香樟根际促生菌的筛选与促生特性研究
发布时间：2022-01-02 04:41
以香樟根际土壤为试材,采用PVK平板检测法、亚历山大平板检测法、CAS平板检测法、JNFb培养基检测法、Salkowski比色法,分别研究了从香樟根际土中随机挑取的22株细菌的解磷、解钾、产铁载体、固氮、产吲哚-3-乙酸（IAA）能力,采用16S rDNA对产铁载体和产IAA能力较强的菌株进行了分子鉴定,以期为探讨香樟速生、耐贫瘠等机制,同时也为香樟及其它植物研制微生物菌肥提供一定的参考依据。结果表明:挑取的22株细菌中,有7株具有解磷能力,8株具有固氮能力,11株能产铁载体,16株能产IAA。对初步分离的具有产铁载体和产IAA的菌株进行进一步的定量测定发现,菌株XZ3和XZ22产生的铁载体活性单位明显高于其它菌株,分别为78.4%和74.6%。XZ11和XZ13产IAA的能力最强分别为46.82、46.19μg·mL-1。经16S rDNA分子鉴定,XZ3和XZ22分别隶属短小芽孢杆菌（Lysinibacillus sp.）和芽孢杆菌（Bacillus sp.）,XZ11和XZ13分别隶属假单胞菌（Pseudomonas sp.）和短小芽孢杆菌（Lysiniba...
【文章来源】：北方园艺. 2019,(04)北大核心
【文章页数】：6 页
【部分图文】：
图１菌株ＸＺ３的ＣＡＳ检测Ｆｉｇ．１Ｓｉｄｅｒｏｐｈｏｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｓｏｆ
７株在白色瓷板经Ｓａｌｋｏｗｓｋｉ比色颜色为深红色的菌株进行进一步的定量测定。从测定结果可以看出，这７株菌株产ＩＡＡ的能力依次为ＸＺ１３＞ＸＺ１１＞ＸＺ８＞ＸＺ１９＞ＸＺ１２＞ＸＺ１７＞ＸＺ２１。其中菌株ＸＺ１３和ＸＺ１１产ＩＡＡ的能力显著高于其它菌株，分别为４６．８２、４６．１９μｇ·ｍＬ－１。菌株ＸＺ１７和ＸＺ２１产ＩＡＡ的能力明显低于其它菌株，分别仅为１５．８８、１２．５５μｇ·ｍＬ－１。图２菌株产ＩＡＡ的定量测定Ｆｉｇ．２ＱｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＩＡＡｐｒｏｄｕｃｅｄｂｙｓｔｒａｉｎｓ２．４菌株的分类地位选取经过定量检测分泌铁载体能力最强的２株菌株ＸＺ３和ＸＺ２２，以及分泌ＩＡＡ能力最强的２株菌株ＸＺ１３和ＸＺ１１进行分子鉴定。分别提取这４株菌株的总ＤＮＡ后，对其进行１６ＳｒＤＮＡＰＣＲ扩增，将扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳后得到了约１５００ｂｐ的目的条带。将目的片段割胶回收测序后的ＤＮＡ序列与ＮＣＢＩ数据库Ｂｌａｓｔ进行同源性比较，并采用ＭＥＧＡ４．０．１软件构建系统进化树。由图３可以看出，ＸＺ３和ＸＺ１３与短小芽孢杆菌（Ｌｙｓｉｎｉｂａｃｉｌｌｕｓｓｐ．）亲缘关系较近，而菌株ＸＺ１１与假单胞菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｓｐ．）亲缘关系较近，菌株ＸＺ２２与芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓｓｐ．）亲缘关系较近（图４）。因此，初步确定ＸＺ３和ＸＺ１
图３菌株基于１６ＳｒＤＮＡ的系统进化树Ｆｉｇ．３Ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃｔｒｅｅｂａｓｅｄｏｎｔｈｅ１６ＳｒＤＮＡｇｅｎｅｓｅｑｕｅｎｃｅｏｆｓｔｒａｉｎｓ进植物生长、抵抗病虫害的侵染和介导植物忍受重金属、养分亏缺、多环芳烃、干旱等非生物胁迫方面具有重要影响［７－８］。如具有解磷功能的细菌能将土壤中难溶性的磷酸盐转变成可溶性的磷酸盐从而促进植物对磷的吸收。能分泌铁载体的微生物，一方面能很好的螯合土壤中三价的铁离子，促进植物对铁的吸收，另一方面促生菌通过螯合铁元素，使得病原菌竞争不到铁元素，从而抑制病原微生物的生长，减少植物病害的发生［１９］。在介导植物修复重金属污染土壤方面，产铁载体微生物也发挥了重要作用，微生物分泌的铁载体还能与其它金属形成可溶性的金属－铁载体螯合物，增加土壤中重金属的溶解性或者导致植物根部氧自由基的减少，从而提高植物对重金属的富集能力和耐受能力［１８，２０］。固氮微生物则能将大气中的氮气还原为植物能利用的氨，为植物提供合成蛋白质所必需的氮素营养。分泌ＩＡＡ的细菌，则能刺激植物根系的生长，香樟能形成庞大而广泛的根系［２１］，这可能与其根际存有较多的能分泌ＩＡＡ的细菌有关。因此综合该研究的结果和前人研究的成果，课题组推测香樟根际促生菌的存在可能与香樟生长迅速、耐贫瘠、抗病虫害及对多环芳烃和重金属的富集方面有一定的联系。但具体是那些促生菌在起作用，以及这些促生菌是如何其作用的，还有待于进一步的研究。参考文献［１］ＺＨＯＵＹ，ＹＡＮＷ．Ｃｏｎｓ
