梨果仙人掌和葫芦巴的提取工艺及其提取物对酒精性脑损伤预防作用机制的探究
发布时间：2021-10-15 11:40
目的:慢性酒精中毒是全球公共卫生问题之一,长期酗酒是诱导许多慢性疾病的原因[1]。酒精诱导肝脏损伤的机制及其药物的研究已较成熟,而酒精对大脑损伤机制的研究较少。酒精对机体细胞的损害主要通过诱导细胞氧化应激,调节体内各种酶的活性来实现。过量长期饮酒会导致机体脑细胞中SOD（超氧化物岐化酶）、GSH（还原谷胱甘肽酶）活性的改变并进一步导致细胞氧化应激损害中枢神经。梨果仙人掌和葫芦巴药用历史悠久,有良好的抗氧化作用和调节脑内神经递质含量的作用,本研究致力于探究梨果仙人掌多糖、葫芦巴黄酮对慢性酒精性脑损伤的预防作用。方法:1.提取工艺的研究:利用响应曲面优化的方法研究乙醇提取浓度、料液比、微波提取功率对梨果仙人掌多糖提取率的影响及料液比、提取次数、提取时间对葫芦巴黄酮提取率的影响。2.建立慢性酒精性脑损伤的动物实验模型:用试剂盒测定小鼠体内酒精代谢的各种酶的活性,包括小鼠血液中的AST（谷草转氨酶）、ALT（谷丙转氨酶）和小鼠脑细胞中SOD、GSH、MDA（丙二醛）、AchE（乙酰胆碱酯酶）的活性。进一步测定5-HT（5-羟色胺）、NE（去甲肾上腺素）、DA（多巴胺）等脑...
【文章来源】：西华大学四川省
【文章页数】：69 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
梨果仙人掌多糖提取工艺及其提取物对慢性酒精性脑损伤预防作用机制研究路线图
西华大学硕士学位论文7图1.2葫芦巴提取工艺及其对提取物慢性酒精性脑损伤预防作用机制研究路线图Figure1.2ResearchroadmapofCucurbitaextracttechnologyanditspreventivemechanismonchronicalcoholicbraininjuryofextract
西华大学硕士学位论文9溶于Tris-盐酸缓冲液中备用，取样品液1.5ml用DEAE-cellnlose-52柱进行层析，用PH7.2的Tris-盐酸进行洗脱，洗脱速度为0.3ml/min，再用2ml的EP管收集，得精制多糖。（2）含量测定[51]①对照品溶液的制备：精密称取经105℃干燥至恒重的无水葡萄糖25ml，置250ml容量瓶中，加适量水溶解，稀释至刻度，摇匀，使得每1ml中含无水葡萄糖0.1mg。②5%苯酚溶液的配制：用天平称取5g苯酚装入烧杯，再称取95g水倒入装有苯酚的烧杯中，将烧杯放入60℃恒温水浴锅中加热至苯酚与水互溶，然后将所得溶液倒入试剂瓶密封并贴上相应标签置冰箱冷藏待用。③标准曲线的制备：精密量取对照品溶液0.0ml，0.2ml，0.4ml，0.6ml，0.8ml，1.0ml，分别加入空置的具塞试管中，再加水至2.0ml。各再加入5%苯酚溶液1ml，摇匀，迅速加入浓硫酸5ml，以相应的试剂为空白对照，在490nm波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。得回归线方程为A=0.88C+0.1808（R2=0.998其中A为吸光度值C为葡萄糖标准品浓度）④多糖含量的计算总多糖含量=%100103WEVC其中C为待测样品液浓度(mg/ml)；V为待测样品体积(ml)；W为样品质量(g)；E为稀释倍数(3)梨果仙人掌多糖提取的单因素实验1乙醇浓度的影响分别称取等量的梨果仙人掌果肉10g，以浓度为40%、50%、60%、70%、80%乙醇为提取液，料液比为1：8浸泡后在480w的微波功率下，参照2.1.2（1）所示方法进行提龋计算提取率，并计算提取结果如下图：图2.1乙醇浓度对多糖提取的影响Figure2.1Theeffectofethanolconcentrationonpolysaccharideextraction（（2.1）
【参考文献】：
期刊论文
[1]双黄连口服液对3型鼠肝炎病毒致急性肝衰竭模型C57BL/6J裸小鼠的保护作用机制研究[J]. 王元元,邓卫平,李晓强. 现代中西医结合杂志. 2020(09)
[2]酒精性肝损伤伴脑损伤中西医研究进展[J]. 胡晓阳,郭钟秀,李立恒. 辽宁中医药大学学报. 2020(02)
[3]五味子酯甲体外抗氧化作用及对大鼠脑组织抗氧化指标的影响[J]. 李欣,刘聪,李宁,蒋维海,孙微,孙靖辉,王春梅,李贺,陈建光,敬舒. 北华大学学报(自然科学版). 2020(01)
[4]金钗石斛总黄酮提取工艺优化及抗氧化活性[J]. 高华山,陈明辉,齐光,张科,佟伟霜. 江苏农业科学. 2019(24)
[5]多花黄精中总黄酮提取工艺优化及可视化分析[J]. 刘清华,高汉云,陈桂芬,华碧春,王英豪. 中国中医药信息杂志. 2019(08)
[6]包葛颗粒剂对小鼠醒酒防醉及急性酒精性肝损伤保护作用的研究[J]. 吴洁,田亚丽,伍宏宇,张?之. 新疆医科大学学报. 2019(07)
[7]枳椇饮对急性酒精中毒小鼠醒酒作用的实验研究[J]. 叶勇,李俊贤,吴英,万春平,汪子君,赵淳. 中国中医急症. 2019(06)
