甲烷氧化菌和光合细菌共培养生产甲烷氧化菌素
发布时间：2023-02-21 18:56
甲烷氧化菌素(Mb,Methanobactin)是由甲烷氧化菌分泌到细胞外的一种分子量很小的活性蛋白荧光肽,可作为重要的多功能生物催化剂。本论文主要对采用甲烷氧化菌和光合细菌共培养方法产Mb进行研究。本论文第一部分建立了甲烷氧化菌和光合细菌生长情况的测定方法及Mb的检测方法,运用铬天青S分光光度法对Mb的浓度进行测定,其线性方程为:y=-0.0475x+0.1228,R2=0.9963,具有良好的线性相关关系,因此可用铬天青S分光光度法进行Mb的检测。通过测定甲烷单加氧酶活性来表征甲烷氧化菌的生长情况,同时应用改良分光光度法对光合细菌生长量进行测定,建立了光合细菌浓度为1～5 g/L的标准曲线,线性方程为y=0.108x+0.26,R2=0.9976,线性关系良好。通过控制光照、甲烷和二氧化碳气体的比例从甲烷氧化菌OB3b混合菌中分别获得了甲烷氧化菌或光合细菌的单一生长菌种和二者共同生长的菌种。对于共同生长菌种,在有光照条件下甲烷单加氧酶(MMO,Methane Monooxygenase)活性比无光时更高,说明光合菌生长过程中的光合作用释放了氧气并促进了甲烷氧化菌的生长代谢,其Mb浓...
【文章页数】：59 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
1 绪论
1.1 甲烷氧化菌
1.1.1 甲烷氧化菌的概述
1.1.2 甲烷氧化菌的碳代谢过程
1.2 甲烷氧化菌素
1.2.1 甲烷氧化菌素的概述
1.2.2 甲烷氧化菌素的结构与调控机制
1.2.3 甲烷氧化菌素的应用
1.3 光合细菌
1.3.1 光合细菌的种类及分布
1.3.2 蓝细菌概述
1.4 共培养技术
1.4.1 共培养技术的意义
1.4.2 甲烷氧化菌和其他生物的共培养
1.4.3 甲烷氧化菌和光合细菌的共培养
1.5 本课题来源及研究的目的意义
1.5.1 课题来源
1.5.2 本课题的研究目的意义
1.6 论文的研究内容
2 甲烷氧化菌和光合细菌的生长特性及Mb的测定
2.1 引言
2.2 实验仪器与材料
2.2.1 实验仪器
2.3 实验方法
2.3.1 实验材料
2.3.2 甲烷氧化菌和光合细菌的培养
2.3.3 菌体细胞重量的测定方法
2.3.4 Mb的分离与纯化
2.3.5 铬天青S分光光度法测定Mb浓度
2.3.6 甲烷单加氧酶活的测定
2.3.7 有光条件和无光条件下对两种菌生长及产Mb的影响
2.4 结果与分析
2.4.1 甲烷氧化菌和光合细菌的生长形态
2.4.2 甲烷氧化菌和光合细菌的检测方法
2.4.3 光合细菌标准曲线的测定
2.4.4 气相色谱法测定MMO及环氧丙烷标准曲线的测定
2.4.5 CAS分光光度法测定Mb的浓度
2.4.6 有光条件和无光条件下对两种菌的生长及产Mb的测定
2.5 本章小结
3 不同光照条件和初始碳源对混合菌生长及产Mb的影响
3.1 引言
3.2 实验仪器与材料
3.2.1 实验仪器
3.2.2 实验材料
3.3 实验方法
3.3.1 混合菌的培养方法
3.3.2 细胞生长量的测定
3.3.3 混合菌生长动力学模型的建立及验证
3.3.4 不同光照条件对混合菌细胞生长及产Mb的影响
3.3.5 不同碳源比例对混合菌生长及产Mb的影响
3.4 结果与分析
3.4.1 限铜无机盐培养基混合菌细胞生长拟合曲线的验证
3.4.2 不同光强对混合菌的生长及产Mb的影响
3.4.3 不同总光照时间对混合菌的生长及产Mb的影响
3.4.4 不同碳源比例对混合菌的生长及产Mb的影响
3.5 本章小结
4 培养基中的组成成分对混合菌生长及产Mb的影响
4.1 引言
4.2 实验仪器与材料
4.2.1 实验仪器
4.2.2 实验材料
4.3 实验方法
4.3.1 混合菌的培养
4.3.2 培养基中的组成成分对混合菌生长及产Mb的影响
