菜籽油中酚酸的定量分析及其对HepG2肝细胞脂毒性损伤的抑制研究

发布时间：2021-07-27 23:10

　　菜籽油是世界上主要的消费食用植物油之一,与其他植物油相比,水酶法菜籽油（Enzyme-Assisted-Aqueous Extracted Rapeseed Oil,EAO）中酚类化合物,尤其是酚酸类物质的含量很高,且具有明显的抗氧化活性。虽然已经有研究从药理学角度报道了菜籽及其产品中多酚类物质的抗炎、抗氧化、抗肿瘤和抗凋亡等功效,但与黄酮等酚类物质相比,菜籽油中有关酚酸活性的研究仍相对较少较晚。大量研究表明一些酚酸能明显改善肝脏脂毒性,但作为食用油中重要的膳食多酚来源,菜籽油中的酚酸类物质对肝脏脂毒性的影响尚未见报道。因此,本文通过超高效液相色谱-串联四级杆质谱（Ultra Performance Liquid Chromatography-tandem Quadrupole Mass Spectrometry,UPLC-MS/MS）方法对菜籽油的酚酸进行定量鉴定;在建立油酸诱导HepG2脂性凋亡模型的基础上,探讨菜籽油中酚酸类物质对HepG2脂性凋亡的调控作用,以期为其生物活性的研究提供理论依据。（1）对水酶法菜籽油中的酚类物质进行提取,利用Folin-Ciocalteu比色法对其... 

【文章来源】：江南大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：68 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
中英文缩写词对照表
1 绪论
    1.1 菜籽油酚酸研究简介
        1.1.1 酚酸的结构与分类
        1.1.2 菜籽油产量及其中的酚酸种类
        1.1.3 菜籽油酚酸的存在形式及含量
        1.1.4 菜籽酚酸的测定方法
        1.1.5 菜籽油酚酸的生理功能
    1.2 氧化应激与线粒体脂毒性凋亡的概述
    1.3 多酚对肝脏脂毒性的抑制概述
    1.4 立题依据及意义
    1.5 主要研究内容
2 材料与方法
    2.1 实验材料与仪器
        2.1.1 主要材料
        2.1.2 实验仪器与设备
    2.2 实验方法
        2.2.1 水酶法菜籽油的制备
        2.2.2 水酶法菜籽油中菜籽酚酸的提取
        2.2.3 水酶法菜籽油酚酸含量的测定
        2.2.4 UPLC-MS/MS MRM模式对水酶法菜籽油中菜籽酚酸的鉴定和定量
        2.2.5 水酶法菜籽油中菜籽酚酸的体外抗氧化能力测定
        2.2.6 细胞培养
        2.2.7 CCK-8细胞增殖实验
        2.2.8 LDH细胞毒性实验
        2.2.9 油红O细胞脂质染色
        2.2.10 细胞蛋白含量的测定
        2.2.11 细胞中甘油三酯含量的测定
        2.2.12 细胞内氧化应激水平的测定
        2.2.13 细胞内活性氧ROS的测定
        2.2.14 细胞周期测定
        2.2.15 Hoechst33342染色
        2.2.16 Annexin-V/PI细胞凋亡率检测
        2.2.17 基因相对表达量测定
    2.3 数据处理与分析
3 结果与讨论
    3.1 水酶法菜籽油中总酚含量测定及酚酸的定量检测
        3.1.1 水酶法菜籽油总酚含量的测定
        3.1.2 水酶法菜籽油中酚酸的定量鉴定
    3.2 主要酚酸标准品的DPPH自由基清除能力测定
    3.3 油酸诱导HepG2肝细胞脂毒性凋亡模型的建立
        3.3.1 油酸对HepG2细胞活力的影响
        3.3.2 油酸对HepG2细胞LDH毒性的影响
        3.3.3 油酸对HepG2细胞内脂质沉积的影响
        3.3.4 油酸对HepG2细胞氧化应激损伤的影响
        3.3.5 油酸对HepG2细胞周期的影响
        3.3.6 油酸对HepG2细胞凋亡的影响
    3.4 两种酚酸对油酸诱导的HepG2细胞脂毒性凋亡的作用研究
        3.4.1 两种酚酸对HepG2细胞毒性的影响
        3.4.2 两种酚酸对油酸诱导的HepG2细胞毒性的影响
        3.4.3 两种酚酸对OA诱导的HepG2细胞内脂质代谢的影响
        3.4.4 两种酚酸对OA诱导的HepG2细胞氧化应激损伤的影响
        3.4.5 两种酚酸对OA诱导的HepG2细胞周期的影响
        3.4.6 两种酚酸对OA诱导的HepG2细胞凋亡的影响
主要结论与展望
    主要结论
    展望
致谢
参考文献
附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文


【参考文献】：
期刊论文
[1]芥子酸拮抗同型半胱氨酸诱导的血管内皮细胞凋亡及焦亡[J]. 裴星,韩勇,丘红,樊一钢,耿杰,田红燕.  山西医科大学学报. 2017(11)
[2]制油工艺对菜籽油微量成分和氧化稳定性的影响[J]. 张亮,李世刚,曹培让,蒋将,李进伟,刘元法.  中国油脂. 2017(02)
[3]超高效液相色谱法检测菜籽油中的酚酸[J]. 郑畅,杨湄,黄凤洪,周琦,曹晓玮.  食品科学. 2013(20)
[4]橘皮中酚酸的研究进展[J]. 朱豪,梁彬霞,赵文红,钱敏,白卫东.  中国食品添加剂. 2012(02)
[5]菜籽多酚抑菌作用研究[J]. 严奉伟,郝晶晶.  食品工业. 2011(02)
[6]两种细胞系用于建立体外脂肪肝模型的比较[J]. 潘雪丰,温彩霞,许建华.  广东药学院学报. 2010(01)
[7]阿魏酸体外抗氧化作用研究[J]. 赵文红,邓泽元,范亚苇,李静,阮征.  食品科学. 2010(01)
[8]大黄素、小檗碱对胰岛素抵抗HepG2细胞的影响[J]. 尹春梅,王慧莲,王琦.  中药药理与临床. 2009(02)
[9]菜籽多酚对S180小鼠肉瘤及其免疫功能的影响[J]. 严奉伟,王辰,严赞开,吴谋成.  中国粮油学报. 2007(05)
[10]菜籽多酚在四氧嘧啶致糖尿病小鼠体内的降血糖作用[J]. 严奉伟,严赞开,王辰,吴谋成.  食品科技. 2006(12)

博士论文
[1]尼罗罗非鱼过氧化物体增殖激活受体（PPARα）激活及其降脂机制研究[D]. 宁丽军.华东师范大学 2016

硕士论文
[1]紫苏籽油及原花青素的提取工艺研究[D]. 夏瑶瑶.中北大学 2017
[2]三羟异黄酮对脂质代谢调控的研究[D]. 韦唯.合肥工业大学 2017
[3]茶叶籽油酚类化合物鉴定分析及存在形态研究[D]. 卢鹤.华侨大学 2016
[4]不同加工工艺的菜籽油品质及其生物学评价[D]. 张亮.江南大学 2016
[5]紫苏籽油的提取工艺及理化特性研究[D]. 许万乐.中北大学 2014
[6]油菜籽中多酚类化合物及其分布的研究[D]. 吴梨.南京财经大学 2011



本文编号：3306725