新型氧杂多环荧光染料的合成及其在蛋白染色中的应用

发布时间：2021-05-12 10:53

　　作为一种重要的翻译后修饰,蛋白质糖基化在微生物感染、细胞分化、肿瘤转移、细胞癌变等生命活动中起着重要作用。凝集素芯片作为近年来新问世的,用于检测糖蛋白的技术,由于其具有高通量,便捷,快速等优点,得到了广泛的关注。用于制作凝集素芯片的样品多采用荧光标记,后用消散场荧光激活检测技术进行信号检测。现今常用于荧光标记的染料多为菁染料,但其常存在合成路线复杂,成本居高不下,水溶性较差,以及随着甲川链增加而稳定性逐渐下降等问题。因此,摒除必须由菁染料标记糖蛋白的刻板印象,合成修饰得到新型的荧光染料,弥补其缺陷,具有重大的意义。本文选择修饰氧杂蒽结构,以得到具有标记蛋白能力的荧光染料为研究目的,设计,合成,并表征出两类共六种氧杂多环结构的荧光染料,对其性能及其应用进行研究。主要包括以下两部分:（1）合成了氧杂多环结构为主体的非刚性平面的两种新型荧光染料YD-1和YD-2,刚性平面的四种新型荧光染料YN-1,YN-2,YH-1,和YH-2以及修饰罗丹明B得到的新型荧光染料YB。通过HRMS（ESI）、1H NMR、13C NMR和IR对这七种新化合物的结构进行了表征;对除YB之外的其余六种染料的光谱性... 

【文章来源】：西北大学陕西省 211工程院校

【文章页数】：98 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
第一章 绪论
    1.1 前言
    1.2 荧光染料的发展及其结构的修饰
        1.2.1 荧光染料的发展
        1.2.2 氧杂蒽环荧光染料及其结构修饰
        1.2.3 菁类荧光染料及其结构修饰
        1.2.4 香豆素荧光染料及其结构修饰
        1.2.5 BODIPY荧光染料及其结构修饰
    1.3 生物荧光标识技术的发展
        1.3.1 生物荧光标识方法的分类
        1.3.2 荧光标识剂的种类
        1.3.3 生物荧光标识剂在蛋白质分析中的应用
    1.4 凝集素芯片在糖蛋白研究领域的应用
        1.4.1 糖蛋白的分类与作用
        1.4.2 研究糖蛋白的技术
        1.4.3 凝集素概述
        1.4.4 凝集素芯片及其发展前景
    1.5 本课题研究目的以及内容
第二章 氧杂多环荧光染料YD与罗丹明荧光染料YB的合成表征以及YD系列染料的光学性质与蛋白染色应用研究
    2.1 引言
        2.1.1 合成路线分析
        2.1.2 反应底物的筛选
    2.2 仪器与试剂
        2.2.1 仪器
        2.2.2 试剂
    2.3 荧光染料YB的合成与结构表征
    2.4 YD系列荧光染料的合成与结构表征
        2.4.1 中间体的合成
        2.4.2 荧光染料YD-1的合成及其结构表征
        2.4.3 荧光染料YD-2的合成及其结构表征
    2.5 YD系列荧光染料的光学性质
        2.5.1 荧光染料及pH缓冲溶液的配制
        2.5.2 荧光染料光谱性质的测定
        2.5.3 荧光量子产率的测定
        2.5.4 荧光染料YD-1的光学性质研究
        2.5.5 荧光染料YD-2的光学性质研究
        2.5.6 荧光染料YD系列光学性质的对比研究
    2.6 YD系列荧光染料在蛋白染色中的应用研究
        2.6.1 荧光染料YD系列蛋白染色实验及数据
        2.6.2 荧光染料YD系列与Cy3染色性能的对比
    2.7 本章小结
第三章 YN、YH系列氧杂多环荧光染料的合成、光学性质及蛋白染色应用研究
    3.1 引言
        3.1.1 反应底物的筛选
    3.2 仪器与试剂
    3.3 YNYH系列荧光染料的合成与结构表征
        3.3.1 中间体的合成
        3.3.2 荧光染料YN系列的合成及其结构表征
        3.3.3 荧光染料YH系列的合成及其结构表征
    3.4 YNYH系列荧光染料的光学性质
        3.4.1 荧光探针标准溶液的配制
        3.4.2 荧光染料光谱性质的测定
        3.4.3 荧光量子产率的测定
        3.4.4 荧光染料YN-1,YN-2的光学性质研究
        3.4.5 荧光染料YH-1,YH-2的光学性质的研究
        3.4.6 荧光染料YN系列的光学性质对比研究
        3.4.7 荧光染料YH系列的光学性质对比研究
    3.5 YNYH系列荧光染料在蛋白染色中的应用研究
        3.5.1 荧光染料YN系列蛋白染色实验及数据
        3.5.2 荧光染料YN系列与Cy3的对比
        3.5.3 荧光染料YH系列蛋白染色实验及数据
        3.5.4 荧光染料YH系列与Cy3的对比
    3.6 本章小结
参考文献
结论
致谢
攻读硕士学位期间取得的研究成果
附录


【参考文献】：
期刊论文
[1]近红外荧光探针及其在生物分析中的应用进展[J]. 傅妮娜,王红,张华山.  分析科学学报. 2008(02)
[2]双向凝胶电泳中三种蛋白质检测方法的比较[J]. 马增春,高月,吕俊萍,王升启.  中国生物化学与分子生物学报. 2004(04)
[3]用罗丹明B作标准物测定二氯荧光素的荧光量子产率[J]. 杨洗,潘祖亭,马勇.  分析科学学报. 2003(06)
[4]荧光标记染料[J]. 杨祥宇,宋健,冯荣秀.  化学通报. 2003(09)
[5]6-或7-（取代苯乙烯基）香豆素类化合物的合成及其抗癌活性的研究[J]. 徐嵩,徐世平,李兰敏.  药学学报. 2000(02)
[6]菁染料光稳定性研究进展[J]. 杨松杰,田禾.  感光科学与光化学. 1999(03)
[7]一种近红外花菁染料的合成及其应用于生物大分子的测定[J]. 郑洪,李东辉,陈秋影,许金钩.  应用化学. 1999(03)
[8]N-羟基琥珀酰亚胺-3-吲哚乙酸酯柱前衍生高效液相色谱分离及荧光测定肽及其水解物[J]. 刘勋,徐国良,张华山,程介克.  高等学校化学学报. 1997(06)



本文编号：3183281