两种红藻多肽的抗氧化及降血压活性研究

发布时间：2023-04-01 18:49

　　坛紫菜和龙须菜是我国沿海地区广泛养殖的两种重要的经济藻类。两种藻类含丰富的营养成分,可供食用和药用,尤其是紫菜中的蛋白质含量相当于陆地植物大豆,且富含人体必需的氨基酸。本文以坛紫菜和龙须菜作为研究对象,分别研究了坛紫菜和龙须菜的酶解多肽的制备及其抗氧化和血管紧张素转化酶(ACE)抑制活性。1.从龙须菜胰蛋白酶的酶解多肽液(≤3 kDa的组分)中利用LC-MS/MS鉴定出两条具有特定序列的ACE抑制肽。经测定FQIN[M(O)]CILR和TGAPCR的IC₅₀值分别为9.64±0.36μM和23.94±0.82μM。两条多肽具温度和pH稳定性,且能在模拟胃肠液中保持结构的稳定性并发挥稳定的ACE抑制作用。酶动力学考察显示两个多肽为ACE的非竞争性抑制剂。分子对接模拟显示两个多肽通过与ACE催化底物相关的关键氨基酸残基形成氢键来干扰ACE。此外,两个多肽在自发性高血压大鼠(SHR)体内仍能发挥显著的降压活性,两者能显著的降低SHR的收缩压(SBP)和舒张压(DBP),其中FQIN[M(O)]CILR比TGAPCR在SHR体内能发挥更好的降血压效果。2.比较了实验室传统...

【文章页数】：81 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
第1章 引言
    1.1 研究背景
        1.1.1 海洋环境与资源
        1.1.2 高血压的发生及血管紧张素转化酶的作用
        1.1.3 氧化应激与抗氧化剂
    1.2 生物活性肽的研究概况
        1.2.1 生物活性肽的研究现状
        1.2.2 活性多肽的制备及分离方法
        1.2.3 海洋活性多肽的研究概况
    1.3 坛紫菜和龙须菜的研究现状
        1.3.1 坛紫菜的研究进展
        1.3.2 龙须菜的研究进展
    1.4 选题意义及研究背景
第2章 龙须菜降压肽的筛选鉴定及体内活性研究
    2.1 仪器与材料
    2.2 实验方法
        2.2.1 龙须菜多肽的制备
        2.2.2 液-质联用技术鉴定多肽的序列
        2.2.3 ACE抑制肽的合成
        2.2.4 ACE抑制活性的测定
        2.2.5 总抗氧化活性测定
        2.2.6 多肽的性质
        2.2.7 多肽稳定性考察
        2.2.8 多肽与ACE结合稳定性
        2.2.9 多肽抑制模式考察
        2.2.10 分子对接模拟
        2.2.11 多肽SHR体内降血压活性研究
        2.2.12 统计分析
    2.3 实验结果
        2.3.1 龙须菜多肽的抗氧化及降血压活性
        2.3.2 多肽ACE抑制活性筛选
        2.3.3 多肽的性质
        2.3.4 多肽ACE抑制活性的稳定性研究
        2.3.5 多肽与ACE结合稳定性
        2.3.6 多肽抑制模式的表征
        2.3.7 分子对接
        2.3.8 SHR体内降血压活性研究
    2.4 讨论
    2.5 结论
第3章 坛紫菜酶解多肽的制备及活性研究
    3.1 仪器与材料
    3.2 试验方法
        3.2.1 坛紫菜蛋白的提取
        3.2.2 坛紫菜蛋白的分离纯化
        3.2.3 蛋白质及多糖含量测定
        3.2.4 坛紫菜酶解多肽的制备
        3.2.5 水解度的测定
        3.2.6 酶解坛紫菜抗氧化能力测定
        3.2.7 酶解坛紫菜多肽ACE抑制活性测定
    3.3 结果与讨论
        3.3.1 坛紫菜蛋白的提取
        3.3.2 坛紫菜蛋白的分离
        3.3.3 酶解坛紫菜蛋白的水解度及回收率
        3.3.4 酶解坛紫菜多肽抗氧化能力
        3.3.5 酶解坛紫菜多肽抑制ACE活性
    3.4 结论
参考文献
致谢
作者简历及攻读学位期间发表的学术论文与研究成果



本文编号：3777668