禾草内生真菌抑菌抗虫活性和发酵条件的研究

发布时间：2021-05-27 11:58

　　微生物农药具有化学农药不可替代的作用,其资源丰富,但是已被开发利用的资源种类少,难以满足农药产业发展的需求。稳定互惠共生的禾草内生真菌共生体产生的次生代谢物不仅可显著提高宿主禾草生物与非生物胁迫的抗性,而且可导致草食家畜中毒。因此,具有开发为微生物农药的潜力。本研究以Epichlo?禾草内生真菌菌株为试验材料,通过摇瓶发酵获得发酵液,对多年生黑麦草（Lolium perenne）种子进行浸种,测定生物碱含量,筛选抑菌抗虫活性菌株,并采用正交法优化菌株发酵条件,旨在提高菌株活性物质的代谢产率,以期为菌株生物碱的规模化生产和研发为新型微生物农药菌剂奠定基础。获得的主要研究结果如下:1.通过纸上发芽法（TP）测定4株分离自醉马草（Achnatherum inebrians）、中华羊茅（Festuca sinensis）、野大麦（Hordeum brevisubulatum）和披碱草（Elymus dahuricus）的Epichlo?内生真菌菌株Epichlo?gansuensis,E.sinensis,E.bromicola（Hb）,E.bromicola（Ed）发酵液浸种下多年生黑麦草种... 

