合成型酵母染色体重排快速提升脱氧紫色杆菌素前体产量

发布时间：2021-11-11 15:01

　　基因和蛋白质水平上的变异是细胞表型多样性的基础,细胞表型多样性是菌株进化的标志。基因组重排可以引起基因水平上的多种变异,主要包括基因拷贝数变异（CNV）和基因组结构变异（SV）。本研究利用合成型酿酒酵母基因组重排技术（SCRaMbLE）快速实现单倍体细胞的表型持续进化,在基因组重排条件优化的基础上建立了完整的研究流程,使重排尺度和规模提升到染色体水平。紫色杆菌素（violacein）是在革兰氏阴性菌中发现的天然非水溶性的蓝黑色色素,是典型的天然L-色氨酸衍生物,脱氧紫色杆菌素前体为浅绿色是该物质合成路径中的关键中间体。本研究构建了脱氧紫色杆菌素前体（prodeoxyviolacein）的生产路径（vioA,vioB,vioE）,并将其分别整合至含有线形或环形合成型V号酵母染色体中,随后在该两种菌株中,同时建立具备精确控制元件的Cre/LoxPsym基因组重排系统,初步确定了首轮重排中重排时间与致死率及优势表型出现率的关系,并成功实施多轮迭代重排,获得了脱氧紫色杆菌素前体产量持续提升的优势菌株,在含有线形或环形合成型V号染色体酵母单倍体菌株中,经过5轮基因组迭代重排,分别将该次级代谢产物... 

【文章来源】：天津大学天津市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：85 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

人工基因组重排技术Figure1-1Theartificialgenomerearrangementtechnology

和功能的匹配关联层面。图 1-2 展示了本研究中涉及的合成型 V 号染色体的设计合成图，图成型 V 号染色体的环化设计。野生型酵母 V 号染色体全长 576,8酵母 V 号染色体全长 536,024 bp，将整条染色体精简了约 40,850过程中发生单碱基随机突变的位点进行了顺序修复，最终获得一型 V 号染色体。基因型的重新构建并未影响合成型 V 号菌株的生表明在不同的培养基中，与野生菌株具有相同的生长状态。染色体些发育异常疾病的原因，可用作相关疾病的模型。染色体环化过程 1kb 的端粒区域，并引入了 Leu2 营养缺陷型标记进行正确转化子明，成环后的合成型 V 号染色体菌株长状态上与线形合成型 V 染一致，但在酵母生孢拆孢过程中，发现较低的生孢率和较高的孢建出的双环形合成型 V 号的酵母二倍体比单倍体更为严重，文章数分裂异常有关[55]。

合成型 V 号染色体菌株长状态上与线形合母生孢拆孢过程中，发现较低的生孢率和较合成型 V 号的酵母二倍体比单倍体更为严关[55]。图 1-2 合成型 V 号染色体的设计合成igure1-2 SynV was designed in silico from native wt

【参考文献】：
期刊论文
[1]低能氮离子注入和紫外线复合诱变选育高产酿酒酵母[J]. 虞龙,姚驰亚,吴晓菲,李玉燕,张娣,虞沐尧.  辐射研究与辐射工艺学报. 2017(02)
[2]亚硝基胍-60C复合诱变筛选多黏菌素E高产菌株[J]. 陈勇德,刘军,徐新星,楼丽君,陈守文.  中国抗生素杂志. 2013(01)



本文编号：3489066