新疆野苹果病害防治专用木霉可湿性粉剂剂型制备及药效检测
发布时间：2021-12-16 17:14
新疆野苹果（Malus sieversii）是分布在伊犁地区的新疆野果林的主要建群种,是世界罕见的苹果天然基因宝库也是重要的种质基因库,然而,近半个世纪以来,野苹果林因病害枯死率高达80%。木霉菌（Trichoderma）是一种应用前景广阔的植物病害生物防治菌,1932年,Weindling发现木霉菌具有对病原菌拮抗作用,自那时起国际上已经有100余种以木霉为主要成分的商品制剂,广泛应用于防治农业林业植物病害。其中主要被推广的剂型有可湿性粉剂,颗粒剂和微胶囊剂等等。本研究首先探究出了一种以稻草,麦麸为主的菌袋形式的大量有效生产木霉孢子粉的哈茨木霉T2菌株固态发酵工艺,然后以该工艺生产出的哈茨木霉分生孢子粉为孢子原粉,对哈茨木霉可湿性粉剂加工工艺进行了初步探究,并对最终研发出的剂型对由链格孢茵（Alternaria alternata）引起的新疆野苹果叶枯病进行了药效检测。通过对哈茨木霉T2菌株分生孢子粉菌袋形式固态发酵工艺的优化,最终筛选出配比为57%稻草,40%麦麸,1%黄豆粉,1%玉米面,1%NH4N03和75%含水量,每袋装入200g的发酵料配方。接种孢子悬浮液后28℃培养8 d...
【文章来源】：东北林业大学黑龙江省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：76 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２－１聚丙烯菌袋及其透气盖子??Ｆｉｇ．?２－１?Ｐｏｌｙｐｒｏｐｙｌｅｎｅ?ｂａｇ?ａｎｄ?ｉｔｓ?ａｉｒ－ｐｅｒｍｅａｂｌｅ?ｃａｐ??
２．３．１．１发酵料中稻草麦麸配比优化??生长５?ｄ后，稻草麦麸比为５７：４０和６２：３５的发酵料发酵得到的哈茨木霉孢子含量??最多，稀释后的孢子悬浮液的吸光值为分别为０．３４８与０．２９６，二者相差不大（图２－??２）。生长８?ｄ后，稻草麦麸比为５７：４０发酵得到的哈茨木霉孢子含量最多，稀释后的孢??子悬浮液的吸光值为０．９８。而稻草比为４７：５０和稻草麦麸比为６７：３０发酵得到的哈茨木??霉孢子含量最少，其吸光值分别为０．４２２和０．４３２?（图２－２）。在发酵进行到第８ｄ的时??候，可以看出此时发酵料中的稻草麦麸比例对发酵最终得到的哈茨木霉孢子含量影响非??常大，稻草含量过低，不能提供给哈茨木霉菌足够的附着空间以供其生长，麦麸含量过??低，则营养不足。最终，稻草麦麸含量最优比例采用５７：４０，在提供给木霉菌足够营养??的同时又能够保证其充足的生长空间。??发酵５天后??ＩＭＳ发酵８天后??ａ??１．０－?工??ａ?｜??ｒｆ］??０．８－?ａｂ??ｏ??ＣＤ??Ｑ?０．６－??〇??鹋?ｂ?ｂ??＾?０．４－?ｒ＊￣］?ａ??ｒ＊－?ａ??０．２－?ｂ?．??．?ｒ—?ｂ??〇．〇?——Ｕ——Ｕ——Ｕ——Ｕ——ｕ??４７：?５０?５２：?４５?５７：?４０?６２：?３５?６７：?３０??不同稻草麦麸配比梯度??
?３００??每袋所装发酵料质量（ｇ）??图２－５每袋不同质量的发酵料发酵哈茨木霉菌孢子浓度??Ｆｉｇ．?２－５?Ｓｐｏｒｅ?ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ?ｐｒｏｄｕｃｅｄ?ｂｙ?Ｔ．?ｈａｒｚｉａｎｕｍ?Ｔ２?ｃｕｌｔｕｒｅｄ?ｉｎ?ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ?ｗｉｔｈ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｗｅｉｇｈｔ??２．３．２哈茨木霉Ｔ２固态发酵孢子粉收获??菌袋形式的发酵料接种后于２８°Ｃ条件下培养（图２－６）。发酵进行到５?ｄ时，菌袋??中大部分发酵料己被绿色的哈茨木霉Ｔ２的分生孢子覆盖（图２－７），此时还未发酵完??全。菌袋形式的发酵料发酵８?ｄ左右已经发酵完全（图２－８），此时为防治发酵过熟木霉??菌丝发生自融应立即打开菌袋自然干燥３－５?ｄ，利用振动筛分机筛选干燥发酵料中的哈??茨木霉分生孢子，再过２００目筛得到满足制备可湿性粉剂的细度的哈茨木霉分生孢子粉??（图?２－９）。??图２－６接种后２８Ｔ培养中的发酵料??Ｆｉｇ．?２－６?Ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ?ｃｕｌｔｕｒｅｄ?ｉｎ?２８°Ｃ?ａｆｔｅｒ?ｉｎｏｃｕｌａｔｉｏｎ??－１４?－??
