明晰。鉴于此,本论文选取两种典型植物油基,富含长碳链不饱和脂肪酸甘油酯的稻米油（RBO）和富含中碳链饱和脂肪酸甘油酯的椰子油（CNO）,通过高压均质法制备成乳液,将含有不同浓度脂质伴随物的油基乳液递送至HepG2细胞中,在细胞模型中研究不同类型油基乳液对α-生育酚、γ-谷维素和甾醇三种脂质伴随物的细胞抗氧化活性（CAA）的影响及机理。论文的主要研究内容如下:首先,优化高压均质工艺条件,选取稻米油和椰子油两种典型油脂,制备均匀稳定乳液,研究油脂组成对乳液zeta电位、粒径分布和储藏稳定性等性质的影响。结果显示,植物油浓度为100 mg/mL时,乳液平均粒径较小,且多分散系数（PDI）值最小可低于0.2;随着均质压力和循环次数的增大,乳液平均粒径减小,在250 nm-300 nm范围内;均质压力为60 MPa且循环次数为3时,乳液平均粒径在25...
【文章来源】：江南大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：67 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
具有抗氧化和促氧化活性的膳食植物化学物质的浓度效应曲线[19]
江南大学硕士学位论文4人肝癌细胞的摄取是主动生物过程，主要是在网格蛋白的介导下，经过液相和吸附两种内吞形式进入细胞器。内吞是细胞膜内陷成囊泡，将胞外的生物大分子等物质摄取到胞内的过程。如图1-2所示，其中，大胞饮作用可以内化微米尺寸的颗粒，受体介导的内吞作用是最有效的形式，即颗粒表面的配体蛋白与细胞膜表面的受体蛋白结合，最后细胞膜弯曲内陷将颗粒包裹。当颗粒与细胞接触时，表面吸附的蛋白或其他两亲性的分子会影响颗粒与细胞膜间的作用[56]。癌细胞的摄取与颗粒自身性质(表面材料、聚集状态和初始浓度)及细胞所处状态(孵育时间)等特性共同决定[57]。内化是一个依赖于培育温度的耗能过程：在37℃培育时，颗粒的吸附(细胞膜表面)和内化(进入细胞)同时发生，所以在37℃培育温度下，与细胞结合的颗粒的量大于低温时的，孵育时间达到lh时，大部分的颗粒都已位于次级内体和溶酶体中[58]。图1-2细胞的摄取方式[56]Fig.1-2Cellularuptakepattern1.3.2HepG2细胞抗氧化模型肝脏是脂类代谢的主要器官，HepG2细胞被认为是研究体外异生物质代谢和肝脏毒性的良好模型，因为它们保留了正常人肝细胞的多数功能。HepG2细胞具有肝甘油三酯脂肪酶和抗氧化酶，并且可以表达多种蛋白(酶)[59]，在鉴定抗氧化剂以保护细胞免受脂质过氧化和细胞毒性方面得到应用。产生氧化应激的化学物质可导致细胞中谷胱甘肽水平和谷氨酰半胱氨酸合成酶活性增加，研究显示HepG2细胞含有比Chang细胞高约4倍的过氧化氢酶活性，因此在抵抗氧化应激方面具有更强的能力[60]。HepG2细胞溶酶体内有包括蛋白酶、脂肪酶及磷酸酯酶等在内的许多水解酶，它们控制多种大分子物质的溶解或消化，是细胞内的消化器官。此外，HepG2细胞高度分化、性质稳定且便于传代培养，是目
CFH氧化成DCF，利用酶标仪检测DCF的荧光信号强度，与对照组比较，减少的荧光信号强度反映的即是该物质的抗氧化能力。如表1-1所示，目前，CAA模型已被成熟应用于对单一抗氧化活性物质或果蔬提取物的细胞抗氧化评价中[61,62]。本实验室也已经首次将该模型应用于评价植物油脂质伴随物的细胞抗氧化性[27,28]，然而由于油脂的水不溶性问题，并未将该模型应用于评价真实的全油脂体系。基于CAA模型在复杂递送体系包括纳米乳液中的应用[53]，为解决油水不溶性问题并构建适用于评价以乳液形式递送的植物油细胞抗氧化模型提供了思路。图1-3细胞抗氧化评价模型原理图示[61]Fig.1-3Principlediagramofcellularantioxidantactivityassaymodel表1-1基于CAA模型对活性成分细胞抗氧化的评价Tab.1-1EvaluationofcellularantioxidantactivityofactivecomponentsbasedonCAAmodel活性成分来源溶解性体系引文总酚燕麦水溶性甲醇重悬液Chenetal.[63]总酚蔬菜水溶性甲醇重悬液Weietal.[64]总酚蓝莓、覆盆子等水溶性果汁离心上清液Benderetal.[65]没食子儿茶素没食子酸酯绿茶水溶性超纯水提取液Gaoetal.[66]脂质伴随物、多酚植物油脂溶性、水溶性甲醇提取液Liuetal.[28]槲皮素标准品低水溶性玉米醇溶蛋白/壳聚糖纳米颗粒Juanetal.[53]1.3.3细胞氧化应激防御氧化应激是指机体受到不良刺激后，大量高活性分子的产生打破了氧化系统和抗氧化系统之间的平衡，诱导机体发生氧化损伤。癌细胞具有在氧化应激条件下存活并维持细胞增殖的能力。通过电子转移和氧化还原状态变化描述氧化还原的反应普遍存在于生物体细胞中，以维持正常代谢产生能量[67]。细胞的抗氧化防御系统(非酶抗氧化剂和酶
