非产毒黄曲霉菌株筛选及其在花生种植中的应用研究

发布时间：2024-05-21 06:44

　　黄曲霉毒素(aflatoxin,AFT)是黄曲霉、寄生曲霉等产生的一类剧毒次生代谢产物,对花生、玉米等粮油及其制品造成广泛的污染。因其具有致癌、致畸、致突变作用,严重威胁着人类健康。因基因变异,部分黄曲霉菌丧失了产毒能力,在种植和仓储过程中,非产毒黄曲霉菌株可竞争抑制黄曲霉毒素产生菌的生长,实现从源头控制黄曲霉毒素污染的目的。本研究针对我国几个花生主产区,同时也是黄曲霉毒素污染严重区域,如河南舞阳、湖北襄阳等地开展非产毒黄曲霉菌株的筛选、菌剂制备及田间应用效果评价等研究。首先,利用形态学、分析化学和PCR-RFLP等分子生物学技术相结合的方法分离鉴定非产毒黄曲霉菌株,在河北、河南、湖北等地的土壤和花生样品中共筛选鉴定出156株黄曲霉菌,其中非产毒黄曲霉菌21株(13.5%),产毒黄曲霉菌135株(86.5%)。而后利用非产毒黄曲霉菌制备不同菌剂,如以花生粕和大豆为基质的菌肥、以大米为介质的大米接种孢子剂、液体孢子菌剂和花生包衣剂等。并设置不同的施加时间和剂量,通过田间试验对不同菌剂进行应用效果评价。田间试验结果表明施加剂量对田间试验结果无影响,最佳的菌剂施加时间为开花期开始的前2

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1.1非产毒黄曲霉菌株筛选及其在花生种植中的应用研究技术路线

1.5技术路线非产毒黄曲霉菌株筛选及其在花生种植中的应用研究技术路线如图1.1所示。图1.1非产毒黄曲霉菌株筛选及其在花生种植中的应用研究技术路线

图2.1不同曲霉菌在AFPA平板上形态

2.1不同曲霉菌在AFPA平板上形态曲霉；(b)酱油曲霉；(c)黄曲霉；(d)寄生曲属鉴定分析提取糖凝胶电泳检测所提取的基因组DNA的2.2所示。

图2.2基因组DNA提取凝胶电泳图

图2.2基因组DNA提取凝胶电泳图M1：DL10000；M2：DL15000；1~16为本次实验所用及筛选到的菌株所示，Marker的大小分别为10000与15000，所提取的基因组10000至15000之间，且条带明亮完整，说明使用试剂盒提取果良好。....

图2.328SrRNA凝胶电泳图

图2.328SrRNA凝胶电泳图；1：寄生曲霉3.124；2：黄曲霉NAF06；3：米曲霉3.484；4：酱油曲SrRNA基因的测序结果及比对R扩增得到的28SrRNA基因送华大基因有限公司进行双向测序对测序结果进行比对，发现各菌株之间高度同源，一致性....

本文编号：3979743