植物乳杆菌对酿酒酵母乙醇耐受性的调控及青海地区一株微生物的分类学研究

发布时间：2021-10-10 06:11

　　工业上使用酿酒酵母生产乙醇的过程中发生染菌是不可避免的,其主要污染菌株为乳酸菌。乳酸菌会与酵母竞争生存空间、营养物质等,对乙醇的生产造成不利的影响。前期的工作已经表明植物乳杆菌可调控酿酒酵母乙醇耐受性,但其具体调控机制尚不清楚。本论文的工作旨在阐明植物乳杆菌对酵母乙醇耐受性的具体调控机制。在本论文中,首先采用基于气相色谱质谱联用的代谢组学技术,系统分析了植物乳杆菌共存对酿酒酵母细胞内代谢物组成及含量的影响,结果表明,植物乳杆菌对酵母的糖类物质、氨基酸、脂肪酸以及TCA循环中的重要物质如苹果酸,柠檬酸和琥珀酸等有影响,因此植物乳杆菌可能对酵母的中心代谢有影响。其次采用补加碳源的方式也表明了植物乳杆菌会调控酿酒酵母的糖代谢降低。此外,采用流式细胞仪测定了植物乳杆菌上清液对酵母乙醇耐受性的影响以及不同距离下植物乳杆菌对酿酒酵母乙醇耐受性的影响,结果表明,植物乳杆菌能调控酿酒酵母的乙醇耐受性且是有利于酵母应对乙醇胁迫,随着酿酒酵母与植物乳杆菌之间距离的增加,酿酒酵母乙醇耐受性变差。从青海羌塘地区分离的菌株QTA689T来自冻土区地下沉积物,为革兰氏阴性菌,好氧生长,为黄色、无运动性、无芽孢细菌... 

【文章来源】：北京化工大学北京市 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：97 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图２－３纯培养酿酒酵母与混合培养酿酒酵母代谢物的ＶＩＰ?

，每瓶１００?ｍＬ，其中一瓶标记为活化，向另外一瓶中加入２?ｇ琼脂粉，使用封口??膜密封好后放入高压灭菌锅中１１５?°Ｃ灭菌２０?ｍｉｎ，待冷却后备用。具体的装置图如图??２－１所示。??０．４５ｐｍ?有?０．４５?ｐｍ?有?０．４５?ｐｍ?有??＾?＿滤膜?＾誦滤膜卜?—＿麵?Ｓ??翁？、?？?？?？??鲁參鲁鲁？?＝＾＝?＿?？參??鲁?春?Ｗ?零?Ｘｉｒ?ｗ?＾?？?擊??＾?Ｊ?Ｖ?．？?Ｖ?Ｊ??■■■＜??１?２?３?４??图２－１距离装置示意图??Ｆｉｇ．?２－１?Ｓｃｈｅｍａｔｉｃ?ｄｉａｇｒａｍ?ｏｆ?ｄｉｓｔａｎｃｅ?ｄｅｖｉｃｅ??（２）活化菌种：从－８０?°Ｃ冰箱中取出保存好的酵母Ｓ２８８Ｃ和植物乳杆菌，将己经??灭好菌的活化培养基与菌种放置于超净台中，点燃酒精灯在无菌条件下将菌液加入培??养基，将酿酒酵母放入３０?°Ｃ恒温培养箱中１５０?ｒｐｍ条件下培养１２个小时，植物乳杆??菌放入３７?°Ｃ恒温培养箱中静置培养１２小时。??（３）菌种接种量的确定以及接种培养：待酵母培养至１２?ｈ后，从培养瓶中取出??菌液并用无菌水稀释，使用光学显微镜计数位于血球计数板上的菌液中的细胞数量。??在血球计数板上选取不同的５个位置分别记录酵母的数量，根据菌体量计算公式计算??出需要接种的酵母数量：??Ｉ?Ｔｔ＊Ｔ?ＹｔＩｔ?Ｂ１?＋?Ｂ２?＋?Ｂ３?＋?Ｂ４?＋?Ｂ５?＿?，?？??ｌｍｌ?菌体量＝???ｘ２５ｘｌ〇４ｘＣ??Ｂ：血球计数板中选定的视野中的酵母细胞数??Ｃ：酵母的稀释倍数??植物乳杆菌待培养至１２小时后取出１?ｍＬ菌液，使用无菌水进行梯度

?北京化工大学硕士学位论文???９５－，?７〇－??０．５?ｈ?２ｈ??Ｉ９０－?ｒ?ｉ??？?８５－?＞?６〇－??｜?｜?：：??的?８０－?奶?５５－?？??７５－＾?｜?ｉ?５０?ｉ?ｉ??Ｓ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ?Ｓ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ＋Ｌ．ｐｌａｎｔａｒｕｍ?Ｓ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ?Ｓ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ＋Ｌ．ｐｌａｎｌａｒｕｍ??图３－２糖浓度变化过程中植物乳杆菌对酵母的乙醇耐受调控??Ｆｉｇ．?３－２?Ｔｈｅ?ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ?ｏｆ?Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ?ｐｌａｎｔａｒｕｍ?ｔｏ?ｅｔｈａｎｏｌ?ｔｏｌｅｒａｎｃｅ?ｏｆ?ｙｅａｓｔ?ｄｕｒｉｎｇ?ｃｈａｎｇｅｓ?ｉｎ?ｓｕｇａｒ??ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ??３．４．２植物乳杆菌上清液对酿酒酵母乙醇耐受性的影响??在本节实验中，将单独培养的植物乳杆菌的上清液置换到单独培养的酵母体系内，??使用流式细胞仪测定上清液置换后的酵母乙醇耐受性。??２０１ｉｌ２２＾Ｓ１?ｓｅｎ?２ｄ１９１２２３－Ｓ２?Ｄ０１?广．，．…??＊２１?：＂＂＂＇?＇２－ｊ?￣１??Ｎ?２?ｑｉ－２?Ｎ?Ｑ１￣２??ｓ?…＂７１＂）?＂．?；Ｔ？ｒ…＂ｍ＇??ｆｌＴｃ＊Ａ?．吨?ＦＩＴＣ－Ａ?２?ＦＩＴＣ．Ａ??２Ｄ１９１２２３－Ｌ１?丨—２Ｐ｜９１．２２３－Ｌ；??＾＾４＾—ｉ??＾??１．－??ｉｆ?Ｗ?＾２?＊２?＊５?ｏ?｜?？?３?ＦＴＴｆｒａ＾?ｉ?ｉ?＊?ｉ?ｒ＞?｜?ｐｉｉｗｍ?：；?３?ｔＷ＾?ｉ?１１?Ｉ?Ｉ?ｔｉａｎｊ?ｉ??冰＂ｗ?Ｕ＊?ｗ３?＃??２

【参考文献】：
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硕士论文
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本文编号：3427812