【参考文献】：
期刊论文
[1]环境因素对叶黄素纳米乳液稳定性及其抗氧化活性的影响[J]. 李季楠,胡浩,吴雪娇,吴艳. 食品科学. 2019(19)
[2]化学精炼对稻米油谷维素和总酚含量及清除自由基能力的影响[J]. 张志艳,金俊,刘睿杰,常明,金青哲,王兴国. 中国油脂. 2018(10)
[3]不同极性抗氧化剂对油包水乳液氧化稳定性的影响[J]. 易建华,孙艺飞,朱振宝,董文宾,李静娟. 现代食品科技. 2015(12)
[4]纳米颗粒与细胞的交互作用[J]. 王九令,孙佳姝,施兴华. 科学通报. 2015(21)
[5]不同产地米糠油理化特性与组成分析研究[J]. 杨青坪,梁少华,杨瑞楠. 河南工业大学学报(自然科学版). 2015(03)
[6]α-生育酚在玉米油、大豆油和茶油中的抗氧化动力学研究[J]. 张建飞,朱雪梅,熊华,胡振瀛. 中国油脂. 2015(04)
[7]高效液相色谱法测定米糠油中谷维素含量[J]. 陈燕飞,金俊,郑苏卫,胡敏君,金青哲. 中国粮油学报. 2014(07)
[8]苦菊提取物对HepG2细胞的抗氧化作用及其机制研究[J]. 陈超杰,展丽娟,魏金锋,靳洪涛,秦海林,王爱平. 中国中药杂志. 2014(14)
[9]细胞对纳米材料的胞吞及其胞内定位相关机制的研究进展[J]. 罗伟东,王野,朱海英. 中国细胞生物学学报. 2013(12)
[10]椰子油的生理活性（Ⅲ）:抗氧化活性[J]. 段岢君,邓福明,赵松林,陈卫军. 热带农业科学. 2013(09)
博士论文
[1]植物乳杆菌抗氧化评价及抗氧化机制研究[D]. 赵吉春.江南大学 2018
硕士论文
[1]煎炸棕榈油中的极性组分对HepG2细胞的影响及其评价[D]. 程亚军.江南大学 2018
[2]尿嘧啶DNA糖苷酶2（UNG2）增强HepG2细胞抗氧化功能与机制[D]. 曹丽妍.第四军医大学 2017
[3]不同植物油微量成分与抗氧化能力的相关性研究[D]. 刘慧敏.江南大学 2015
[4]米糠油的制备及其抗氧化活性研究[D]. 姚梅桑.南京农业大学 2008
本文编号：3092568
【文章来源】：江南大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：67 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
具有抗氧化和促氧化活性的膳食植物化学物质的浓度效应曲线[19]
江南大学硕士学位论文4人肝癌细胞的摄取是主动生物过程，主要是在网格蛋白的介导下，经过液相和吸附两种内吞形式进入细胞器。内吞是细胞膜内陷成囊泡，将胞外的生物大分子等物质摄取到胞内的过程。如图1-2所示，其中，大胞饮作用可以内化微米尺寸的颗粒，受体介导的内吞作用是最有效的形式，即颗粒表面的配体蛋白与细胞膜表面的受体蛋白结合，最后细胞膜弯曲内陷将颗粒包裹。当颗粒与细胞接触时，表面吸附的蛋白或其他两亲性的分子会影响颗粒与细胞膜间的作用[56]。癌细胞的摄取与颗粒自身性质(表面材料、聚集状态和初始浓度)及细胞所处状态(孵育时间)等特性共同决定[57]。内化是一个依赖于培育温度的耗能过程：在37℃培育时，颗粒的吸附(细胞膜表面)和内化(进入细胞)同时发生，所以在37℃培育温度下，与细胞结合的颗粒的量大于低温时的，孵育时间达到lh时，大部分的颗粒都已位于次级内体和溶酶体中[58]。图1-2细胞的摄取方式[56]Fig.1-2Cellularuptakepattern1.3.2HepG2细胞抗氧化模型肝脏是脂类代谢的主要器官，HepG2细胞被认为是研究体外异生物质代谢和肝脏毒性的良好模型，因为它们保留了正常人肝细胞的多数功能。HepG2细胞具有肝甘油三酯脂肪酶和抗氧化酶，并且可以表达多种蛋白(酶)[59]，在鉴定抗氧化剂以保护细胞免受脂质过氧化和细胞毒性方面得到应用。产生氧化应激的化学物质可导致细胞中谷胱甘肽水平和谷氨酰半胱氨酸合成酶活性增加，研究显示HepG2细胞含有比Chang细胞高约4倍的过氧化氢酶活性，因此在抵抗氧化应激方面具有更强的能力[60]。HepG2细胞溶酶体内有包括蛋白酶、脂肪酶及磷酸酯酶等在内的许多水解酶，它们控制多种大分子物质的溶解或消化，是细胞内的消化器官。此外，HepG2细胞高度分化、性质稳定且便于传代培养，是目
