鸢尾生香菌的分离鉴定及产香研究

发布时间：2023-01-12 10:34

　　鸢尾酮是香料用鸢尾的特征香气成分,在日用化妆品、烟草和食品等行业中有广泛应用。传统植物提取法需要以陈化2-3年的鸢尾根茎为原材料,存在生产周期长、产物得率低、生产成本高等问题。本课题从鸢尾根茎中分离并鉴定产香微生物,开展用新鲜根粉为原料发酵生产鸢尾酮的研究,并进行了以假紫罗兰酮为底物合成鸢尾酮探索性实验。（1）从陈化鸢尾根茎中分离到15株细菌和8株真菌,经高效液相色谱法（HPLC）和气相色谱质谱联用仪（GC-MS）分析菌株的发酵产物,获得一株可以产生顺式α-鸢尾酮的细菌。16S rDNA分子生物学鉴定结果表明,该菌株与简单芽孢杆菌（Bacillus simplex strain）同源性高达99%,将其命名为YWT-5。（2）以新鲜鸢尾根粉为原料发酵生产鸢尾酮,优化了主要发酵工艺参数。在含甘油10g/L,蛋白胨10 g/L,磷酸二氢钾1g/L,磷酸氢二钾1.5 g/L,氯化钠1 g/L,七水硫酸镁0.5 g/L,氯化钙0.05 g/L的培养基中,添加新鲜鸢尾根粉至终浓度5 g/L,28℃、200 rpm条件下发酵24 h后顺式α-鸢尾酮的摇瓶产量达315.95mg·kg-1。10L发酵罐... 

【文章页数】：86 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
致谢
摘要
Abstract
第一章 绪论
    1.1 引言
    1.2 鸢尾酮研究进展
        1.2.1 鸢尾酮的分类及理化性质
        1.2.2 鸢尾酮的合成
        1.2.3 鸢尾酮的应用
    1.3 背景及主要研究内容
        1.3.1 选题背景
        1.3.2 主要内容及研究方法
第二章 鸢尾酮生香菌的筛选及鉴定
    2.1 引言
    2.2 实验材料
        2.2.1 实验试剂
        2.2.2 培养基
        2.2.3 实验仪器
    2.3 实验方法
        2.3.1 菌种分离
        2.3.2 菌种筛选
        2.3.3 菌种保藏
        2.3.4 鸢尾酮的标准曲线的建立
        2.3.5 鸢尾酮挥发性的研究
        2.3.6 产物的提取
        2.3.7 HPLC及GC-MS定性分析
        2.3.8 发酵产物中鸢尾酮的位置探究
        2.3.9 菌种鉴定方法
    2.4 实验结果及讨论
        2.4.1 α-鸢尾酮标准曲的建立
        2.4.2 鸢尾酮挥发性对鸢尾酮产量的影响
        2.4.3 菌种分离及筛选
        2.4.4 菌种鉴定
            2.4.4.1 形态特征
            2.4.4.2 分子生物学鉴定及系统发育树的构建
    2.5 本章小结
第三章 培养条件对鸢尾酮产量的影响
    3.1 引言
    3.2 实验材料
        3.2.1 试剂
        3.2.2 培养基
        3.2.3 仪器
    3.3 实验方法
        3.3.1 摇瓶参数优化
            3.3.1.1 碳源氮源对鸢尾酮产量的影响
            3.3.1.2 培养转速对鸢尾酮产量的影响
            3.3.1.3 培养温度对鸢尾酮产量的影响
            3.3.1.4 培养时间对鸢尾酮产量的影响
            3.3.1.5 根粉添加量对鸢尾酮产量的影响
        3.3.2 10 L发酵罐培养
            3.3.2.1 发酵种子液
            3.3.2.2 发酵培养基
            3.3.2.3 发酵方法
    3.4 实验结果
        3.4.1 摇瓶实验
            3.4.1.1 碳源氮源对鸢尾酮产量的影响
            3.4.1.2 转速对鸢尾酮产量的影响
            3.4.1.3 温度对鸢尾酮产量的影响
            3.4.1.4 发酵时间对鸢尾酮产量的影响
            3.4.1.5 鸢尾根粉添加量对鸢尾酮产量的影响
        3.4.2 发酵罐上罐结果
            3.4.2.1 培养基对鸢尾酮产量的影响
            3.4.2.2 上罐对鸢尾酮产量的影响
    3.5 本章小结
第四章 假紫罗兰酮生物合成鸢尾酮的研究
    4.1 引言
    4.2 实验材料
        4.2.1 实验材料
        4.2.2 培养基
        4.2.3 仪器
    4.3 实验方法
        4.3.1 假紫罗兰酮溶解度探究
        4.3.2 细菌初筛
        4.3.3 细菌复筛
        4.3.4 发酵产物提取
        4.3.5 发酵产物分析
    4.4 实验结果
        4.4.1 假紫罗兰酮溶解度
        4.4.2 微生物的筛选
            4.4.2.1 菌株初筛
            4.4.2.2 菌株复筛
            4.2.2.3 发酵产物LC-MS分析
    4.5 本章小结
第五章 一株生香真菌的分离及鉴定
    5.1 引言
    5.2 实验材料
        5.2.1 实验试剂
        5.2.2 培养基
        5.2.3 实验仪器
    5.3 实验方法
        5.3.1 菌种分离
        5.3.2 生香真菌筛选
        5.3.3 菌种鉴定
            5.3.3.1 菌种形态观察
            5.3.3.2 目的基因的的扩增
            5.3.3.3 目的基因的测序及系统发育树的构建
        5.3.4 产物的提取
        5.3.5 GC-MS定性分析
    5.4 实验结果及讨论
        5.4.1 菌种筛选和鉴定
            5.4.1.1 菌种筛选
            5.4.1.2 形态特征
            5.4.1.3 18S rRNA分子生物学鉴定及系统发育树的构建
        5.4.2 发酵产物鉴定
    5.5 本章小结
第六章 总结及展望
    6.1 结论
    6.2 展望
参考文献
附录
作者简介


