Candida ethanolica SN-2胞外多糖分离纯化、结构解析及生物活性研究
发布时间：2021-08-02 09:04
酵母菌胞外多糖（Yeast extracellular polysaccharide,YEPS）由于其分离提取不受地域和季节等特殊条件的限制,同时还具有多种潜在应用价值,近些年来被人们广泛应用于医药、食品及化妆品等行业。基于本实验室前期的研究表明东北自然发酵豆酱中存在大量的酵母菌,尤其是在豆酱发酵的中后期阶段。于是,研究从东北地区采集自然发酵豆酱样品68份,从中分离出139株疑似酵母菌种,并筛选出1株高产胞外多糖的酵母菌株SN-2,随后利用凝胶渗透色谱法对其纯组分的分子量进行了测定,利用紫外全波长扫描、高效液相色谱法、甲基化分析、红外光谱分析、核磁共振分析及扫描电镜对其纯组分的结构进行了初步解析,通过热重分析法对其纯组分的热稳定性进行了分析,同时,通过MTT法、倒置显微镜观察法以及对自由基的清除率等对其潜在生物学活性进行了分析,旨在为该多糖的进一步研究和应用奠定基础。试验结果如下:1.从东三省12个地区采集68份自然发酵豆酱样品,分离出139株疑似酵母菌株,筛选得到一株高产YEPS酵母菌Candida ethanolica SN-2。为了提高YEPS产量,对其发酵工艺进行了优化。经优化...
【文章来源】：沈阳农业大学辽宁省
【文章页数】：69 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
技术路线图
沈阳农业大学硕士学位论文21第三章结果与分析3.1豆酱中产胞外多糖酵母菌的分离筛选与菌种鉴定3.1.1酵母菌分离纯化从采自12个地区的68份东北自然发酵豆酱样品中分离出139株疑似酵母菌株，其编号及来源如表3-1所示。表3-1菌株编号Tab.3-1Strainsnumber菌株来源样品采集地点样品数量（份）数量（株）菌株编号东北自然发酵豆酱齐齐哈尔（QQHE）辽阳（LY）朝阳（SN）阜新（FX）丹东（DD）长春（CC）佳木斯（JMS）沈阳（SY）本溪（BX）康平（KP）通化（TH）大庆（DQ）45578358963511121512149131413979QQHE-1—QQHE-11LY-1—LY-12SN-1—SN-15FX-1—FX-12DD-1—DD-14CC-1—CC-9JMS-1—JMS-13SY-1—SY-14BX-1—BX-13KP-1—KP-9TH-1—TH-7DQ-1—DQ-93.1.2绘制标准曲线利用苯酚-硫酸法（Nehaletal，2019）对多糖产量进行测定，标准曲线如图3-1。图3-1标准曲线Fig.3-1Standardcurve
第三章结果与分析22回归方程为：0.0208+11.339x=y（3-1）式中：y为多糖溶液在490nm处的吸光值；x为多糖溶液的浓度。3.1.3产胞外多糖菌株的筛选对发酵液的黏度和糖度进行综合分析后，从分离得到的139株疑似酵母菌株中初筛出10株产胞外多糖的酵母菌株，分别为：丹东（DD）样品中的2株，长春（CC）样品中的1株，朝阳（SN）样品中的3株，阜新（FX）样品中的1株，康平（KP）样品中的1株和沈阳（SY）样品中的2株。经过苯酚-硫酸法的复筛，来自朝阳地区的自然发酵豆酱中的菌株SN-2胞外多糖产量最高，因此将该菌株作为复筛入选菌株进行后续试验。结果见表3-2。表3-2产胞外多糖菌株产糖量比较Tab.3-2ComparingofYEPS-producingyeasts菌株编号胞外多糖产量（mg/mL）菌株编号胞外多糖产量（mg/mL）DD-6DD-11CC-9SN-2SN-60.295±0.0020.497±0.0020.267±0.0030.639±0.0020.362±0.004SN-14FX-9KP-6SY-8SY-130.489±0.0020.507±0.0010.346±0.0030.421±0.0040.237±0.0023.1.4菌株传代产糖稳定性试验经过12次传代产糖培养，结果如图3-2所示，菌株的产糖能力较为稳定，无菌种退化现象出现，产糖性状符合试验要求，可进行下一步的菌种鉴定及优化培养。图3-2SN-2菌株传代培养的产糖曲线Fig.3-2ThecurveofYEPSproductionfromSN-2strainduringthecontinuousfermentation
【参考文献】：
期刊论文
