C-藻蓝蛋白光学特性与生物活性的稳定性研究

发布时间：2021-12-31 02:42

　　C-藻蓝蛋白作为一种卟啉类色素蛋白是螺旋藻中重要的功能活性成分,在天然色素、天然药物、生化试剂等领域具有广阔应用前景。但其在存储环境中易发生褪色稳定性降低,鲜有报道C-藻蓝蛋白在发生褪色失稳时其他功能活性有何变化。本文探究了不同环境因素对钝顶螺旋藻C-藻蓝蛋白光学特性及生物活性的影响,全面评价其稳定性,为其应用条件及基础研究的深入作参考。主要研究结果如下:环境因素p H、温度、光照及蛋白质干扰剂,均对C-藻蓝蛋白光学特性有显著影响。p H10、温度（≥70℃）、盐酸胍（≥1 mol/L）、乙醇（≥50%,V/V）以及SDS（≥1%,W/V）等条件下,C-藻蓝蛋白色素保留率、荧光强度均下降超过40%,发生严重褪色。光照强度及时间的增加可使C-藻蓝蛋白光学特性指标下降且红、蓝波段光源对其影响最大。研究表明在p H6-7、温度4-30℃、黑暗避光条件下C-藻蓝蛋白光学特性指标变化均小于15.12%,能保持相对稳定范围。由第二章实验基础、于褪色因素下评价C-藻蓝蛋白对DPPH及ABTS自由基清除能力。随温度上升C-藻蓝蛋白对两种自由基清除能力均呈先上升后下降,且其抗氧化活性与色泽（色素保留率、... 

【文章来源】：广西大学广西壮族自治区 211工程院校

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【部分图文】：

藻胆体的结构[3]

β链型球蛋白通过硫醚键与藻蓝胆素共价连接，α链通过第84位半胱氨酸与一个藻蓝胆素结合，β链分别在第84位和155位与两个藻蓝胆素连接，两条链均具有α螺旋结构[17]。所有不同来源的藻蓝蛋白的结构均是相似的，它们的α及β亚基构成单体并形成三聚体（α3β3）或六聚体（α6β6）形式，聚集体是C-藻蓝蛋白的功能形式[18]。其亚基的分子量取决于藻类的来源以及提取和纯化的方法[3]。α亚基一般为13-20.5kDa，β亚基为11-24.4kDa。三维结构分析中可知，三聚体结构呈圆盘状，直径为11nm，厚度为3nm，中心腔直径为3.5nm[19]。图1-2C-藻蓝蛋白分子结构示意图[3]Fig.1-2SchematicdiagramofC-phycocyaninmolecularstructure

广西大学硕士学位论文C-藻蓝蛋白光学特性与生物活性的稳定性研究13收波长285nm和277nm处对光辐射有吸收。根据相关研究峰360nm处为其四吡咯结构吸收部位，可见光区620nm附近为C-藻蓝蛋白的特征吸收峰，发色团部分共轭体系在该处具有强烈的光吸收，从而使其表现出鲜亮的蔚蓝色，故峰620nm附近可反映其发色团结构的破坏程度及其色素保留程度。图2-1C-藻蓝蛋白样品的吸收光谱Fig.2-1TheUV-visibleabsorptionspectrumofC-phycocyanin2.4.2.2C-藻蓝蛋白荧光光谱特征C-藻蓝蛋白由于其特殊的发色基团结构，自身具有荧光性质，在620nm左右波长激发下，在635~650nm之间会出现强的荧光峰。通过实验由荧光三维扫描图2-2（a）得到C-藻蓝蛋白样品特征荧光峰相关数据，得其最大激发波长EX：620nm，最大发射波长EM：644nm，因此后续实验中样品荧光发射光谱（如图2-2（b））均在最大激发波长620nm条件下测定。（a）（b）图2-2C-藻蓝蛋白溶液三维荧光扫描光谱（a）与激发波长620nm处发射光谱（b）Fig.2-23Dfluorescencescanningspectrum(a)andemissionspectrum(b)at620nmofC-phycocyaninsolution

【参考文献】：
期刊论文
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博士论文
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硕士论文
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[2]钝顶螺旋藻藻蓝蛋白储存稳定性研究[D]. 徐润.天津科技大学 2017
[3]新型C-PC/CMC-CD59sp纳米微球的制备及其对HeLa细胞的靶向抗肿瘤研究[D]. 杨鹏.青岛大学 2016
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本文编号：3559472