【参考文献】：
期刊论文
[1]索氏提取法制备高纯度色酮[J]. 王颖,彭飞宏,徐文,褚朝森,王晓丽.  精细与专用化学品. 2018(09)
[2]烟管菌M-1对柑橘炭疽病菌的抑制作用及发酵条件优化[J]. 汪文强,李勇,张旭辉,魏万玲,周丰武,李素平,李杰.  中国生物防治学报. 2018(03)
[3]1-辛烯-3-醇的合成工艺优化研究[J]. 张雷亮,李晟,郭鸽,宗彦萍,闫培良,王广林.  山东化工. 2017(02)
[4]山苍子油活性成分对木材真菌的抑制作用[J]. 郭丹,李兆双,王鹏,陈尚钘,范国荣,王宗德.  林产化学与工业. 2016(03)
[5]山苍子油主成分及其衍生物对植物病原菌的抑制作用[J]. 郭丹,雷潇,王鹏,陈尚钘,范国荣,王宗德.  江西农业大学学报. 2016(02)
[6]新型与市售平菇香气成分的GC-MS分析与比较[J]. 阮鸣,霍光明,张李阳,华春,李朝晖,贲爱玲,金路尧.  食品工业科技. 2016(10)
[7]关环反应合成鸢尾酮[J]. 胡铁,皮少峰,王烨,高海丽,孙汉洲,黎继烈.  应用化学. 2014(11)
[8]以甘油为碳源分批补料高密度发酵产环氧化物水解酶[J]. 陈冠宇,袁建锋,吴绵斌,林建平,杨立荣.  高校化学工程学报. 2014(03)
[9]鸢尾酮的制备[J]. 韩艳利,旷春桃,钱伟,周军.  中国食品添加剂. 2012(05)
[10]真菌发酵新鲜香根鸢尾根状茎产鸢尾香料研究[J]. 郭仕平,曾淑华,张玲琪.  烟草科技. 2009(05)

博士论文
[1]五叶草莓色素合成的基因调控与香味分析[D]. 段文凯.浙江工业大学 2017

硕士论文
[1]角质降解细菌筛选、发酵条件优化及酶学性质研究[D]. 梁争文.中国农业科学院 2016
[2]四种香料植物内生及根际菌中产香功能菌株的筛选及鉴定[D]. 储晓.云南大学 2016
[3]内生真菌Epichlo? bromicola菌种分离鉴定及其发酵物对拟南芥幼苗生长的影响[D]. 文先.内蒙古大学 2015
[4]烟色烟管菌诱变提高漆酶产量的研究[D]. 彭滟钞.中南林业科技大学 2014
[5]椪柑精油及其抑菌组分对柑橘采后青、绿霉菌的作用[D]. 贾雷.湘潭大学 2013
[6]香料用鸢尾引种及鸢尾酮定量分析研究[D]. 韩桂军.西北大学 2013
[7]假紫罗兰酮的工业制备过程研究[D]. 赵长明.北京化工大学 2000



本文编号：3729804