[1]Isolation, Purification, and Characterization of Exopolysaccharide Produced by Leuconostoc Citreum N21 from Dried Milk Cake[J]. Yanfang Yang,Fang Feng,Qingqing Zhou,Fangkun Zhao,Renpeng Du,Zhijiang Zhou,Ye Han. Transactions of Tianjin University. 2019(02)
本文编号：3317287
【文章来源】：沈阳农业大学辽宁省
【文章页数】：69 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
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沈阳农业大学硕士学位论文21第三章结果与分析3.1豆酱中产胞外多糖酵母菌的分离筛选与菌种鉴定3.1.1酵母菌分离纯化从采自12个地区的68份东北自然发酵豆酱样品中分离出139株疑似酵母菌株，其编号及来源如表3-1所示。表3-1菌株编号Tab.3-1Strainsnumber菌株来源样品采集地点样品数量（份）数量（株）菌株编号东北自然发酵豆酱齐齐哈尔（QQHE）辽阳（LY）朝阳（SN）阜新（FX）丹东（DD）长春（CC）佳木斯（JMS）沈阳（SY）本溪（BX）康平（KP）通化（TH）大庆（DQ）45578358963511121512149131413979QQHE-1—QQHE-11LY-1—LY-12SN-1—SN-15FX-1—FX-12DD-1—DD-14CC-1—CC-9JMS-1—JMS-13SY-1—SY-14BX-1—BX-13KP-1—KP-9TH-1—TH-7DQ-1—DQ-93.1.2绘制标准曲线利用苯酚-硫酸法（Nehaletal，2019）对多糖产量进行测定，标准曲线如图3-1。图3-1标准曲线Fig.3-1Standardcurve
第三章结果与分析22回归方程为：0.0208+11.339x=y（3-1）式中：y为多糖溶液在490nm处的吸光值；x为多糖溶液的浓度。3.1.3产胞外多糖菌株的筛选对发酵液的黏度和糖度进行综合分析后，从分离得到的139株疑似酵母菌株中初筛出10株产胞外多糖的酵母菌株，分别为：丹东（DD）样品中的2株，长春（CC）样品中的1株，朝阳（SN）样品中的3株，阜新（FX）样品中的1株，康平（KP）样品中的1株和沈阳（SY）样品中的2株。经过苯酚-硫酸法的复筛，来自朝阳地区的自然发酵豆酱中的菌株SN-2胞外多糖产量最高，因此将该菌株作为复筛入选菌株进行后续试验。结果见表3-2。表3-2产胞外多糖菌株产糖量比较Tab.3-2ComparingofYEPS-producingyeasts菌株编号胞外多糖产量（mg/mL）菌株编号胞外多糖产量（mg/mL）DD-6DD-11CC-9SN-2SN-60.295±0.0020.497±0.0020.267±0.0030.639±0.0020.362±0.004SN-14FX-9KP-6SY-8SY-130.489±0.0020.507±0.0010.346±0.0030.421±0.0040.237±0.0023.1.4菌株传代产糖稳定性试验经过12次传代产糖培养，结果如图3-2所示，菌株的产糖能力较为稳定，无菌种退化现象出现，产糖性状符合试验要求，可进行下一步的菌种鉴定及优化培养。图3-2SN-2菌株传代培养的产糖曲线Fig.3-2ThecurveofYEPSproductionfromSN-2strainduringthecontinuousfermentation
【参考文献】：
期刊论文
[1]Isolation, Purification, and Characterization of Exopolysaccharide Produced by Leuconostoc Citreum N21 from Dried Milk Cake[J]. Yanfang Yang,Fang Feng,Qingqing Zhou,Fangkun Zhao,Renpeng Du,Zhijiang Zhou,Ye Han. Transactions of Tianjin University. 2019(02)
本文编号：3317287
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