【参考文献】：
期刊论文
[1]响应面法对绿色木霉产纤维素酶固态发酵条件优化[J]. 刘华,李崇高,黄建初. 安徽农业大学学报. 2017(06)
[2]两株哈茨木霉菌株防治水稻纹枯病及促进水稻生长的潜力研究[J]. 李松鹏,崔琳琳,程家森,陈桃,付艳苹,谢甲涛. 植物病理学报. 2018(01)
[3]木霉厚垣孢子可湿性粉剂的研制[J]. 张晶晶,黄亚丽,马宏,贾振华,刘昆昂,史延茂. 植物保护. 2016(05)
[4]黑龙江省水稻发展现状及其可持续发展性[J]. 徐德海. 中国种业. 2016(09)
[5]新疆野苹果（Malus sieversii）受苹小吉丁虫危害程度与树皮厚度、径阶的关系[J]. 梅闯,闫鹏,艾沙江·买买提,马凯,韩立群,许正,钟海霞,刁永强,王继勋. 中国农业科技导报. 2016(04)
[6]海南金雨丰-施倍健“哈茨木霉·厚垣孢子”市场启动会[J]. 周邱林. 营销界(农资与市场). 2015(22)
[7]棘孢木霉可湿性粉剂研制及杀菌活性测定[J]. 孙丽丽,曹传旺,薛绪亭,王志英,杜春艳. 北京林业大学学报. 2015(06)
[8]木霉现有种类名录[J]. 张广志,杨合同,张新建,扈进冬,郭凯,黄玉杰,李纪顺. 菌物学报. 2014(06)
[9]木霉属研究概况[J]. 朱兆香,庄文颖. 菌物学报. 2014(06)
[10]新疆天山西部野苹果林分布与苹果小吉丁虫危害现状研究[J]. 刘忠权,陈卫民,许正,梁巧玲. 北方园艺. 2014(17)
博士论文
[1]哈茨木霉多菌灵抗性菌株的构建及其对水稻立枯病的防治[D]. 李敏.哈尔滨工业大学 2008
硕士论文
[1]哈茨木霉菌多菌灵抗性选育与β-微管蛋白突变位点研究[D]. 于春生.黑龙江八一农垦大学 2015
[2]生防菌哈茨木霉FJAT-9040固体发酵工艺的研究[D]. 曾庆才.福州大学 2014
[3]植病生防菌哈茨木霉（Trichoderma harzianum）的研究[D]. 张衡宇.福建农林大学 2011
[4]木霉厚垣孢子的液体发酵及其可湿性粉剂研制[D]. 李锋.四川农业大学 2010
[5]5亿活孢子/克木霉菌水分散粒剂的研制[D]. 张敏.西南大学 2008
[6]哈茨木霉H-13固体发酵工艺及其应用效果的研究[D]. 王永东.安徽农业大学 2007
本文编号：3538515
【文章来源】：东北林业大学黑龙江省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：76 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２－１聚丙烯菌袋及其透气盖子??Ｆｉｇ．?２－１?Ｐｏｌｙｐｒｏｐｙｌｅｎｅ?ｂａｇ?ａｎｄ?ｉｔｓ?ａｉｒ－ｐｅｒｍｅａｂｌｅ?ｃａｐ??
２．３．１．１发酵料中稻草麦麸配比优化??生长５?ｄ后，稻草麦麸比为５７：４０和６２：３５的发酵料发酵得到的哈茨木霉孢子含量??最多，稀释后的孢子悬浮液的吸光值为分别为０．３４８与０．２９６，二者相差不大（图２－??２）。生长８?ｄ后，稻草麦麸比为５７：４０发酵得到的哈茨木霉孢子含量最多，稀释后的孢??子悬浮液的吸光值为０．９８。而稻草比为４７：５０和稻草麦麸比为６７：３０发酵得到的哈茨木??霉孢子含量最少，其吸光值分别为０．４２２和０．４３２?（图２－２）。在发酵进行到第８ｄ的时??候，可以看出此时发酵料中的稻草麦麸比例对发酵最终得到的哈茨木霉孢子含量影响非??常大，稻草含量过低，不能提供给哈茨木霉菌足够的附着空间以供其生长，麦麸含量过??低，则营养不足。最终，稻草麦麸含量最优比例采用５７：４０，在提供给木霉菌足够营养??的同时又能够保证其充足的生长空间。??发酵５天后??ＩＭＳ发酵８天后??ａ??１．０－?工??ａ?｜??ｒｆ］??０．８－?ａｂ??ｏ??ＣＤ??Ｑ?０．６－??〇??鹋?ｂ?ｂ??＾?０．４－?ｒ＊￣］?ａ??ｒ＊－?ａ??０．２－?ｂ?．??．?ｒ—?ｂ??〇．〇?——Ｕ——Ｕ——Ｕ——Ｕ——ｕ??４７：?５０?５２：?４５?５７：?４０?６２：?３５?６７：?３０??不同稻草麦麸配比梯度??
