蛹虫草CM-1菌株筛选及菌丝体发酵工艺研究

发布时间：2021-05-25 11:35

　　虫草具有很高的药用价值和经济价值,近年来,蛹虫草的人工培养生产已实现了产业化,但是蛹虫草菌株性状和产品质量参差不齐,在“健康中国”的战略背景下,越来越多的企业关注蛹虫草菌株的应用价值及其生产虫草素含量的工艺,故急需对蛹虫草菌株及其菌丝体培养工艺进行系统深入的研究。本试验以野生蛹虫草为供试材料,利用平板分离技术,分离虫草菌株;通过测定不同菌株子实体长势与干重及菌丝体干重与虫草素含量,筛选并获得高产菌株;采用单因素实验结合正交实验方法,测定菌丝体干重及虫草素含量变化,研究培养基中营养因子及物理条件变化对高产菌株生产能力的影响;利用反应器对实验室优化结果进行放大实验,并进一步优化工业化生产条件。1、平板分离出16株菌株,通过拮抗实验证明16个菌株具有不亲和性,进行菌株鉴定后。以子实体干重、培养周期以及子实体形态为指标进行初筛,以菌丝体生长速度、菌丝体干重和菌落大小为指标进行复筛。筛选出来优良菌株,命名为CM-1,经分子鉴定、连续20代菌丝体培养遗传稳定性考察,证明其为传代稳定的蛹虫草菌,且此菌株菌丝体培养不易受菌株代次影响,适用于工业化生产。2、以CM-1为出发菌株研究碳源、氮源、无机盐3个... 

【文章来源】：黑龙江八一农垦大学黑龙江省

【文章页数】：65 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
1 文献综述
    1.1 蛹虫草简介
    1.2 蛹虫草生产用菌株
    1.3 蛹虫草人工培养
    1.4 蛹虫草应用前景
    1.5 研究目的及意义
2 材料与方法
    2.1 试验材料
        2.1.1 供试材料
        2.1.2 药品和试剂
        2.1.3 仪器设备
    2.2 培养基
        2.2.1 培养基种类
        2.2.2 培养基配制与灭菌
    2.3 实验方法
        2.3.1 菌株筛选与鉴定
        2.3.2 菌丝体培养营养条件优化
        2.3.3 菌丝体培养物理条件优化
        2.3.4 20 L气升式反应器培养优化
        2.3.5 不同培养时间菌丝体生长代谢变化
    2.4 检测方法
        2.4.1 菌株检测
        2.4.2 理化指标检测
        2.4.3 虫草素含量检测
    2.5 数据处理
3 结果与分析
    3.1 菌株筛选及鉴定
        3.1.1 菌株分离
        3.1.2 不同菌株间拮抗能力检测
        3.1.3 菌株初筛
        3.1.4 菌株复筛
        3.1.5 菌株鉴定
        3.1.6 不同代次菌株对传代培养方法响应
    3.2 菌丝体培养营养条件优化
        3.2.2 不同氮源对蛹虫草菌丝体培养的影响
        3.2.3 不同无机盐对蛹虫草菌丝体培养的影响
        3.2.4 蛹虫草菌丝体培养基正交实验
        3.2.5 培养基优化前后蛹虫草CM-1 菌株生长及产虫草素情况
    3.3 菌丝体培养物理条件优化
        3.3.1 种子液保藏期对蛹虫草菌丝体培养的影响
        3.3.2 培养基初始pH对蛹虫草菌丝体培养的影响
        3.3.3 培养温度对蛹虫草菌丝体培养的影响
        3.3.4 培养基接种量对蛹虫草菌丝体培养的影响
        3.3.5 培养基装量对蛹虫草菌丝体培养的影响
        3.3.6 摇床转速对蛹虫草菌丝体培养的影响
        3.3.7 最适培养物理条件优化
    3.4 20 L气升式反应器培养优化
        3.4.1 罐压对蛹虫草菌丝体培养的影响
        3.4.2 通气量对蛹虫草菌丝体培养的影响
        3.4.3 消泡剂对蛹虫草菌丝体培养的影响
        3.4.4 20 L反应器扩大培养验证试验
        3.4.5 食品级原料对生产的影响
    3.5 不同培养时间菌丝体生长代谢变化
        3.5.1 不同培养时间生长量变化
        3.5.2 不同培养时间虫草素变化
        3.5.3 不同培养时间糖含量变化
        3.5.4 不同培养时间pH值变化
4 讨论
    4.1 蛹虫草菌株筛选与分离
    4.2 影响蛹虫草菌丝体生长及虫草素形成因素探讨
    4.3 蛹虫草菌丝体培养的生长变化
    4.4 降低蛹虫草菌丝体培养生产成本
5 结论
附录
参考文献
致谢
个人简历


【参考文献】：
期刊论文
[1]蛹虫草的化学成分及药理作用[J]. 吕金朋,张晔,姚梦杰,张辉,孙佳明.  吉林中医药. 2018(03)
[2]食用菌菌种退化机制及预防措施的最新研究进展[J]. 李亚娇,孙国琴,郭九峰,王海燕,庞杰.  黑龙江农业科学. 2018(02)
[3]蛹虫草固体培养产子实体条件的优化及其虫草素含量测定[J]. 刁朝强,文庭池,廖勇,康冀川,周建云,谢红艳.  山地农业生物学报. 2017(06)
[4]不同培养介质对蛹虫草子实体生长及产量的影响[J]. 马麦艳,马琴,陈方圆,焦子伟.  现代农业科技. 2017(23)
[5]虫草素的中枢神经系统作用及毒性研究进展[J]. 顾欣霞,葛晓群.  国际药学研究杂志. 2017(09)
[6]辽宁蛹虫草产业的研究进展[J]. 肖千明.  新农业. 2017(18)
[7]蝙蝠蛾拟青霉及蛹虫草与野生冬虫夏草活性比较[J]. 姜雪,王春月,李兰洲,王雪,滕利荣,周毓麟.  长春中医药大学学报. 2017(04)
[8]蛹虫草小分子功能肽制备及抗衰活性评价[J]. 李若溪,王园园,薛芳馨,岳可心,文怀振,郝博,王杉,王升厚.  河南农业. 2017(05)
[9]蛹虫草抗氧化肽的发酵制备及对小鼠辐射氧化损伤的防护作用[J]. 杨淑芳,张春杨,钱琨,孙继红,张德军,李晶涛.  蚕业科学. 2017(03)
[10]北虫草人工栽培关键技术集成[J]. 许庆国.  食用菌. 2017(03)

硕士论文
[1]蛹虫草生长营养特性及胞外酶活性的研究[D]. 宋好倩.河南科技学院 2017
[2]蛹虫草生长发育条件研究[D]. 杜军国.陕西科技大学 2013
[3]蛹虫草液体发酵高产虫草素工艺研究[D]. 方婷婷.合肥工业大学 2012
[4]虫草素液态深层发酵与纯化的研究[D]. 陈涛.江南大学 2012
[5]虫草素降低HepG2细胞内甘油三酯的机制探讨[D]. 申大伟.延边大学 2008



本文编号：3205268