红菊苣中花青素的提取纯化及生物活性研究

发布时间：2020-07-29 23:42

【摘要】：红菊苣产量大,易管理,作为蔬菜因其味苦不宜大量消耗,以红菊苣为原料提取花青素,可更加高效地利用红菊苣资源。本文对红菊苣中花青素的提取、纯化、成分分析、稳定性及生物活性进行了研究,结论如下:(1)利用pH示差法对红菊苣中花青素进行定量,并对定量条件进行优化。该花青素的最大吸收波长为520nm,提取液为含0.1%盐酸的酸性乙醇,缓冲液pH值分别为1.0和4.5,反应温度应保持在35℃左右,反应平衡时间为30min;平均加标回收率为100.32%,RSD为1.07%。该方法能消除溶液中杂质对测定结果的影响,可用于红菊苣花青素的定量分析。(2)利用超声波辅助有机溶剂法提取红菊苣中花青素,优化所得到的最优提取条件为:液固比41:1(mL:g)、乙醇体积分数71%、超声提取时间28min。在此条件下,花青素的提取量达到908.596mg/100g,与二次响应面回归模型中预测值910.426mg/100g相差不大,因此该模型可用于实际预测。(3)确定AB-8型大孔树脂的最佳纯化工艺条件:吸附时间为2.5h,上样液pH值为2.0,浓度为342.33mg/L,流速为2mL/min,体积为260mL;解吸时间为1.5h,解吸液为60%乙醇,流速为2mL/min,体积为100mL。经此条件纯化后,红菊苣花青素的色价由5.2提高到48.9,是未纯化的9.4倍。采用高效液相色谱法分析红菊苣花青素的成分,实验结果表明:红菊苣花青素含有6种成分,其中矢车菊-3-O-葡萄糖苷含量最多,为646.247mg/100g。(4)探究各种因素对红菊苣花青素稳定性的影响,结果表明:红菊苣花青素在强酸条件下较稳定,但对光照和高温比较敏感,H_2O_2可显著降低其稳定性,亚硫酸钠对其具有漂白作用,Vc对其稳定性具有双重影响,苯甲酸钠、山梨酸钾对其稳定性影响不明显,蔗糖对其有一定的护色作用,Cu~(2+)、Fe~(3+)、Al~(3+)均可降低红菊苣花青素的稳定性,Na~+、Mg~(2+)、Zn~(2+)、Ca~(2+)对其稳定性影响不大,K~+则可增加其稳定性。因此,红菊苣花青素应在避光、低温、强酸性条件下保存,避免接触H_2O_2、亚硫酸钠和Cu~(2+)、Fe~(3+)、Al~(3+)等金属离子。(5)本实验对红菊苣花青素生物活性性能进行了全面分析。抗氧化性实验表明:红菊苣花青素在清除DPPH自由基、Fe~(3+)还原能力上均表现出较强活性;抗菌性实验表明:红菊苣花青素对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌均具有抑制性,对大肠杆菌的抑制程度最强;红菊苣花青素可有效地清除亚硝酸钠,最大清除率可达到70.01%,其对亚硝胺合成具有明显的阻断作用,最大阻断率可达到85.37%。
【学位授予单位】：西安工程大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：TS264.4
【图文】：

花青素,基本结构

是 H 或者糖基，R1、R2是 H、OH 或糖基，R3是 OH 或糖基图 1-1 花青素的基本结构取纯化方法方法前提是要提取花青素，现阶段关于花青素提取的工辅助溶剂提取法和热溶剂直接提取法的提取工艺，的热效应；第二种是包括高压脉冲电场辅助溶剂提溶剂提取法的提取工艺，其特点是工艺过程不伴随取法在天然色素提取法中，我们通常选用的是取溶剂对于该方法是至关重要的。一般来说，该方度地溶解提取物的同时，还要满足对其他物质不能会被糖类通过糖苷化过程转变为花色苷，具有很强花青素可选用水，或者选用具备亲水（脂）性的乙

吸收光谱曲线,花青素,提取液

(6)反应平衡时间的确定根据花青素定量分析方法，将加入缓冲液的待测液在水浴条件下分别平衡 10 min、20 min、30 min、40 min、50 min、60min。.5 红菊苣花青素的回收实验取 2 份红菊苣花青素提取液，其中一份花青素提取液利用 pH 示差法直接测其含另一份花青素提取液中加入已知量的 Cy-3-Glu，利用 pH 示差法测定其含量，与标样提取液含量进行比较，回收率计算见式（2-3）：p = 2 1 3× 100% 公式（2-3）式中：p--回收率；C1--试样测定量；C2--加标样测定量；C3--加标量。3 实验结果与讨论.1 最大吸收波长的确定

菊苣,工艺研究,提取量,液固比

液固比和乙醇体积分数对花青素提取量的影响

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