4.4 结果与分析
4.4.1 Cu2+浓度对混合菌细胞生长及产Mb的影响
4.4.2 Fe3+浓度对混合菌细胞生长及产Mb的影响
4.4.3 Mg2+浓度对混合菌细胞生长及产Mb的影响
4.4.4 NH4+浓度对混合菌细胞生长及产Mb的影响
4.4.5 H2PO4
-浓度对混合菌细胞生长及产Mb的影响
4.5 本章小结
结论
参考文献
附录
攻读学位期间发表的学术论文
致谢
本文编号：3747830
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【学位级别】：硕士
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摘要
Abstract
1 绪论
1.1 甲烷氧化菌
1.1.1 甲烷氧化菌的概述
1.1.2 甲烷氧化菌的碳代谢过程
1.2 甲烷氧化菌素
1.2.1 甲烷氧化菌素的概述
1.2.2 甲烷氧化菌素的结构与调控机制
1.2.3 甲烷氧化菌素的应用
1.3 光合细菌
1.3.1 光合细菌的种类及分布
1.3.2 蓝细菌概述
1.4 共培养技术
1.4.1 共培养技术的意义
1.4.2 甲烷氧化菌和其他生物的共培养
1.4.3 甲烷氧化菌和光合细菌的共培养
1.5 本课题来源及研究的目的意义
1.5.1 课题来源
1.5.2 本课题的研究目的意义
1.6 论文的研究内容
2 甲烷氧化菌和光合细菌的生长特性及Mb的测定
2.1 引言
2.2 实验仪器与材料
2.2.1 实验仪器
2.3 实验方法
2.3.1 实验材料
2.3.2 甲烷氧化菌和光合细菌的培养
2.3.3 菌体细胞重量的测定方法
2.3.4 Mb的分离与纯化
2.3.5 铬天青S分光光度法测定Mb浓度
2.3.6 甲烷单加氧酶活的测定
2.3.7 有光条件和无光条件下对两种菌生长及产Mb的影响
2.4 结果与分析
2.4.1 甲烷氧化菌和光合细菌的生长形态
2.4.2 甲烷氧化菌和光合细菌的检测方法
2.4.3 光合细菌标准曲线的测定
2.4.4 气相色谱法测定MMO及环氧丙烷标准曲线的测定
2.4.5 CAS分光光度法测定Mb的浓度
2.4.6 有光条件和无光条件下对两种菌的生长及产Mb的测定
2.5 本章小结
3 不同光照条件和初始碳源对混合菌生长及产Mb的影响
3.1 引言
3.2 实验仪器与材料
3.2.1 实验仪器
3.2.2 实验材料
3.3 实验方法
3.3.1 混合菌的培养方法
3.3.2 细胞生长量的测定
3.3.3 混合菌生长动力学模型的建立及验证
3.3.4 不同光照条件对混合菌细胞生长及产Mb的影响
3.3.5 不同碳源比例对混合菌生长及产Mb的影响
3.4 结果与分析
3.4.1 限铜无机盐培养基混合菌细胞生长拟合曲线的验证
3.4.2 不同光强对混合菌的生长及产Mb的影响
3.4.3 不同总光照时间对混合菌的生长及产Mb的影响
3.4.4 不同碳源比例对混合菌的生长及产Mb的影响
3.5 本章小结
4 培养基中的组成成分对混合菌生长及产Mb的影响
4.1 引言
4.2 实验仪器与材料
4.2.1 实验仪器
4.2.2 实验材料
4.3 实验方法
4.3.1 混合菌的培养
4.3.2 培养基中的组成成分对混合菌生长及产Mb的影响
4.4 结果与分析
4.4.1 Cu2+浓度对混合菌细胞生长及产Mb的影响
4.4.2 Fe3+浓度对混合菌细胞生长及产Mb的影响
4.4.3 Mg2+浓度对混合菌细胞生长及产Mb的影响
4.4.4 NH4+浓度对混合菌细胞生长及产Mb的影响
4.4.5 H2PO4
-浓度对混合菌细胞生长及产Mb的影响
4.5 本章小结
结论
参考文献
附录
攻读学位期间发表的学术论文
致谢
本文编号：3747830
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