[8]川芎挥发油防治脂多糖致小鼠血管认知障碍的作用机制研究[J]. 周雪,李小清,刘琪,熊静悦,向菊芳,曹方引,赵科,唐大轩,谭正怀. 中草药. 2019(10)
[9]葛花枳椇子配伍使用对急性酒精中毒小鼠醉酒症状行为学及脑纹状体和海马神经递质的影响[J]. 刘阳,赵珊珊,樊硕,李怡文. 世界中医药. 2018(05)
[10]慢性酒精中毒脑损伤的研究进展[J]. 康传依,胡建. 医学综述. 2017(24)
硕士论文
[1]仙人掌多糖的提取、抗氧化性及微胶囊化研究[D]. 袁清霞.湖南农业大学 2013
[2]葫芦巴总皂苷联合双胍类/磺脲类药物治疗继发性失效2型糖尿病的临床研究[D]. 肖璟.湖北中医学院 2008
本文编号：3437956
【文章来源】：西华大学四川省
【文章页数】：69 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
梨果仙人掌多糖提取工艺及其提取物对慢性酒精性脑损伤预防作用机制研究路线图
西华大学硕士学位论文7图1.2葫芦巴提取工艺及其对提取物慢性酒精性脑损伤预防作用机制研究路线图Figure1.2ResearchroadmapofCucurbitaextracttechnologyanditspreventivemechanismonchronicalcoholicbraininjuryofextract
西华大学硕士学位论文9溶于Tris-盐酸缓冲液中备用，取样品液1.5ml用DEAE-cellnlose-52柱进行层析，用PH7.2的Tris-盐酸进行洗脱，洗脱速度为0.3ml/min，再用2ml的EP管收集，得精制多糖。（2）含量测定[51]①对照品溶液的制备：精密称取经105℃干燥至恒重的无水葡萄糖25ml，置250ml容量瓶中，加适量水溶解，稀释至刻度，摇匀，使得每1ml中含无水葡萄糖0.1mg。②5%苯酚溶液的配制：用天平称取5g苯酚装入烧杯，再称取95g水倒入装有苯酚的烧杯中，将烧杯放入60℃恒温水浴锅中加热至苯酚与水互溶，然后将所得溶液倒入试剂瓶密封并贴上相应标签置冰箱冷藏待用。③标准曲线的制备：精密量取对照品溶液0.0ml，0.2ml，0.4ml，0.6ml，0.8ml，1.0ml，分别加入空置的具塞试管中，再加水至2.0ml。各再加入5%苯酚溶液1ml，摇匀，迅速加入浓硫酸5ml，以相应的试剂为空白对照，在490nm波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。得回归线方程为A=0.88C+0.1808（R2=0.998其中A为吸光度值C为葡萄糖标准品浓度）④多糖含量的计算总多糖含量=%100103WEVC其中C为待测样品液浓度(mg/ml)；V为待测样品体积(ml)；W为样品质量(g)；E为稀释倍数(3)梨果仙人掌多糖提取的单因素实验1乙醇浓度的影响分别称取等量的梨果仙人掌果肉10g，以浓度为40%、50%、60%、70%、80%乙醇为提取液，料液比为1：8浸泡后在480w的微波功率下，参照2.1.2（1）所示方法进行提龋计算提取率，并计算提取结果如下图：图2.1乙醇浓度对多糖提取的影响Figure2.1Theeffectofethanolconcentrationonpolysaccharideextraction（（2.1）
【参考文献】：
期刊论文
[1]双黄连口服液对3型鼠肝炎病毒致急性肝衰竭模型C57BL/6J裸小鼠的保护作用机制研究[J]. 王元元,邓卫平,李晓强. 现代中西医结合杂志. 2020(09)
[2]酒精性肝损伤伴脑损伤中西医研究进展[J]. 胡晓阳,郭钟秀,李立恒. 辽宁中医药大学学报. 2020(02)
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[5]多花黄精中总黄酮提取工艺优化及可视化分析[J]. 刘清华,高汉云,陈桂芬,华碧春,王英豪. 中国中医药信息杂志. 2019(08)
[6]包葛颗粒剂对小鼠醒酒防醉及急性酒精性肝损伤保护作用的研究[J]. 吴洁,田亚丽,伍宏宇,张?之. 新疆医科大学学报. 2019(07)
[7]枳椇饮对急性酒精中毒小鼠醒酒作用的实验研究[J]. 叶勇,李俊贤,吴英,万春平,汪子君,赵淳. 中国中医急症. 2019(06)
[8]川芎挥发油防治脂多糖致小鼠血管认知障碍的作用机制研究[J]. 周雪,李小清,刘琪,熊静悦,向菊芳,曹方引,赵科,唐大轩,谭正怀. 中草药. 2019(10)
[9]葛花枳椇子配伍使用对急性酒精中毒小鼠醉酒症状行为学及脑纹状体和海马神经递质的影响[J]. 刘阳,赵珊珊,樊硕,李怡文. 世界中医药. 2018(05)
[10]慢性酒精中毒脑损伤的研究进展[J]. 康传依,胡建. 医学综述. 2017(24)
硕士论文
[1]仙人掌多糖的提取、抗氧化性及微胶囊化研究[D]. 袁清霞.湖南农业大学 2013
[2]葫芦巴总皂苷联合双胍类/磺脲类药物治疗继发性失效2型糖尿病的临床研究[D]. 肖璟.湖北中医学院 2008
本文编号：3437956
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