【文章来源】：兰州大学甘肃省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：79 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
前言
第一章 文献综述
    1.1 禾草内生真菌
        1.1.1 内生真菌对禾草的抗旱性
        1.1.2 内生真菌对禾草的抗病性
        1.1.3 内生真菌对禾草的抗虫性
    1.2 禾草内生真菌作为生防因子
    1.3 内生真菌发酵
第二章 禾草内生真菌发酵液浸种对黑麦草种子霉变和萌发的影响
    2.1 试验材料
    2.2 试验方法
        2.2.1 发酵液的制备
        2.2.2 种子处理
        2.2.3 聚乙二醇(PEG-6000)胁迫液配制
        2.2.4 发芽的基本条件
    2.3 数据处理方法
    2.4 结果与分析
        2.4.1 禾草内生真菌发酵液浸种对干旱胁迫下种子霉变的影响
        2.4.2 禾草内生真菌发酵液浸种对干旱胁迫下种子萌发的影响
        2.4.3 禾草内生真菌发酵液浸种对干旱胁迫下胚芽含水量的影响
        2.4.4 禾草内生真菌发酵液浸种对干旱胁迫下胚芽长和胚根长的影响
    2.5 讨论
第三章 禾草内生真菌抑菌活性菌株的筛选
    3.1 实验材料
        3.1.1 菌株
        3.1.2 培养基
    3.2 试验方法
        3.2.1 发酵液的制备
        3.2.2 病原真菌对峙试验
        3.2.3 病原真菌孢子萌发试验
    3.3 生物碱的体外检测
        3.3.1 麦角碱的提取和检测
        3.3.2 震颤素的提取和检测
        3.3.3 波胺的提取和检测
    3.4 数据处理方法
    3.5 结果与分析
        3.5.1 8 株禾草内生真菌发酵液生物碱的含量
        3.5.2 8 株禾草内生真菌发酵液对供试病原真菌菌落影响
        3.5.3 8 株禾草内生真菌发酵液对供试病原真菌孢子萌发的影响
    3.6 讨论
第四章 禾草内生真菌抗虫活性菌株的筛选
    4.1 实验材料
        4.1.1 菌株
        4.1.2 禾草
        4.1.3 害虫
        4.1.4 培养基
    4.2 试验方法
        4.2.1 发酵液制备
        4.2.2 内生真菌抗虫活性的测定
    4.3 数据处理
    4.4 结果分析
    4.5 讨论
第五章 禾草内生真菌发酵条件的优化
    5.1 材料
        5.1.1 菌株
        5.1.2 培养基
    5.2 方法
        5.2.1 种子发酵液的制备
        5.2.2 菌丝体生物量的测定
        5.2.3 生物碱的体外检测
    5.3 单因素发酵筛选
        5.3.1 初始值
        5.3.2 装液量
        5.3.3 接种量
        5.3.4 接种时间
        5.3.5 摇床转速
        5.3.6 发酵温度
    5.4 正交实验设计
    5.5 数据分析
    5.6 结果分析
        5.6.1 pH对 JZ和 PA菌株生物碱含量和菌丝体生物量的影响
        5.6.2 装液量对JZ和 PA菌株生物碱含量和菌丝体生物量的影响
        5.6.3 接种量对JZ和 PA菌株生物碱含量和菌丝体生物量的影响
        5.6.4 接种时间对JZ和 PA菌株生物碱含量和菌丝体生物量的影响
        5.6.5 转速对JZ和 PA菌株生物碱含量和菌丝体生物量的影响
        5.6.6 温度对JZ和 PA菌株生物碱含量和菌丝体生物量的影响
    5.7 正交实验设计发酵优化
        5.7.1 正交实验设计
        5.7.2 显著性分析
        5.7.3 最优组合
        5.7.4 优化结果验证
    5.8 讨论
第六章 结论
    6.1 主要结论
    6.2 创新点
    6.3 研究展望
参考文献
在学期间的研究成果
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]红豆杉内生真菌产紫杉醇的发酵条件优化研究[J]. 张欢,赵赟鑫,李昭莹,田露,邓百万.  江苏农业科学. 2018(21)
[2]内生菌发酵工艺的研究进展[J]. 史毅,陈文彬,张博文,郑红梅,柴华文,叶耀辉.  江西中医药. 2018(09)
[3]生物农药的发展现状与趋势分析[J]. 张震.  农业开发与装备. 2018(07)
[4]基于Web of Sciences数据库的我国禾草内生真菌学研究论文计量分析[J]. 师茜,田沛,南志标.  草业学报. 2018(07)
[5]一株野生艾草产红色素内生真菌发酵条件的研究[J]. 郑青波,廖月姣,王福彬,马海宜,柳玉瑛,何亚涛,刘俊林.  西北民族大学学报(自然科学版). 2018(02)
[6]内生真菌发酵液浸种对干旱胁迫下黑麦草种子萌发的影响[J]. 刘静,周景乐,陈振江,魏学凯,李涛,李春杰.  草业科学. 2018(04)
[7]低温处理下外源水杨酸和脱落酸与内生真菌互作对醉马草共生体的影响[J]. 刘静,陈振江,李秀璋,周景乐,柳莉,李春杰.  草业学报. 2018(01)
[8]光照强度和光周期对醉马草内生真菌共生体幼苗生长和生物碱积累的影响[J]. 刘静,万志文,陈振江,李秀璋,曹莹,李春杰.  西北植物学报. 2017(11)
[9]产红色素真菌Monascus sanguineus的液态发酵条件研究[J]. 何亚涛,刘俊林,郑青波,柳玉瑛,罗琨映,高丹丹.  天然产物研究与开发. 2018(03)
[10]不同pH砖红壤浸提液和内生真菌对黑麦草幼苗生长生理的影响[J]. 陈振江,刘静,魏学凯,田沛,曹莹,周景乐,李春杰.  西北植物学报. 2017(07)

博士论文
[1]多杀菌素高产菌株的选育及发酵过程多参数、多尺度优化[D]. 郭伟群.中国农业大学 2016
[2]银杏内生真菌的分离鉴定及代谢产物抑菌活性研究[D]. 柏钰.安徽农业大学 2015
[3]海洋中稻瘟病拮抗菌的分离、发酵优化及其活性成分分析[D]. 靳西彪.四川农业大学 2012
[4]多年生黑麦草、内生真菌与数种植物病原真菌的互作[D]. 田沛.兰州大学 2009

硕士论文
[1]半夏内生菌的分离及其内生真菌对宿主生长影响的研究[D]. 王维.西北农林科技大学 2010
[2]内生真菌对醉马草抗虫性影响的研究[D]. 张兴旭.兰州大学 2008
[3]内生真菌对醉马草抗旱性影响的研究[D]. 李飞.兰州大学 2007
[4]Neotyphodium gansuense离体麦角碱的检测和N.lolii麦角碱基因的测序[D]. 高嘉卉.兰州大学 2006
[5]长线孢拟茎点等六株东北红豆杉内生真菌及其代谢产物的研究[D]. 刘君.沈阳药科大学 2004



本文编号：3207523