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小麦芽内肽酶酶学性质及其对豆粕降解规律研究

发布时间:2024-06-02 02:10
  小麦芽含有丰富的酶系,其中内肽酶主要作用于蛋白质多肽链内部的肽键使蛋白质长链分解成短肽。在许多食品加工原料及食品加工过程,内肽酶活力的大小直接影响到底物蛋白、产物蛋白的含量及组成比例,同时也是很多发酵食品的重要监测指标。豆粕蛋白质含量高,分子质量大、结构紧密,消化利用率不高。通过酶法将大分子蛋白质降解成小分子蛋白质、肽和氨基酸,从而使蛋白质分子量降低,提高蛋白质的利用率。而小麦芽作为天然的复合酶,可以解决豆粕中所含的蛋白质分子质量较大、消化利用率相对较低等问题。本研究改进了小麦芽内肽酶活力测定方法,探索了小麦芽内肽酶的酶学性质和动力学常数,确定了最佳酶活力测定条件。将小麦芽内肽酶应用到豆粕降解中,研究了酶解时间对产物蛋白含量、氨基氮含量、蛋白质分子量大小分布等指标的影响规律,采用红外光谱、扫描电镜、拉曼光谱等技术手段明确了豆粕降解前后蛋白质的结构的变化。并对豆粕降解产物中抗氧化活性肽做了探讨。主要研究结果如下:(1)本实验在利用SDS-PAGE电泳技术观察反应产物条带分布的基础上,采用三氯乙酸沉淀反应体系中大分子蛋白质,留下产物肽,通过测定产物肽含量精确测定小麦芽内肽酶活性。实验结果中...

【文章页数】:64 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

图1缩二脲标准曲线

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山东农业大学硕士论文17图1缩二脲标准曲线Fig.1Standardcurveofbiuret2.5.3.2实验测定pH4.5醋酸-醋酸钠缓冲液1.0mL、粗酶提取液1.0mL被加入到比色管中,50℃保温30min,溶液中加入1.0mL牛血清白蛋白溶液,在50℃下被反应4h。然后....


图2蛋白溶液的标准曲线

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小麦芽内肽酶酶学性质及其对豆粕降解规律研究182.5.4动力学常数的测定在最适的pH和温度条件下,底物牛血清白蛋白浓度为0.2mg/mL、0.4mg/mL、0.6mg/mL、0.8mg/mL、1.0mg/mL、1.2mg/mL、1.4mg/mL、1.6mg/mL、1.8mg/mL....


图3内肽酶反应体系的SDS-PAGE电泳图

图3内肽酶反应体系的SDS-PAGE电泳图

小麦芽内肽酶酶学性质及其对豆粕降解规律研究223结果与分析3.1小麦芽内肽酶活力最佳测定条件的确定3.1.1内肽酶测定过程中反应体系蛋白质组成分析图3为内肽酶反应体系中蛋白质的SDS-PAGE电泳图。如图3所示,泳道1为粗酶液的蛋白分子量的分布,我们可以看出小麦芽内肽酶的分子量主....


图4内肽酶反应体系的Tricine-SDS-PAGE电泳图

图4内肽酶反应体系的Tricine-SDS-PAGE电泳图

山东农业大学硕士论文23中的4.6-10kDa处的条带只在泳道3中出现,说明此条带的物质为小麦芽内肽酶降解底物牛血清白蛋白后的部分产物,这部分产物分子量较小,不能被TCA沉淀。将TCA沉淀后的酶解液与碱性硫酸铜反应在540nm下测定吸光度值减去对照组酶解液体系540nm的吸光度值....



本文编号:3986697

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