【参考文献】：
硕士论文
[1]铁载体高产菌株的ARTP选育及其铁载体产量提高机理的初步分析[D]. 孙萌.江南大学 2017
本文编号：3563492
【文章来源】：北方园艺. 2019,(04)北大核心
【文章页数】：6 页
【部分图文】：
图１菌株ＸＺ３的ＣＡＳ检测Ｆｉｇ．１Ｓｉｄｅｒｏｐｈｏｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｓｏｆ
７株在白色瓷板经Ｓａｌｋｏｗｓｋｉ比色颜色为深红色的菌株进行进一步的定量测定。从测定结果可以看出，这７株菌株产ＩＡＡ的能力依次为ＸＺ１３＞ＸＺ１１＞ＸＺ８＞ＸＺ１９＞ＸＺ１２＞ＸＺ１７＞ＸＺ２１。其中菌株ＸＺ１３和ＸＺ１１产ＩＡＡ的能力显著高于其它菌株，分别为４６．８２、４６．１９μｇ·ｍＬ－１。菌株ＸＺ１７和ＸＺ２１产ＩＡＡ的能力明显低于其它菌株，分别仅为１５．８８、１２．５５μｇ·ｍＬ－１。图２菌株产ＩＡＡ的定量测定Ｆｉｇ．２ＱｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＩＡＡｐｒｏｄｕｃｅｄｂｙｓｔｒａｉｎｓ２．４菌株的分类地位选取经过定量检测分泌铁载体能力最强的２株菌株ＸＺ３和ＸＺ２２，以及分泌ＩＡＡ能力最强的２株菌株ＸＺ１３和ＸＺ１１进行分子鉴定。分别提取这４株菌株的总ＤＮＡ后，对其进行１６ＳｒＤＮＡＰＣＲ扩增，将扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳后得到了约１５００ｂｐ的目的条带。将目的片段割胶回收测序后的ＤＮＡ序列与ＮＣＢＩ数据库Ｂｌａｓｔ进行同源性比较，并采用ＭＥＧＡ４．０．１软件构建系统进化树。由图３可以看出，ＸＺ３和ＸＺ１３与短小芽孢杆菌（Ｌｙｓｉｎｉｂａｃｉｌｌｕｓｓｐ．）亲缘关系较近，而菌株ＸＺ１１与假单胞菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｓｐ．）亲缘关系较近，菌株ＸＺ２２与芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓｓｐ．）亲缘关系较近（图４）。因此，初步确定ＸＺ３和ＸＺ１
图３菌株基于１６ＳｒＤＮＡ的系统进化树Ｆｉｇ．３Ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃｔｒｅｅｂａｓｅｄｏｎｔｈｅ１６ＳｒＤＮＡｇｅｎｅｓｅｑｕｅｎｃｅｏｆｓｔｒａｉｎｓ进植物生长、抵抗病虫害的侵染和介导植物忍受重金属、养分亏缺、多环芳烃、干旱等非生物胁迫方面具有重要影响［７－８］。如具有解磷功能的细菌能将土壤中难溶性的磷酸盐转变成可溶性的磷酸盐从而促进植物对磷的吸收。能分泌铁载体的微生物，一方面能很好的螯合土壤中三价的铁离子，促进植物对铁的吸收，另一方面促生菌通过螯合铁元素，使得病原菌竞争不到铁元素，从而抑制病原微生物的生长，减少植物病害的发生［１９］。在介导植物修复重金属污染土壤方面，产铁载体微生物也发挥了重要作用，微生物分泌的铁载体还能与其它金属形成可溶性的金属－铁载体螯合物，增加土壤中重金属的溶解性或者导致植物根部氧自由基的减少，从而提高植物对重金属的富集能力和耐受能力［１８，２０］。固氮微生物则能将大气中的氮气还原为植物能利用的氨，为植物提供合成蛋白质所必需的氮素营养。分泌ＩＡＡ的细菌，则能刺激植物根系的生长，香樟能形成庞大而广泛的根系［２１］，这可能与其根际存有较多的能分泌ＩＡＡ的细菌有关。因此综合该研究的结果和前人研究的成果，课题组推测香樟根际促生菌的存在可能与香樟生长迅速、耐贫瘠、抗病虫害及对多环芳烃和重金属的富集方面有一定的联系。但具体是那些促生菌在起作用，以及这些促生菌是如何其作用的，还有待于进一步的研究。参考文献［１］ＺＨＯＵＹ，ＹＡＮＷ．Ｃｏｎｓ
【参考文献】：
硕士论文
[1]铁载体高产菌株的ARTP选育及其铁载体产量提高机理的初步分析[D]. 孙萌.江南大学 2017
本文编号：3563492
本文链接：https://www.wllwen.com/projectlw/zrdllw/3563492.html
