α-纤维蛋白原Thr312Ala基因多态性与肺动脉栓塞法医学鉴定的相关研究

发布时间：2017-11-07 16:05

  本文关键词：α-纤维蛋白原Thr312Ala基因多态性与肺动脉栓塞法医学鉴定的相关研究

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【摘要】：目的 通过对山西医科大学法医鉴定中心已经确诊的肺动脉栓塞尸检甲醛固定组织提取DNA,扩增α-纤维蛋白原Thr312Ala基因,进行固定组织与正常对照比较分析,观察其基因多态性,研究α-纤维蛋白原Thr312Ala基因多态性是否与肺动脉栓塞疾病存在相关性,并初步探讨其机制和在临床医学与法医学鉴定中的应用及意义。 方法 1.选取山西医科大学司法鉴定中心不同时间段10%福尔马林固定的心肌组织14例(选取检材的要求均符合死亡后72小时解剖,并进行固定的组织),每例标本分别按三种实验方法取50mg。分别以改良酚-氯仿法,改良Trizol法,试剂盒法,提取DNA,进行紫外分光光度计测定OD260/OD280值后,经PCR扩增,琼脂糖凝胶电泳分析来确定提取DNA质量。 2.选取山西医科大学司法鉴定中心2009-2012年已经确诊的肺动脉栓塞尸检甲醛固定组织14例(选取检材的要求均符合死亡后72小时解剖,并进行固定的组织),对照组56例,主要来自临床门诊体检者和健康志愿者,既往无DVT、PE病史,与PE患者无血缘关系,无心、脑、肺、肾、血液、内分泌系统疾病。应用改良酚-氯仿法提取DNA,聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性以及琼脂糖凝胶电泳检测α-纤维蛋白原基因Thr312Ala在甲醛固定组织中的多态性。 结果 1.三种不同从甲醛固定组织中提取DNA的方法比较,改良酚-氯仿法提取的质量最好,OD260/OD280比值为1.8415±0.3804,DNA含量为0.9438±0.5301。经PCR扩增,琼脂糖凝胶电泳显示以改良酚-氯仿法所提DNA的谱带清晰度优于其它两种方法。 2.对肺动脉栓塞病例组、正常对照组Thr312Ala基因多态性的基因型频率及基因频率进行Hurdy-Weinbarg平衡(HWE)检验,对照组及病例组均具有群体代表性(P0.05)。各基因型在肺动脉栓塞(PE)组与对照组比较(P0.05),差异有统计学意义。各等位基因在PE组与对照组比较(P0.05),差异有统计学意义,并且A等位基因与PE呈负相关(RR=0.475,P0.05),G等位基因与PE呈正相关(RR=5.818,P0.05)。 结论 本研究在应用三种不同提取方法下,证实改良酚-氯仿法简便有效,提取质量最高,并应用其方法成功提取肺动脉栓塞甲醛固定组织DNA。对尸检肺动脉栓塞甲醛固定心肌组织和正常对照组健康人群外周血进行比较,研究发现,α-纤维蛋白原基因Thr312Ala的多态性位点G等位基因与肺动脉栓塞疾病呈正关联,其基因突变更容易促使肺动脉栓塞的发生,这种作用可能是通过影响血浆纤维蛋白原水平的途径来实现的。
【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：D919.4

【参考文献】

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本文编号：1153108