抗结核菌药物耐药数据库的构建及其体外活性评价

发布时间：2021-11-04 22:28

　　结核病是由结核分枝杆菌引起的传染病,和艾滋病、疟疾并列为危害人类健康的三大传染病。结核病流行趋势日益严峻的原因之一是耐药结核病的诞生。耐药结核病的早期诊断和治疗是控制耐药现象的关键途径。系统了解抗生素的耐药产生机制,了解各类型突变在耐药性产生中的比重,对改进分子诊断,指导医生改善治疗方案具有重要意义。同时,系统的包含不同耐药水平和耐药机制的菌株组合在药物筛选及药效评价各阶段都必不可少。本研究主要归纳了一线抗结核药物中的异烟肼和链霉素的耐药作用基因及靶点,整理了耐药位点的分布及频率,建立了一个较完整的抗结核药物的耐药位点数据库,一套系统的包含不同耐药水平和耐药机制的菌株组合已初步形成,并对106种化合物进行了抗结核菌活性评价。环丝氨酸是一种有效的C组抗结核药。其体外药敏试验的可靠性和可重复性无法保证,对临床疗效的预测价值不佳。但在实际应用中,环丝氨酸的体外药敏试验可以用于粗略估计分枝杆菌的耐药性,因此有必要阐明环丝氨酸体外药敏试验中存在的问题及解决的办法。本研究使用Alamar Blue法测定了在37℃下环丝氨酸溶液系列孵育1至29天后的有效性,并通过UPLC-MS分析培养基中的环丝氨酸... 

【文章来源】：北京化工大学北京市 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：134 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
学位论文数据集
摘要
ABSTRACT
第一章 绪论
    1.1 结核流行现状
    1.2 结核分枝杆菌概述
    1.3 耐药结核分枝杆菌
        1.3.1 利福平耐药机制
        1.3.2 异烟肼耐药机制
        1.3.3 链霉素耐药机制
        1.3.4 乙胺丁醇耐药机制
    1.4 耐药结核分枝杆菌的检测和治疗
    1.5 环丝氨酸
    1.6 本论文主要研究的意义及内容
        1.6.1 本论文研究的意义
        1.6.2 本论文研究的内容
第二章 一线抗结核菌药物耐药位点数据库
    2.1 引言
    2.2 材料和方法
        2.2.1 数据检索
        2.2.2 文献选择标准
        2.2.3 数据提取
        2.2.4 测序位点范围
        2.2.5 突变频率的计算
    2.3 实验结果及讨论
        2.3.1 异烟肼突变频率
        2.3.2 链霉素突变频率
        2.3.3 菌库耐药位点
    2.4 本章小结
第三章 一线抗结核菌药物体外评价体系的构建
    3.1 引言
    3.2 实验材料
        3.2.1 菌株来源
        3.2.2 实验试剂
        3.2.3 主要溶液配制
        3.2.4 主要仪器设备
    3.3 实验方法
        3.3.1 改良罗氏培养基制备
        3.3.2 单克隆培养
        3.3.3 DNA模板制备
        3.3.4 PCR扩增和测序
        3.3.5 药物敏感性测试
    3.4 实验结果及讨论
        3.4.1 菌库构建——异烟肼
        3.4.2 菌库构建——链霉素
    3.5 本章小结
第四章 新药筛选
    4.1 引言
    4.2 实验材料
        4.2.1 菌株来源
        4.2.2 实验试剂
        4.2.3 主要溶液配制
        4.2.4 主要仪器设备
    4.3 实验方法
        4.3.1 改良罗氏培养基制备
        4.3.2 单克隆培养
        4.3.3 药物敏感性测试
    4.4 实验结果及讨论
        4.4.1 药物筛选
        4.4.2 药物评价
    4.5 本章小结
第五章 环丝氨酸在药敏实验中降解性的研究
    5.1 引言
    5.2 实验材料
        5.2.1 菌株来源
        5.2.2 实验试剂
        5.2.3 主要溶液配制
        5.2.4 主要仪器设备
    5.3 实验方法
        5.3.1 环丝氨酸溶液制备
        5.3.2 药物敏感性测试
        5.3.3 超高效液相色谱和液相色谱-质谱联用
    5.4 实验结果及讨论
        5.4.1 MIC随药敏时间变化
        5.4.2 环丝氨酸的定量和定性分析
    5.5 本章小结
第六章 结论与展望
    6.1 结论
    6.2 展望
参考文献
致谢
附录
攻读硕士学位期间所发表的论文
作者简介
导师简介
北京化工大学专业学位硕士研究生学位论文答辩委员会决议书



本文编号：3476524