?３００??每袋所装发酵料质量（ｇ）??图２－５每袋不同质量的发酵料发酵哈茨木霉菌孢子浓度??Ｆｉｇ．?２－５?Ｓｐｏｒｅ?ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ?ｐｒｏｄｕｃｅｄ?ｂｙ?Ｔ．?ｈａｒｚｉａｎｕｍ?Ｔ２?ｃｕｌｔｕｒｅｄ?ｉｎ?ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ?ｗｉｔｈ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｗｅｉｇｈｔ??２．３．２哈茨木霉Ｔ２固态发酵孢子粉收获??菌袋形式的发酵料接种后于２８°Ｃ条件下培养（图２－６）。发酵进行到５?ｄ时，菌袋??中大部分发酵料己被绿色的哈茨木霉Ｔ２的分生孢子覆盖（图２－７），此时还未发酵完??全。菌袋形式的发酵料发酵８?ｄ左右已经发酵完全（图２－８），此时为防治发酵过熟木霉??菌丝发生自融应立即打开菌袋自然干燥３－５?ｄ，利用振动筛分机筛选干燥发酵料中的哈??茨木霉分生孢子，再过２００目筛得到满足制备可湿性粉剂的细度的哈茨木霉分生孢子粉??（图?２－９）。??图２－６接种后２８Ｔ培养中的发酵料??Ｆｉｇ．?２－６?Ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ?ｃｕｌｔｕｒｅｄ?ｉｎ?２８°Ｃ?ａｆｔｅｒ?ｉｎｏｃｕｌａｔｉｏｎ??－１４?－??
【参考文献】：
期刊论文
[1]响应面法对绿色木霉产纤维素酶固态发酵条件优化[J]. 刘华,李崇高,黄建初. 安徽农业大学学报. 2017(06)
[2]两株哈茨木霉菌株防治水稻纹枯病及促进水稻生长的潜力研究[J]. 李松鹏,崔琳琳,程家森,陈桃,付艳苹,谢甲涛. 植物病理学报. 2018(01)
[3]木霉厚垣孢子可湿性粉剂的研制[J]. 张晶晶,黄亚丽,马宏,贾振华,刘昆昂,史延茂. 植物保护. 2016(05)
[4]黑龙江省水稻发展现状及其可持续发展性[J]. 徐德海. 中国种业. 2016(09)
[5]新疆野苹果（Malus sieversii）受苹小吉丁虫危害程度与树皮厚度、径阶的关系[J]. 梅闯,闫鹏,艾沙江·买买提,马凯,韩立群,许正,钟海霞,刁永强,王继勋. 中国农业科技导报. 2016(04)
[6]海南金雨丰-施倍健“哈茨木霉·厚垣孢子”市场启动会[J]. 周邱林. 营销界(农资与市场). 2015(22)
[7]棘孢木霉可湿性粉剂研制及杀菌活性测定[J]. 孙丽丽,曹传旺,薛绪亭,王志英,杜春艳. 北京林业大学学报. 2015(06)
[8]木霉现有种类名录[J]. 张广志,杨合同,张新建,扈进冬,郭凯,黄玉杰,李纪顺. 菌物学报. 2014(06)
[9]木霉属研究概况[J]. 朱兆香,庄文颖. 菌物学报. 2014(06)
[10]新疆天山西部野苹果林分布与苹果小吉丁虫危害现状研究[J]. 刘忠权,陈卫民,许正,梁巧玲. 北方园艺. 2014(17)
博士论文
[1]哈茨木霉多菌灵抗性菌株的构建及其对水稻立枯病的防治[D]. 李敏.哈尔滨工业大学 2008
硕士论文
[1]哈茨木霉菌多菌灵抗性选育与β-微管蛋白突变位点研究[D]. 于春生.黑龙江八一农垦大学 2015
[2]生防菌哈茨木霉FJAT-9040固体发酵工艺的研究[D]. 曾庆才.福州大学 2014
[3]植病生防菌哈茨木霉（Trichoderma harzianum）的研究[D]. 张衡宇.福建农林大学 2011
[4]木霉厚垣孢子的液体发酵及其可湿性粉剂研制[D]. 李锋.四川农业大学 2010
[5]5亿活孢子/克木霉菌水分散粒剂的研制[D]. 张敏.西南大学 2008
[6]哈茨木霉H-13固体发酵工艺及其应用效果的研究[D]. 王永东.安徽农业大学 2007
本文编号：3538515
本文链接：https://www.wllwen.com/projectlw/hxgylw/3538515.html