CFH氧化成DCF，利用酶标仪检测DCF的荧光信号强度，与对照组比较，减少的荧光信号强度反映的即是该物质的抗氧化能力。如表1-1所示，目前，CAA模型已被成熟应用于对单一抗氧化活性物质或果蔬提取物的细胞抗氧化评价中[61,62]。本实验室也已经首次将该模型应用于评价植物油脂质伴随物的细胞抗氧化性[27,28]，然而由于油脂的水不溶性问题，并未将该模型应用于评价真实的全油脂体系。基于CAA模型在复杂递送体系包括纳米乳液中的应用[53]，为解决油水不溶性问题并构建适用于评价以乳液形式递送的植物油细胞抗氧化模型提供了思路。图1-3细胞抗氧化评价模型原理图示[61]Fig.1-3Principlediagramofcellularantioxidantactivityassaymodel表1-1基于CAA模型对活性成分细胞抗氧化的评价Tab.1-1EvaluationofcellularantioxidantactivityofactivecomponentsbasedonCAAmodel活性成分来源溶解性体系引文总酚燕麦水溶性甲醇重悬液Chenetal.[63]总酚蔬菜水溶性甲醇重悬液Weietal.[64]总酚蓝莓、覆盆子等水溶性果汁离心上清液Benderetal.[65]没食子儿茶素没食子酸酯绿茶水溶性超纯水提取液Gaoetal.[66]脂质伴随物、多酚植物油脂溶性、水溶性甲醇提取液Liuetal.[28]槲皮素标准品低水溶性玉米醇溶蛋白/壳聚糖纳米颗粒Juanetal.[53]1.3.3细胞氧化应激防御氧化应激是指机体受到不良刺激后，大量高活性分子的产生打破了氧化系统和抗氧化系统之间的平衡，诱导机体发生氧化损伤。癌细胞具有在氧化应激条件下存活并维持细胞增殖的能力。通过电子转移和氧化还原状态变化描述氧化还原的反应普遍存在于生物体细胞中，以维持正常代谢产生能量[67]。细胞的抗氧化防御系统(非酶抗氧化剂和酶
【参考文献】：
期刊论文
[1]环境因素对叶黄素纳米乳液稳定性及其抗氧化活性的影响[J]. 李季楠,胡浩,吴雪娇,吴艳. 食品科学. 2019(19)
[2]化学精炼对稻米油谷维素和总酚含量及清除自由基能力的影响[J]. 张志艳,金俊,刘睿杰,常明,金青哲,王兴国. 中国油脂. 2018(10)
[3]不同极性抗氧化剂对油包水乳液氧化稳定性的影响[J]. 易建华,孙艺飞,朱振宝,董文宾,李静娟. 现代食品科技. 2015(12)
[4]纳米颗粒与细胞的交互作用[J]. 王九令,孙佳姝,施兴华. 科学通报. 2015(21)
[5]不同产地米糠油理化特性与组成分析研究[J]. 杨青坪,梁少华,杨瑞楠. 河南工业大学学报(自然科学版). 2015(03)
[6]α-生育酚在玉米油、大豆油和茶油中的抗氧化动力学研究[J]. 张建飞,朱雪梅,熊华,胡振瀛. 中国油脂. 2015(04)
[7]高效液相色谱法测定米糠油中谷维素含量[J]. 陈燕飞,金俊,郑苏卫,胡敏君,金青哲. 中国粮油学报. 2014(07)
[8]苦菊提取物对HepG2细胞的抗氧化作用及其机制研究[J]. 陈超杰,展丽娟,魏金锋,靳洪涛,秦海林,王爱平. 中国中药杂志. 2014(14)
[9]细胞对纳米材料的胞吞及其胞内定位相关机制的研究进展[J]. 罗伟东,王野,朱海英. 中国细胞生物学学报. 2013(12)
[10]椰子油的生理活性（Ⅲ）:抗氧化活性[J]. 段岢君,邓福明,赵松林,陈卫军. 热带农业科学. 2013(09)
博士论文
[1]植物乳杆菌抗氧化评价及抗氧化机制研究[D]. 赵吉春.江南大学 2018
硕士论文
[1]煎炸棕榈油中的极性组分对HepG2细胞的影响及其评价[D]. 程亚军.江南大学 2018
[2]尿嘧啶DNA糖苷酶2（UNG2）增强HepG2细胞抗氧化功能与机制[D]. 曹丽妍.第四军医大学 2017
[3]不同植物油微量成分与抗氧化能力的相关性研究[D]. 刘慧敏.江南大学 2015
[4]米糠油的制备及其抗氧化活性研究[D]. 姚梅桑.南京农业大学 2008
本文编号：3092568
本文链接：https://www.wllwen.com/projectlw/hxgylw/3092568.html
最近更新
教材专著
