类肝素糖聚物促进干细胞分化的研究

发布时间：2023-05-13 15:44

　　干细胞治疗是通过在体外对干细胞进行纯化分离、增殖培养然后进行定向诱导分化,通过移植技术将获得全新的细胞、组织和器官等移植到体内,移植部分能够代替正常、损伤或者死亡的细胞,从而恢复机体功能一种细胞疗法。在细胞治疗过程中,干细胞的高效定向分化是至关重要的,全面了解和充分利用影响干细胞分化因素对再生医学具有重要意义。肝素/硫酸乙酰肝素(HP/HS)作为干细胞生态位中结构最复杂的GAGs分子,可通过结构中大量负电荷的羧酸基团和磺酸基团与可溶性信号因子或细胞膜蛋白相互作用,进而特异性诱导胚胎干细胞向神经细胞、间充质干细胞向成骨细胞方向分化。我们通过基团重组策略合成类肝素聚合物,并模拟干细胞生态位微环境,设计人工干细胞生态位微环境平台,探究其对干细胞定向分化的影响。具体研究内容如下:1.首先从宏观3D角度设计人工干细胞生态位平台,我们以3-磺丙基丙烯酸盐钾盐(SPA)、2-(甲基丙烯酰胺基)葡萄糖(MAG)、N-异丙基丙烯酰胺(NIPAAm)为单体单元,进行RAFT聚合制备温敏性多孔水凝胶PNMS,用于封装骨髓间充质干细胞(BMSCs),并探究该平台对BMSCs向成骨细胞分化的影响。通过红外光谱、...

【文章页数】：123 页

【学位级别】：硕士

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摘要
abstract
第一章 绪论
    1.1 干细胞概述
        1.1.1 干细胞生物学
        1.1.2 影响干细胞分化的因素
    1.2 肝素/硫酸乙酰肝素(HP/HS)对干细胞分化的影响
        1.2.1 糖胺聚糖的结构与功能
        1.2.2 肝素/硫酸乙酰肝素(HP/HS)对干细胞分化的影响
    1.3 肝素及类肝素糖聚物的合成方法
        1.3.1 天然肝素
        1.3.2 生物学方法合成
        1.3.3 化学方法合成
    1.4 课题的提出
        1.4.1 研究的目的及意义
        1.4.2 研究内容
第二章 温敏性PNMS水凝胶对BMSC成骨分化的研究
    2.1 引言
    2.2 实验部分
        2.2.1 实验试剂
        2.2.2 实验仪器
        2.2.3 2-(甲基丙烯酰胺基)葡萄糖胺(MAG)的合成
        2.2.4 温敏性PNMS水凝胶的制备
        2.2.5 温敏性PNMS水凝胶的表征与测试
        2.2.6 小鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)细胞培养
        2.2.7 温敏性PNMS水凝胶生物相容性表征
        2.2.8 PNMS水凝胶对BMSC向成骨细胞分化的影响
        2.2.9 统计学分析
    2.3 结果与讨论
        2.3.1 温敏性PNMS水凝胶红外光谱表征
        2.3.2 温敏性水凝胶表面形貌表征
        2.3.3 温敏性水凝胶溶胀率(SR)表征
        2.3.4 温敏性水凝胶溶胀性能表征
        2.3.5 温敏性PNMS水凝胶细胞粘附表征
        2.3.6 温敏性PNMS水凝胶对BMSC成骨分化的影响
    2.4 本章小结
第三章 AuNP-PMS/FGF2三元复合物促进mESC向神经分化
    3.1 引言
    3.2 实验部分
        3.2.1 实验试剂
        3.2.2 实验仪器
        3.2.3 类肝素糖聚物PMS的合成
        3.2.4 巯基化类肝素糖聚物PMS-SH的合成
        3.2.5 含荧光素的巯基化类肝素糖聚物的合成
        3.2.6 金纳米粒子的合成
        3.2.7 AuNP-PMSF自组装效率的检测
        3.2.8 AuNP-PMS/FGF2三元复合物的制备
        3.2.9 AuNP-PMSR/FGF2复合物验证实验
        3.2.10 细胞培养
        3.2.11 L929细胞相容性表征
        3.2.12 AuNP-PMS/FGF2三元复合物对mESC增殖的影响
        3.2.13 AuNP-PMS/FGF2三元复合物对mESC向神经分化的影响
        3.2.14 FGF2结合试验
        3.2.15 FGF2的浓度对mESC向神经分化的影响
        3.2.16 FGF2的浓度对L929毒性的表征
        3.2.17 统计学分析
    3.3 结果与讨论
        3.3.1 类肝素糖聚物的合成与表征
        3.3.2 荧光法检测AuNP-PMSF自组装效率
        3.3.3 AuNP-PMS的制备与表征
        3.3.4 AuNP-PMS/FGF2三元复合物的制备与表征
        3.3.5 L929细胞相容性表征
        3.3.6 AuNP-PMS/FGF2三元复合物对mESC增殖的影响
        3.3.7 AuNP-PMS/FGF2三元复合物对mESC向神经分化的影响
        3.3.8 FGF2结合试验
        3.3.9 FGF2的浓度对mESC向神经分化的影响
        3.3.10 FGF2的浓度对L929毒性的表征
    3.4 本章小结
第四章 结论与展望
    4.1 结论
    4.2 展望
参考文献
硕士论文工作期间科研成果
附录
致谢



本文编号：3816122