牦牛酥油及其磷脂的脂质组学研究

发布时间：2023-04-29 17:29

　　脂质组学从2003年提出以来迅速成为研究热点,本研究结合地方特色,以牦牛酥油为出发点,采用溶剂提取法提取牦牛酥油中磷脂,确定最优提取工艺;探讨牦牛酥油以及牦牛酥油磷脂对SPF级C57BL/6J小鼠脂质代谢的影响;对牦牛酥油磷脂和小鼠肝脏进行脂质组学研究;通过Real-time PCR检测脂代谢相关基因表达量,以期为牦牛酥油功能特性提供理论依据。主要研究结果如下:(1)通过单因素试验和正交试验确定出黄色牦牛酥油磷脂最佳提取的工艺为液固比6m L/g,55℃提取60min,去油时间25h;白色牦牛酥油最佳提取的工艺为液固比6m L/g,45℃提取60min,去油时间25h。通过GC-MS分析在牦牛酥油中检出36种脂肪酸,其中SFA 26种,占脂肪酸总量的73.73%以上,UFA10种,占脂肪酸总量的24.12%以上;磷脂中共检测出29种脂肪酸,其中SFA 24种,占脂肪酸总量的94.28%以上,UFA 5种,占脂肪酸总量的5%以上。(2)利用不同提取溶剂(乙醇、异丙醇、乙酸乙酯、异己烷、正己烷)提取白色和黄色牦牛酥油中油脂和磷脂,发现利用正己烷提取出的脂质和磷脂得率最高,脂质得率分别为84...

【文章页数】：160 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
第一章 综述
    1.1 牦牛酥油概况
    1.2 磷脂概况
        1.2.1 磷脂的分离纯化方法
        1.2.2 磷脂的分析检测方法
    1.3 脂质组学
    1.4 脂肪代谢相关基因
    1.5 研究意义
第二章 牦牛酥油磷脂提取工艺研究及脂肪酸成分分析
    2.1 引言
    2.2 材料与方法
        2.2.1 试验材料
        2.2.2 试验试剂
        2.2.3 仪器设备
    2.3 试验方法
        2.3.1 牦牛酥油中磷脂的提取方法
        2.3.2 得率和纯度计算
        2.3.3 试验设计
        2.3.4 分析方法
    2.4 结果和分析
        2.4.1 检测波长选择
        2.4.2 磷标准曲线
        2.4.3 单因素试验结果
        2.4.4 正交试验结果
        2.4.5 验证试验
        2.4.6 酥油脂肪酸组成的GC-MS分析
    2.5 讨论
    2.6 本章小结
第三章 牦牛酥油中磷脂的不同溶剂提取及脂质组学研究
    3.1 引言
    3.2 材料与方法
        3.2.1 试验材料
        3.2.2 试验试剂
        3.2.3 仪器设备
    3.3 试验方法
        3.3.1 五种不同溶剂提取牦牛酥油磷脂
        3.3.2 油脂得率计算
        3.3.3 磷脂得率计算
        3.3.4 脂肪酸分析
        3.3.5 牦牛酥油以及磷脂UHPLC-QTOF-MS脂质组学全定量
    3.4 结果分析
        3.4.1 油脂以及磷脂提取率
        3.4.2 牦牛酥油以及磷脂脂肪酸分析结果
        3.4.3 酥油UHPLC-QTOF-MS脂质组学全定量分析结果
    3.5 讨论
    3.6 本章小结
第四章 牦牛酥油及其磷脂对C57BL/6J小鼠脂代谢的影响
    4.1 引言
    4.2 材料与方法
        4.2.1 试验材料
        4.2.2 试验试剂
        4.2.3 试验仪器
    4.3 试验方法
        4.3.1 小鼠分组及饲喂
        4.3.2 观察指标和测定
        4.3.3 小鼠肝脏病理观察
        4.3.4 组织脂肪酸分析
    4.4 结果和分析
        4.4.1 牦牛酥油和磷脂对小鼠体重的影响
        4.4.2 牦牛酥油和磷脂对小鼠血脂水平的影响
        4.4.3 牦牛酥油和牦牛酥油磷脂对小鼠血糖的影响
        4.4.4 饲喂酥油以及磷脂对小鼠组织HE染色的影响
        4.4.5 牦牛酥油和牦牛酥油磷脂对小鼠脂肪酸的影响
    4.5 讨论
    4.6 本章小结
第五章 牦牛酥油和牦牛酥油磷脂饲喂小鼠对脂肪代谢相关基因表达的影响
    5.1 引言
    5.2 材料与方法
        5.2.1 试验材料
        5.2.2 试验试剂
        5.2.3 试验仪器
    5.3 试验方法
        5.3.1 小鼠肝脏总RNA提取与检测
        5.3.2 荧光定量PCR
        5.3.3 数据分析
    5.4 结果分析
        5.4.1 PCR扩增电泳图
        5.4.2 荧光定量PCR结果
    5.5 讨论
    5.6 本章小结
第六章 小鼠肝脏UHPLC-QTOF-MS脂质组学全定量
    6.1 引言
    6.2 材料与方法
        6.2.1 试验材料
        6.2.2 试验试剂
        6.2.3 仪器设备
    6.3 试验方法
        6.3.1 代谢物提取
        6.3.2 上机检测
        6.3.3 数据处理
    6.4 结果分析
        6.4.1 小鼠肝脏脂质组学分析
        6.4.2 主成分分析(PCA)
        6.4.3 正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)得分散点图
        6.4.4 脂质组气泡图分析
        6.4.5 差异代谢物的筛选
        6.4.6 聚类分析
        6.4.7 差异代谢物的代谢通路分析
    6.5 讨论
    6.6 本章小结
第七章 结论与展望
    7.1 结论
    7.2 展望
参考文献
致谢
作者简介
附录 小鼠肝脏组织脂质组学分析



本文编号：3805420